藍(lán)莓組織培養(yǎng)體系的建立

摘要：本文以藍(lán)豐為試驗對象，確定了藍(lán)莓外植體的最佳消毒時間是8-10min，最適宜的增殖培養(yǎng)基為WPM+ZT1.0mg/L+IBA0.1mg/L，最最適宜的生根粉（ABT 1號）濃度為1.0g/L。

關(guān)鍵詞：藍(lán)莓；組織培養(yǎng)；增殖；生根

藍(lán)莓（Blueberry），又名越橘，是一種多年生的落葉果樹。藍(lán)莓，果實為深藍(lán)色，因此得名藍(lán)莓。藍(lán)莓在我國的種植時間比較長，主要的種植區(qū)域在我國的華東、華中、華南到西南以及東北地區(qū)，野山藍(lán)莓主要分布在山地以及不規(guī)則的丘陵地帶，主要海拔高度為400～1400 米[1]。藍(lán)莓果實中含有大量的營養(yǎng)物質(zhì)，平均每100克新鮮果實內(nèi)含蛋白質(zhì)600mg，脂肪550 nag，碳水化合物14 g，并且還含有豐富的維生素和微量元素，尤其是Ca、P、Mg、Zn、Fe、Cu含量特別豐富，其抗氧化能力顯著高于其它水果[2]。

本試驗以現(xiàn)在種植面積比較大的藍(lán)豐品種為研究對象，對其組織培養(yǎng)體系的建立進(jìn)行了研究，希望可以為我國藍(lán)莓的繁殖技術(shù)提供參考依據(jù)。

1試驗材料與方法

1.1 試驗材料

本次試驗的材料取自聊城市農(nóng)科院的自建苗圃內(nèi)。

1.2試驗方法

1.2.1 初代培養(yǎng)

在春季藍(lán)莓剛剛開始發(fā)芽時，挑選生長良好，沒有病蟲害的當(dāng)年生紙條，用枝剪剪下，然后簡稱1cm作用長度的小段，一個小段上至少帶一個飽滿芽，用流動的自來水沖洗30min，然后在超凈臺內(nèi)用75% 的酒精首次消毒處理，時間30s，用無菌水沖洗3-5次，以外植體上完全沒有酒精味道為準(zhǔn)，然后再用0.1%的HgCl溶液進(jìn)行二次消毒處理，完成后再用無菌水沖洗3-5次。根據(jù)HgCl消毒時間的長短，分為6個處理，每個處理50瓶，每瓶1個外植體，重復(fù)3次。45天后統(tǒng)計外植體的生長情況。

1.2.2增殖培養(yǎng)

在初代培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)45天后，轉(zhuǎn)移到增殖培養(yǎng)基內(nèi)（蔗糖含量、瓊脂含量、pH、溫度、光照時間同上），基本培養(yǎng)基為WPM，根據(jù)ZT和IBA的濃度，分為9個處理，每個處理20瓶。每瓶5個，重復(fù)3次。45天后統(tǒng)計外植體的增殖情況。

1.2.3 生根培養(yǎng)

培養(yǎng)50天，用剪刀分成單株，然后用生根粉蘸根，栽植到生根基質(zhì)（苔蘚）中，大約45天后，其根部就會長出細(xì)小的根系。根據(jù)生根劑的濃度分為4個處理。每個處理100顆小苗，重復(fù)3次。45天后統(tǒng)計生根情況。

2 實驗結(jié)果及分析

2.1 不同消毒時間對消毒效果的影響

消毒時間依次為4、6、8、10.、12min，其污染率分別為92%、11%、4%、2%、4%、2%，萌芽率依次為4%、83%、93%、92%、86%、85%。消毒時間少于6min，消毒效果不理想，污染率比較高，消毒時間超過12min，外植體就會因為汞中毒影響發(fā)芽率，所以消毒時間控制在8-10min最合適，此時外植體的污染率最低，萌芽率最高。

2.2 不同激素濃度對外植體增殖及生長的影響

通過表2可以看出當(dāng)ZT的濃度一樣時，IBA的濃度變化對外植體的增殖倍數(shù)影響較小，但是當(dāng)IBA的濃度一樣時，ZT的濃度變化對外植體的增殖倍數(shù)影響較大，當(dāng)ZT的濃度為1.0 mg/L時，其增殖倍數(shù)顯著高于ZT濃度為0.5mg/L時的增殖倍數(shù)，但是當(dāng)ZT的濃度為1.5 mg/L時，其增殖倍數(shù)和ZT濃度為1.0mg/L時的增殖倍數(shù)沒有顯著差異。結(jié)合顏色和莖粗可確定最適宜的增殖培養(yǎng)基為WPM+ZT1.0mg/L+IBA0.1mg/L。

2.3 不同生根劑濃度對組培苗生根率的影響

本次使用的生根劑為ABT1號，通過表3可以看出當(dāng)生根劑的濃度為1.0 g/L時組培苗的生根率最高，平均生根數(shù)量最多，所以最適宜的生根粉濃度為1.0g/L。

3 結(jié)論

（1）基本培養(yǎng)基為WPM，蔗糖含量為30g/L，瓊脂含量為6g/L，pH5.8。溫度25℃，光照時間16h。

（2）外植體的消毒方式：先用流動的自來水沖洗30min，然后用75%的酒精浸泡30s，最后用O.1%的氯化汞浸泡8-10min。

（3）增殖培養(yǎng)：ZT濃度為1.0mg/L，IBA濃度為0.1mg/L。

（4）生根培養(yǎng)：ABT 1號的濃度為1.0g/L。

近年來，我國關(guān)于藍(lán)莓的相關(guān)研究取得了很大的成績，但是，藍(lán)莓優(yōu)質(zhì)種苗的培育和大量繁殖依然是阻礙藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展的一大障礙。所以，這就要求相關(guān)專家在培育優(yōu)質(zhì)藍(lán)莓品種的同時，繼續(xù)深入研究不同藍(lán)莓品種的最優(yōu)組織培養(yǎng)基配方，為藍(lán)莓的快速繁殖奠定基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 張鳳生，鹿娜，姜淼，李健虹，薛丹丹，王保菊，武斌，趙娜. 藍(lán)莓組織培養(yǎng)與快速繁育[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（3）：3-5.

[2] 鄭理喬. 兔眼藍(lán)莓組織培養(yǎng)技術(shù)的研究[D].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.