女性不孕不育患者抗精子抗體產(chǎn)生與疾病的相關(guān)性分析

摘要：目的 分析抗精子抗體（anti-sperm antibody，AsAb）產(chǎn)生與女性不孕不育的關(guān)系以及女性AsAb的產(chǎn)生與臨床疾病關(guān)聯(lián)性。方法 用ELISA法測(cè)定研究對(duì)象AsAb，分析女性不孕不育患者與健康對(duì)照組之間AsAb陽性率的差別；并進(jìn)一步對(duì)女性不育不孕患者病史進(jìn)行分析，初步探討AsAb陽性形成的可能病因。結(jié)果 與正常對(duì)照組相比，女性不育不孕患者血清AsAb-IgG、IgM和IgA陽性率增高（P<0.05）；女性不育不孕組中，不良流產(chǎn)史和宮頸炎患者AsAb陽性率明顯高于健康對(duì)照組（P<0.05），而盆腔炎和HPV感染患者陽性率與健康對(duì)照組差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 AsAb產(chǎn)生與女性不育不孕有相關(guān)性，而不良流產(chǎn)史和宮頸炎可能是導(dǎo)致女性體內(nèi)產(chǎn)生AsAb的可能誘因之一。

關(guān)鍵詞：不孕不育；AsAb

精子對(duì)女性來說是屬于同種異體抗原，其與女性機(jī)體免疫系統(tǒng)接觸后，會(huì)引起自身或者同種免疫系統(tǒng)反應(yīng)，從而產(chǎn)生AsAb[1]。AsAb可降低精子的活力、阻止與受精卵的結(jié)合以及降低男精子穿透子宮頸黏液的能力，造成女性不孕不育[2，3]。女性生殖道炎癥、子宮內(nèi)膜損傷等因素存在時(shí)，男性精子在結(jié)口損傷部與機(jī)體的免疫系統(tǒng)會(huì)接觸，增加了精子抗原與女性宮頸上皮或者子宮內(nèi)膜免疫細(xì)胞接觸的機(jī)會(huì)，刺激女性產(chǎn)生循環(huán)或生殖道局部的AsAb[4，5]。因此，AsAb產(chǎn)生可能與生殖道損傷有著密切的關(guān)系。本文分析了不孕不育患者疾病既往史的類別，并進(jìn)一步分析各疾病AsAb陽性率與健康對(duì)照組之間的差異，以初步了解AsAb產(chǎn)生與臨床疾病關(guān)系，為深入探討與AsAb產(chǎn)生的機(jī)制提供新的思路。

1資料與方法

1.1儀器與試劑 AsAb檢測(cè)試劑盒（伊利康生物技術(shù)有限公司）；洗板機(jī)和酶標(biāo)儀（深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司）；37℃恒溫水浴箱。

1.2研究對(duì)象

1.2.1非不孕不育女性組 選擇2014年8月～2015年2月本院確診為早孕孕周8w以內(nèi)女性對(duì)象106例，年齡為（24.3±4.1）歲，排除自身免疫性疾病。

1.2.2不孕不育女性患者組 選擇同期本院生殖中心確診為不育不孕女性患者113例，年齡（25±3.8）歲。排除輸卵管堵塞，內(nèi)分泌疾病等繼發(fā)性不孕患者。不育不孕診斷標(biāo)準(zhǔn)符合《婦產(chǎn)科學(xué)》第7版。

1.2.3不孕不育患者組各疾病組 根據(jù)不孕不育患者組生殖系統(tǒng)疾病既往史，將不孕不育組分為不良流產(chǎn)史組、盆腔炎組、宮頸炎組、HPV感染組和無明顯既往史組，分別占32例、12例、41例、17例和11例。其中不良流產(chǎn)史指既往有人工流產(chǎn)史。各疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《婦產(chǎn)科學(xué)》第7版。

1.2.4健康人對(duì)照組 隨機(jī)選取健康體檢女性人群40例，作為各疾病組的對(duì)照組，年齡為（22±1.8）歲。排除不良流產(chǎn)史、盆腔炎、宮頸炎和HPV感染等疾病。

1.3標(biāo)本采集與處理

1.3.1血清標(biāo)本采集與處理 所有研究對(duì)象清晨空腹經(jīng)肘靜脈采血3 mL于分離膠真空采血管，37℃恒溫水浴箱中放置20 min，以3500 r/min離心10 min取血清進(jìn)行檢測(cè)，剔除溶血標(biāo)本。

1.3.2宮頸分泌物標(biāo)本采集與處理 用棉拭子在宮頸穹窿處取宮頸分泌物，然后將棉拭子置于EP管中，每管加入滅菌生理鹽水0.5ml，混勻，待用。

1.4血清/宮頸分泌物AsAb的檢測(cè) 采用間接酶聯(lián)免疫吸附法，按照試劑盒操作說明書，檢測(cè)研究對(duì)象血清AsAbIgG和IgM，宮頸分泌物AsAbIgA。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。兩組率之間的比較采用四格表資料χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1非不孕不育組與不育不孕患者組之間AsAb的差別 106例非不孕不育對(duì)象中AsAbIgG陽性只有3例，陽性率為2.83%；無IgM陽性；有1例檢測(cè)出宮頸分泌物IgA陽性，陽性率為0.09%。在113例不育不孕患者組中，檢測(cè)出16例AsAbIgG陽性，陽性率為14.16%；IgM陽性5例，陽性率為4.42%；宮頸分泌物IgA陽性18例，陽性率為15.93%。不育不孕患者組AsAbIgG、IgM和IgA陽性率均顯著高于非不孕不育組（χ2分別為8.860、4.666和15.503，P<0.05），見表1。

2.2在113例女性不育不孕患者中，其中有不良流產(chǎn)史者占32例，患盆腔炎者12例，宮頸炎41例，HPV感染者17例，無明顯既往史者11例。106例非不孕不育組患者中，不良流產(chǎn)史者占11例，盆腔炎者占3例，宮頸炎這占19例，HPV感染者占3例，無明顯既往史者占70例。各病例分布見圖1和圖2。

2.3不孕不育患者組中各疾病組與健康人對(duì)照組AsAb陽性率的比較 40例健康人對(duì)照組中，僅1例子檢測(cè)出AsAb陽性，陽性率為2.56%，而不孕不育患者組中，有不良流產(chǎn)史者32例、患盆腔炎者12例、宮頸炎41例和HPV感染者17例，分別檢出8例、2例、7例和1例AsAb陽性，陽性率分別為33.33%、20.00%、20.59%和6.25%。各組AsAb陽性率與健康人對(duì)照組比較，不良流產(chǎn)史和宮頸炎組AsAb陽性率顯著高于健康人對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2分別為8.229和4.831，P<0.05）；而盆腔炎組和HPV感染組與對(duì)照組比，陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），各組比較見表2～表5。

3討論

研究表明，AsAb與女性不孕不育有著非常密切的關(guān)系。本研究比較分析了不孕不育患者和健康對(duì)照組AsAb陽性率，發(fā)現(xiàn)不孕不育患者組AsAb陽性率高達(dá)34.51%，明顯高于健康對(duì)照組，與前面學(xué)者報(bào)道基本吻合[6，7]。進(jìn)一步的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在不孕不育患者中，主要病史有不良流產(chǎn)史，盆腔炎，宮頸炎和HPV感染，還有一些無明顯既往史的患者。而非不育不孕組上述既往史發(fā)病率普遍較低，說明不良流產(chǎn)史，盆腔炎，宮頸炎和HPV感染與不孕不育可能有著密切的關(guān)系。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，不良流產(chǎn)史和宮頸炎患者AsAb陽性率明顯高于健康人對(duì)照組。而盆腔炎和HPV感染患者AsAb陽性率無顯著差異。說明不良流產(chǎn)史和宮頸炎可能與AsAb的產(chǎn)生有著一定的關(guān)系，AsAb是兩者引起不孕不育的可能原因之一。而盆腔炎和HPV感染與AsAb無明顯的關(guān)系。由于本研究病例數(shù)有限，本院其他內(nèi)科系統(tǒng)診斷水平有限，無法獲得更多與AsAb產(chǎn)生有關(guān)的病例，無法開展大規(guī)模的調(diào)查和分析。下一步有待更深層次的進(jìn)行多中心，大規(guī)模的臨床調(diào)查和分析、開展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)，以探討AsAb產(chǎn)生的機(jī)制以及與疾病的關(guān)系。

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