紅龍魚鰓部腫瘤的初步研究

摘要：對紅龍魚（Scleropages formosus）鰓部腫瘤進行了病理切片研究。結果表明，該腫瘤是由外界不良因素長期刺激導致的腺體大量分泌，纖維素、蛋白、炎癥細胞大量分泌纖維化而成的疏松結蹄組織囊腫性腫瘤。

關鍵詞：紅龍魚（Scleropages formosus）；腫瘤；鰓部

中圖分類號：S943 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）12-3147-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.12.035

Abstract： In this study， the pathological section were adopted to analyze the gill tumor of Scleropages formosus. The results showed that the tumor belonged to cystic tumor of loose connective tissue which induced by too much secretion of cellulose， proteins and inflammatory cells from glands and secretion fibrosis. The root reason was long-term stimulation from adverse external factors.

Key words：Red arrowana（Scleropages formosus）； tumor； gill

紅龍魚（Scleropages formosus）屬古代魚類，骨舌魚科，繁殖能力弱，雌魚產卵，雄魚含在口中進行孵化和養育，行為非常奇特。因其嘴上的兩條胡須加上閃光發亮的大鱗片及其遠古的身世，使人們自然而然地將它與神秘的龍聯系起來，稱為“龍魚”。在東南亞、港澳臺地區和國外華人集中的地方，龍魚被視為神魚，被認為可以旺家、鎮宅、避邪，作風水魚來養，尤其是紅龍魚，由于瀕臨絕種，在1980年華盛頓野生動物保護條約列為甲級保護動物而身價高漲。在港澳臺，一條紅龍魚的價格有的超過百萬元，被視作家財和身份地位的象征。日前，有媒體報道稱，湖北省武漢市漢口球場路花鳥市場里，一條身長50 cm，質量3～4 kg的紅龍魚，標價268萬元。

紅龍魚體格強健，一般不容易生病。常見的疾病主要有翻鰓、水霉、白點、腸炎等[1]。對于紅龍魚鰓部腫瘤國內外文獻尚未見報道。本文主要對其鰓部腫瘤進行了病理研究，以期為龍魚鰓部腫瘤疾病的防治提供理論和技術支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗病魚為新加坡仟湖漁場1齡左右的辣椒紅龍魚，未見明顯癥狀，在喂魚過程中偶然通過腮蓋和身體的縫隙看到有一個腫塊。魚體經過專用麻醉劑麻醉后，快速用手術剪刀切除（圖1），腫瘤呈灰白色，約3～4 cm。

1.2 方法

1.2.1 修切與洗滌 將腫瘤組織分段切成2～3 cm的橫斷面，用70%乙醇或流水進行沖洗。

1.2.2 脫水與透明 將腫瘤組織塊50%乙醇—70%乙醇—85%乙醇—95%乙醇—無水乙醇梯度脫水，每個梯度時間為1 h。脫水后將組織放入二甲苯∶無水乙醇（1∶1，V/V）和二甲苯中各透明30 min，直到組織透明為止。具體時間視組織塊的大小確定[2]。

1.2.3 浸蠟與包埋 將蠟熔化，使溫箱溫度保持約55～60 ℃，將已透明的組織放入熔點為54～56 ℃的二甲苯-石蠟混合液蠟杯中約40 min；再浸入第二個熔點為56～58 ℃的二甲苯-石蠟混合液蠟杯40 min；再浸入第三個熔點為58～60 ℃的二甲苯-石蠟混合液蠟杯約40 min。然后60 ℃脫蠟包埋。將熔化備用的石蠟注入紙盒內，用預熱的鑷子夾取組織放入盒中的適當位置，將切面朝向盒子的底部。以兩手持紙盒兩端輕輕放置冷水中，使紙盒一半浸入冷水中，用口吹氣，使石蠟表面凝成一較厚層后，將紙盒急速全部浸入冷水中，待石蠟完全凝結變硬即可取出（約浸30 min左右）[3]。

1.2.4 切片 將包埋好的蠟塊修切成方塊形，讓組織四周留有少許石蠟，蠟塊兩邊切成平行的直線[4]。將蠟塊底面熔化，迅速黏于小木塊上，冷卻后裝在切片機上夾緊。用旋轉切片機連續切片5張，厚度為5 μm。

1.2.5 貼片 把玻片放在展片臺上，向玻片上滴幾滴蒸餾水然后加熱到40 ℃左右，將預先割開的蠟片攤于水面上，用撥針展平，撥正位置，倒去多余水滴，把玻片放入37～48 ℃溫箱中烤24 h左右（粘片劑用一個雞蛋的蛋清、500 mL蒸餾水和1 mL氨水混勻過濾而得）[5]。

1.3 染色

采用HE染色[6]。取已干燥的切片放入二甲苯缸中各脫蠟10 min，放入二甲苯與100%乙醇溶液（1∶1，V/V）混合5 min，100%乙醇Ⅰ、Ⅱ各5 min，依次放入95%至70%乙醇溶液各4 min，入蒸餾水沖洗，再放入蘇木精中染色約15 min，用蒸餾水洗去多余染料后，入0.5%鹽酸乙醇溶液分色，以鏡檢為準，用自來水藍化15 min，使之恢復藍色。再用蒸餾水過洗一次。放入70%的伊紅乙醇溶液染30 s。乙醇溶液濃度梯度上行至95%（各1～2 min），入0.5%的伊紅乙醇溶液染30 s至1 min，再依次入95%乙醇溶液和無水乙醇溶液脫水（各1～3 min），經二甲苯∶無水乙醇（1∶1，V/V）和二甲苯透明，最后取出玻片擦去多余的二甲苯，迅速滴樹膠封固[7]。OLYMPUS顯微鏡觀察。

2 結果與分析

由圖2可見，囊腫內部有疏松結蹄組織相互交織形成囊泡狀結構；由圖3可見，囊泡邊界清晰，囊壁較厚，分布不規則，浸潤大量的淋巴細胞；囊泡附近有腺管、無血管、無柱狀細胞、無有核細胞。未成熟囊泡呈現透明狀結構，有不斷擴張增大填充大囊泡趨勢；囊壁無鈣化灶。

切片時，病理組織柔軟，大量白色液體從組織內排出，從圖2看囊泡內液體排空后成空泡狀，內有少量散落淋巴細胞。

3 小結與討論

紅龍魚的腫瘤本身就不多見，鰓部的腫瘤就更罕見了，該病例是偶然獲得，實屬珍貴。對一些高等動物腫瘤性疾病的治療一般采用手術切除的方法[8]，對水生動物來講，由于生活在水環境里面，其疾病很難及時發現，更別提腫瘤性的疾病。紅龍魚等具有較高經濟價值的魚類主張采用手術方法對其腫瘤進行切除。本試驗中該紅龍魚手術切除腫瘤后，恢復良好。

從病理切片來看，該魚腫瘤內有疏松結蹄組織相互交織形成囊泡狀結構，而且有大量的淋巴細胞，可能是紅龍魚魚鰓受寄生蟲、細菌、藥物或者其水體里不良因素長期刺激后，魚鰓腺體大量分泌，纖維素、蛋白、炎癥細胞大量分泌纖維化而成的疏松結蹄組織囊腫性腫瘤[9]。隨著囊腫不斷增大，從而影響魚在水中二氧化碳和氧氣的交流，使龍魚窒息而亡。

水生生物的健康與水體質量的優劣息息相關。紅龍魚的生存需要弱酸性至中性的水質，硬度要求軟水。pH 6.5～7.5，DH值3～12，水溫28～30 ℃較適宜，亞硝酸鹽含量以及氯含量最好為零[10]。中國自來水大部分都偏硬，達不到養龍魚的要求，需要進行軟水處理，但很多養殖者忽略這些問題，由于硬水中的某些鈣鎂離子不能被龍魚的鰓代謝掉，很可能在魚的腮部聚集，形成鰓部疾病的發生甚至腫瘤的發生。

參考文獻：

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