超臨界提取苦橙精油的成分分析

摘要：采用超臨界流體萃取得到苦橙（Citrus bigarradia V.）精油，利用GC-MS分析揮發(fā)性香味成分，并進行感官質(zhì)量評價。結(jié)果表明，超臨界苦橙精油得率為3.56%，苦橙精油中檢測出58種揮發(fā)性成分，括萜烯類18種、醇類11種、醛類10種、酮類9種、酯類9種，相對含量較高為檸檬烯（90.01%）、月桂烯（3.11%）和α-蒎烯（1.05%）等成分，苦橙精油具有香甜的花香味和橘子、檸檬的果香，清甜而鮮。

關(guān)鍵詞：苦橙（Citrus bigarradia V.）；超臨界萃取；氣質(zhì)聯(lián)用；香味

中圖分類號：O65 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）12-3182-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.12.046

Abstract：The volatile oil of Citrus bigarradia V. was by supercritical fluid， then the volatile flavor compounds of oil were analyzed by capillary gas chromatography-mass spectrometry（GC-MS） and added to cigarettes as flavors. The results showed that average yield of the volatile oil was 3.56%，58 constituents were identified in oil， the oil include 18 terpene， 11 alcohols，10 aldehydes， 9 ketones and 9 esters. The volatile oil of Citrus bigarradia V. has fresh and sweet floral，fruits note.

Key words：Citrus bigarradia V.；supercritical extraction；GC-MS；flavor

苦橙（Citrus bigarradia V.）屬蕓香科常綠小喬木，亦稱為酸橙樹，原產(chǎn)于中國及日本，引入歐洲后，被廣泛種植和利用[1]。最初，人們將其用作于殺菌劑和鎮(zhèn)定劑，現(xiàn)在被廣泛用于食品、日化、醫(yī)藥等方面。苦橙果皮、葉、花和果實均可被加工利用，苦橙精油已進入美國食品香料和萃取物制造者協(xié)會（FEMA）的食用香料名錄，同時也被中國食品添加劑使用衛(wèi)生標準納入允許食品香料[2]。苦橙精油與同為蕓香科香料植物的甜橙相似，但苦橙精油的香氣品質(zhì)、功效作用較甜橙精油都略勝一籌，因此苦橙精油的價格也相對較高，若將少量的苦橙精油添加到甜橙精油中，可得到很好的效果[2]，關(guān)于甜橙精油的加工和成分分析報道相對較多[3-8]，而對苦橙精油的揮發(fā)性成分則鮮見報道。為進一步開發(fā)苦橙精油資源，利用超臨界提取苦橙的揮發(fā)油，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對苦橙精油的揮發(fā)性成分進行分離和鑒定，旨在為掌握苦橙精油內(nèi)在組成成分以及擴大其應(yīng)用范圍提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

苦橙皮由廣西產(chǎn)苦橙去除果肉而得；色譜乙醇，百靈威科技有限公司。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent 7890/5977，美國Agilent公司）；超臨界萃取裝置（HA221-50-02，杭州華黎泵業(yè)有限公司）。

1.2 樣品制備與處理

將苦橙皮適當破碎，置于超臨界萃取釜中，開啟CO2鋼瓶，通過加壓系統(tǒng)加壓，當萃取釜壓力達到18.5 MPa時關(guān)閉CO2鋼瓶，萃取溫度為35 ℃，萃取時間為45 min，然后解析釜中得到苦橙精油，回收率為3.56%。

稱取上述苦橙精油0.100 0 g轉(zhuǎn)移至5 mL容量瓶，用無水乙醇溶解稀釋，并定容至刻度，經(jīng)有機濾膜（0.45 μm）過濾至1.5 mL色譜瓶。

1.3 氣相色譜-質(zhì)譜分析條件

色譜柱HP-5MS（60 m×0.25 mm×0.25 μm）；載氣氦氣流量1.0 mL/min；進樣口溫度260 ℃；進樣量1 μL；分流比10∶1；升溫程序初始為50 ℃，持續(xù) 2 min，升溫速率為4 ℃/min，升溫至280 ℃并保持20 min。質(zhì)譜的傳輸線溫度為280 ℃；電子倍增器 1 700 V；掃描方式全掃描，溶劑延遲7 min。

1.4 苦橙精油成分定性定量分析

苦橙精油氣相色譜-質(zhì)譜分析后，各分離成分進行NIST/Wiley譜庫檢索分析，對主要成分先利用保留指數(shù)進行定性分析，然后采用色譜峰面積歸一化法進行相對定量。

1.5 苦橙精油的感官評價

按照GB/T 14454.2-93的方法組成感官評價小組，在無雜氣、異味、空氣流通感官評價室內(nèi)進行，取1.0 g的苦橙精油樣品置于潔凈、無異味10 mL辯香瓶內(nèi)，用辨香紙蘸苦橙精油試樣，由小組成員進行感官評價，全面評定其香氣品質(zhì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 苦橙精油揮發(fā)性成分分析

超臨界萃取苦橙精油的總離子流如圖1所示，其成分分析結(jié)果見表1。由表1可知，在超臨界萃取的苦橙精油中揮發(fā)性成分共計有58種，其中包括萜烯類18種、醇類11種、醛類10種、酮類9種、酯類9種。含量最高的是檸檬烯，達到90%以上，相比文獻報道的甜橙精油中的檸檬烯較高[3，4]。這也成為鑒別市售的真假苦橙精油的依據(jù)之一。苦橙精油中檸檬烯具有新鮮的橘子-檸檬果香，清甜而鮮，香氣輕飄，但不持久，是苦橙精油的主成分，也是其特征香氣成分。除檸檬烯外，其他含量成分也都發(fā)揮著重要的作用，如蒎烯清涼的松木香氣；月桂烯通常有愉悅、清淡的果香香韻；芳樟醇有清新的花，弱的柑桔香，可增加加香產(chǎn)品的花香、清香，提調(diào)辛香韻味，使其吸味柔和；壬醛、癸醛具有強烈的柑橘和檸檬樣的果香香韻；乙酸辛酯的類似橙花與茉莉，微帶脂蠟和青氣的花果香氣等。這些成分香氣特征各有不同，但互相配伍協(xié)調(diào)，構(gòu)成了苦橙精油獨特的香韻，這對苦橙精油香韻有較大貢獻，也為苦橙精油的應(yīng)用提供了數(shù)據(jù)支撐。

2.2 苦橙精油感官評價

按照“1.5”方法對超臨界萃取的苦橙精油感官質(zhì)量進行評價。結(jié)果表明，苦橙精油具有香甜的花香味和橘子、檸檬的果香，清甜而鮮，香氣輕飄，花香和果香交替散發(fā)，穿透性較強，令人愉悅，留香持久。

3 結(jié)論

利用超臨界流通萃取苦橙精油，得率為3.56%，經(jīng)氣相色譜質(zhì)譜對苦橙精油進行分析，鑒定出58種揮發(fā)性成分，括萜烯類18種、醇類11種、醛類10種、酮類9種、酯類9種，相對含量較高的有檸檬烯（90.01%）、月桂烯（3.11%）和α-蒎烯（1.05%）等成分，苦橙精油具有香甜的花香味和橘子、檸檬的果香，清甜而鮮，苦橙精油有較好的應(yīng)用前景。

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