薛盼盼,張 強,魏學智
(山西師范大學 生命科學院,山西臨汾 041000)
模擬干旱脅迫對酸棗種子萌發及活力的影響
薛盼盼,張 強,魏學智
(山西師范大學 生命科學院,山西臨汾 041000)
為研究干旱脅迫對4個種源酸棗種子萌發及活力的影響,采用PEG-6000溶液模擬干旱脅迫,分析在不同質量濃度PEG溶液脅迫下,4個種源酸棗種子的發芽率、發芽指數、脅迫指數、種子活力指數、胚根長、鮮質量、胚根活力、胚根體積、胚根表面積、胚根平均直徑的變化規律。結果顯示,酸棗種子的10個測定性狀均隨PEG-6000溶液質量濃度的增大而降低,且不同種源酸棗種子對干旱脅迫的響應程度不同;質量濃度為200 g/L的PEG-6000處理組中的4個種源酸棗種子均不萌發,復水后均可恢復萌發且萌發率與對照組無顯著差異;投影尋蹤模型顯示4個種源酸棗種子的抗旱性強弱關系為:煙臺<石家莊<銀川<吐魯番。
聚乙二醇;干旱脅迫;酸棗;種子萌發
在中國約有48%的土地處于干旱半干旱地帶,其中沒有灌溉條件的旱地占耕地面積的51.9%[1],而干旱是植物分布、生長和產量的主要限制因素[2]。種子萌發是種子植物生活史上的重要階段,自然環境下,植物種子在萌發期遇到干旱時,其抗旱能力的大小對幼苗的生存意義重大[3-5]。因此,對種子萌發進行抗旱性研究有極其重要的意義。PEG是一種高分子滲透劑,親水性強且不能透過細胞壁,從而能使植物處于類似于干旱的環境中,所以可以用來模擬干旱脅迫。這種方法具有時間短、容量大、操作簡單、可重復性強等優點[6]。采用 PEG模擬干旱脅迫對種子的抗旱性進行研究是目前研究的熱點[7-14]。
酸棗(ZizyphusjujubaMill)為鼠李科(Rhamnaceae)棗屬(ZizyphusMill)落葉灌木或小喬木,廣泛分布于華北、西北、東北和華東的向陽山坡、荒蕪丘陵和平原[2]。酸棗的經濟價值和藥用價值較高,同時對于防風固沙、水土保持效果良好,具有很好的生態效益[15]。以往關于酸棗的研究多集中在對其形態、結構以及生理生化特性[16-22]的探索上,而有關水分脅迫對其種子萌發影響的研究甚少。種子萌發是酸棗生長的起點,而水分是影響其萌發的關鍵因素。在萌發期遇到干旱的自然環境時,酸棗種子的抗旱能力越強,幼苗的存活率就越高[3,23],因此探究干旱脅迫對酸棗種子萌發影響的意義重大。本研究采用不同質量濃度的PEG-6000(聚乙二醇,以下簡稱PEG)溶液模擬干旱環境,對采自4個地區的酸棗種子進行干旱脅迫試驗,探討干旱對酸棗種子萌發及活力的影響,為研究其抗旱機制提供參考。
1.1 選材地區概況
2013年9月,按自然氣候干旱梯度,分別從煙臺、石家莊、銀川、吐魯番4個天然居群采集酸棗種子,采樣地區地理環境及氣候特征見表1。經測定,煙臺、石家莊、銀川、吐魯番的酸棗種子百粒質量分別為3.05、3.18、2.86、3.48 g。
1.2 試驗方法
挑選出大小均勻、飽滿、無病蟲害的酸棗種子,試驗前將種子用φ=70%的酒精殺菌15 s,再用無菌水沖洗3次,最后用吸水紙吸干,備用;在洗凈的培養皿中墊入濾紙,把酸棗種子均勻整齊地放入培養皿中,每個培養皿中放入30粒種子,PEG的質量濃度依次為0、50、100、150、200 g/L,其中0 g/L為對照(CK),50 g/L為輕度干旱脅迫,100、150 g/L為中度干旱脅迫,200 g/L為重度干旱脅迫,每個梯度重復3次[23];將處理好的種子放置于25 ℃的培養箱中培養(光照12 h,黑暗12 h);采用電子天平稱量法,每天定時添加蒸餾水,以保持培養皿內PEG溶液的質量濃度基本不變;將種子置于培養皿中即為試驗開始,當胚根長度為種長的1/2時,作為種子萌發的標志;每天9:00觀察種子的萌發情況并記錄發芽數量,連續培養18 d,待萌發結束后,從每個培養皿中隨機選出10株,用電子天平對其質量進行測定;用根系掃描儀測其胚根長、胚根體積、胚根表面積、胚根平均直徑;用TTC[24]法測定其胚根活力;指標的計算參照文獻[25]。

表1 采樣地區地理環境及氣候特征
發芽率GR=發芽種子數/處理種子數×100%。
發芽指數GI=∑(Gt/Dt);Gt為第t天的發芽種子數,Dt為發芽時間。
萌發脅迫指數SI=脅迫下種子發芽指數/對照種子發芽指數。
種子活力指數VI=發芽指數×苗長。
1.3 綜合抗旱性評價方法
利用投影尋蹤模型[26]對4個種源酸棗種子的抗旱性進行綜合評價。該方法可以根據樣本數據特性尋求最佳投影方向,利用最佳投影方向判斷各評價指標對綜合評價的貢獻大小和方向,并根據最佳投影方向與評價指標的線性投影得到評價投影值[27],該數值越大反映其抗旱性越強。
1.4 數據處理
數據統計分析采用Excel軟件,方差分析采用SPSS軟件,投影尋蹤模型分析采用DPS軟件。
2.1 干旱脅迫對4個種源酸棗種子萌發的影響
種子萌發活力通常由發芽率、發芽指數等指標進行衡量[8]。由表2可知,4個種源酸棗種子的發芽率、發芽指數、脅迫指數、種子活力指數都隨PEG干旱脅迫程度的增加而降低,但不同種源酸棗種子對干旱脅迫的響應程度不同。同一種源酸棗種子的發芽率、發芽指數、脅迫指數、種子活力指數在PEG質量濃度為0、50、100、150 g/L的4個處理組間差異均顯著(P<0.05)。在0 g/L質量濃度的PEG處理組內,煙臺和銀川酸棗種子的發芽率差異不顯著(P>0.05),煙臺與石家莊、銀川與吐魯番酸棗種子的發芽指數差異不顯著(P>0.05),4個種源酸棗種子間的種子活力指數差異顯著(P<0.05);在50 g/L質量濃度的PEG處理組內,銀川和吐魯番酸棗種子的發芽指數差異不顯著(P>0.05),4個種源酸棗種子間的發芽率、脅迫指數、種子活力指數的差異均顯著(P<0.05);在100 g/L 質量濃度的PEG處理組內,銀川和吐魯番酸棗種子的脅迫指數差異不顯著(P>0.05),4個種源酸棗種子間的發芽率、發芽指數、種子活力指數的差異均顯著(P<0.05);在150 g/L質量濃度的PEG處理組內,銀川與石家莊、吐魯番酸棗種子的脅迫指數差異不顯著(P>0.05),4個種源酸棗種子間的發芽率、發芽指數、種子活力指數的差異均顯著(P<0.05)。
2.2 干旱脅迫對4個種源酸棗種子生長的影響
由表3可知,在PEG模擬干旱脅迫的過程中,隨著PEG質量濃度的增大,4個種源酸棗的胚根長、胚根體積、胚根表面積、胚根平均直徑、鮮質量、胚根活力均呈下降趨勢。4個種源酸棗的胚根長、胚根體積、胚根表面積、胚根平均直徑、鮮質量、胚根活力在PEG質量濃度為0、50、100、150 g/L的4個處理組間差異均顯著(P<0.05)。在0 g/L質量濃度的PEG處理組內,4個種源酸棗的胚根長、胚根體積、胚根表面積、胚根平均直徑、鮮質量的差異均顯著(P<0.05);在50 g/L質量濃度的PEG處理組內,銀川和吐魯番酸棗的胚根長差異不顯著(P>0.05),石家莊和銀川酸棗的胚體積、胚平均直徑的差異均不顯著(P>0.05),4個種源酸棗的胚根表面積、鮮質量、胚根活力的差異均顯著(P<0.05);在100 g/L質量濃度的PEG處理組內,煙臺和吐魯番酸棗的胚根體積差異不顯著(P>0.05),銀川和石家莊、吐魯番酸棗的鮮質量差異不顯著(P>0.05),銀川和吐魯番酸棗的胚根活力差異不顯著(P>0.05),4個種源酸棗間胚根長、胚根表面積、胚根平均直徑的差異均顯著(P<0.05);在150 g/L質量濃度的PEG處理組內,4個種源酸棗間的胚根長、胚根表面積、胚根平均直徑、胚根活力的差異均顯著(P<0.05),石家莊與煙臺、銀川、吐魯番酸棗的胚根體積差異顯著(P<0.05),煙臺與石家莊、銀川、吐魯番酸棗的鮮質量差異顯著(P<0.05)。

表2 干旱脅迫下酸棗種子的萌發性狀
注:同列中不同大寫字母表示同一種源的酸棗種子在不同質量濃度PEG處理組間差異顯著(P<0.05);不同小寫字母表示同一質量濃度PEG處理組內不同種源的酸棗種子間差異顯著(P<0.05)。由于4個種源酸棗種子在質量濃度為200 g/L的PEG溶液中均不萌發,所以表中未列出,下同。
Note:Values with different capital letters show significant differences among different mass concentrations of PEG lead processing in the same provenanceZizyphusjujubaseeds atP<0.05.Values with different small letters show significant differences among different provenanceZizyphusjujubaseeds in the same mass concentrations of PEG lead processing atP<0.05.The four provenances ofZizyphusjujubaseeds could not germinate when the PEG mass concentrations was 200g/ L,so the 200g/ L no list in the table.The same below.
2.3 200 g/L PEG處理組酸棗種子的恢復萌發
當PEG的質量濃度為200 g/L時,4個種源的酸棗種子均不萌發。將這個處理組中的4個種源酸棗種子用蒸餾水沖洗后,在相同的培養條件下用蒸餾水進行恢復萌發試驗。結果表明,脅迫解除后第1天吐魯番的酸棗種子就開始萌發;第2天煙臺、石家莊、銀川的酸棗種子均開始萌發。最終4個種源酸棗種子的發芽率為89%、84%、88%、92%,與對照組的發芽率均無顯著差異(P>0.05)。
2.4 4個種源酸棗種子抗旱性綜合評價
利用投影尋蹤方法[26]以4個種源酸棗種子萌發的10個指標作為基本數據,得到最佳投影方向α=(0.234 2,0.292 0,0.491 4,0.369 2,0.449 2,0.316 9,0.211 2,0.160 6,0.238 2,0.229 6)。各分量所代表的指標依次為:發芽率、發芽指數、脅迫指數、種子活力指數、胚根長、鮮質量、胚根活力、胚根體積、胚根表面積、胚根平均直徑。從最佳投影方向可以看出,這10個指標為同一方向,即表明這10個指標均隨PEG質量濃度的增大而下降;根據各分量數值的大小可知,脅迫指數對種子抗旱性的響應最大,胚根長、種子活力指數的響應較大,鮮質量、發芽指數、胚根表面積、發芽率次之,胚根平均直徑、胚根活力的響應較小,胚根體積對抗旱性的響應最小。
根據最佳投影方向與評價指標的線性投影得到評價投影值見表4。由表4可知,從煙臺到吐魯番酸棗種子的評價投影值依次增大,這表明其抗旱性依次增強。所以,4個種源酸棗種子的抗旱性由弱到強依次為:煙臺、石家莊、銀川、吐魯番。

表3 干旱脅迫下酸棗種子的生長性狀

表4 4個種源酸棗種子的指標投影值和評價投影值
本試驗結果表明,不同質量濃度的PEG溶液對4個種源酸棗種子的萌發均具有抑制作用:發芽率、發芽指數、脅迫指數、種子活力指數、胚根長、鮮質量、胚根活力、胚根體積、胚根表面積、胚根平均直徑這10項指標均隨干旱脅迫強度的增大而下降。武沖等[10]對沙棗、白蠟、麻楝等植物的研究表明“PEG溶液對種子萌發具有抑制作用,且濃度越大抑制作用越嚴重”,這與本試驗結果一致。可能是因為植物萌發緩慢、發芽率低能保證其幼苗在干旱環境中存活,這對其種族延續具有重大意義。趙玉坤等[11]對玉米的研究結果表明玉米種子隨著PEG濃度的增大對胚根的抑制作用增強,而李志萍等[12]對栓皮櫟的研究表明低濃度的PEG溶液對其種子的萌發及胚根的生長具有促進作用。這表明低濃度的PEG溶液對種子的萌發及生長是否具有促進作用,可能與植物的種類、脅迫梯度的設置以及脅迫時間的長短有關。
200 g/L PEG處理組的4個種源酸棗種子解除脅迫后遇充足水分都立即開始萌發,且萌發整齊,這與羅光宏等[9]對唐古特白刺種子和黃修梅等[13]對高原野韭種子在高濃度PEG處理下不萌發而復水后快速萌發的研究結果一致。這可能是植物為避免種子萌發后因環境缺水而致其幼苗大量死亡的情況的發生。這是植物對干旱環境適應性的一種策略,能有效提高其在惡劣環境中的存活率。
抗旱性是一個受多因素影響的復雜數量性狀,單一指標難以全面準確地反映植物抗旱性的強弱[14],所以本文采用投影尋蹤法將多個指標進行綜合評價,這樣更具有可靠性。通過對4個種源酸棗種子的發芽率、發芽指數等10項指標進行投影尋蹤得出:脅迫指數、胚根長、種子活力指數對種子抗旱性的響應較大;煙臺、石家莊、銀川、吐魯番酸棗種子的抗旱性依次增強。這可能是因為煙臺、石家莊、銀川、吐魯番4個地區的降雨量依次減少,為了適應不同的環境,不同種源的酸棗種子根據受干旱影響大小來調整其生長和代謝機制,最終導致其抗旱性不同。
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(責任編輯:郭柏壽 Responsible editor:GUO Baishou)
Effects of Simulated Drought Stress on Germination
and Vigor ofZizyphusjujubaSeeds
XUE Panpan,ZHANG Qiang and WEI Xuezhi
(College of Life Science,Shanxi Normal University,Linfen Shanxi 041000,China)
The study was carried out to research the effects of drought stress on seed germination and vigor of four provenances ofZizyphusjujuba. PEG-6000 was used to simulate drought stress,the changes of seed germination rate,germination index,stress index,seedling vigor index,radicle length,fresh mass,radicle activity,radicle volume,radicle surface,average radicle diameter were studied with different mass concentrations of PEG-6000. all ten indexes decreased with the increase of mass concentrations of PEG-6000,and various responses were detected among different provenances ofZizyphusjujubaseeds. When the mass concentrations of PEG-6000 was 200g/ L,the seeds could not germinate,but they could regerminate after rehydration and had no differences with the control group.Using the projection pursuit model,drought resistance of four provenances ofZizyphusjujubaseedswas listed as Yantai PEG;Drought stress;Zizyphusjujuba;Seed germination XUE Panpan,female,master student. Research area: the drought resistance ofZizyphusjujuba. E-mail: 543790519@qq.com WEI Xuezhi,male,master supervisor. Research area: the structure and physiological characteristics of drought resistant plants. E-mail: wxz3288@163.com 2016-02-25 2016-03-18 國家自然科學基金(30972396);山西省自然科學基金(2009011041-1)。 薛盼盼,女,碩士研究生,研究方向為酸棗的抗旱性。E-mail: 543790519@qq.com 魏學智,男,碩士生導師,研究方向為抗旱植物的結構和生理特性。E-mail: wxz3288@163.com 日期:2016-12-12 網絡出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1220.S.20161212.1117.028.html Q945 A 1004-1389(2016)12-1837-07 Received 2016-02-25 Returned 2016-03-18 Foundation item The National Natural Science Foundation of China (No. 30972396);the Shanxi Natural Science Foundation (No. 2009011041-1).