2—氨基—4，6—二甲氧基嘧啶的液相色譜分析

摘要：建立高效液相色譜法測(cè)定農(nóng)藥中間體的方法，采用外標(biāo)法定量分析2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶，流動(dòng)相采用甲醇與水體積比7∶3配制，流速為1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm，進(jìn)樣量為20 μm，靈敏度為0.08 AUFS，柱溫為室溫。測(cè)定結(jié)果表明，平均回收率為99.5%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.213，變異系數(shù)為0.205%，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 6。測(cè)定方法簡(jiǎn)便、可靠，可用于產(chǎn)品的含量分析。

關(guān)鍵詞：2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶；高效液相色譜；外標(biāo)法定量分析

中圖分類號(hào)：O657.7+2；TQ457.2+3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）11-2885-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.044

磺酰脲類除草劑能夠抑制多數(shù)種類的雜草，具有高活性、高選擇性、高安全性（對(duì)人畜毒性低）等特點(diǎn)，應(yīng)用前景廣闊[1-3]。2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶（2-amino-4，6-dimethoxypyrimidine，C6H9N3O2）是一種重要的農(nóng)藥和醫(yī)藥中間體，應(yīng)用廣泛，通常用于合成磺酰脲類農(nóng)藥等除草劑[4]。2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的快速、簡(jiǎn)便檢測(cè)指標(biāo)，如水分和干燥失重等，是該產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要內(nèi)容，受到研究者重視。吳培等[5]利用毛細(xì)管氣相色譜分析法，在2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶樣品中加入已知量的標(biāo)樣，測(cè)得2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的回收率為99.5%。高效液相色譜分析法是應(yīng)用最普遍的一種分析方法[6]，本研究使用高效液相色譜法對(duì)2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶進(jìn)行分析研究，以探究適用的分析方法。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

主要試劑：甲醇（Sinopharm Chemical Reagent Co），無(wú)水甲醇（天津市嘉宇精細(xì)化工有限公司）均為AR；卡爾費(fèi)休試劑3-5（安全型無(wú)吡啶，上海新中化學(xué)科技公司）。

主要儀器：KF-1B水份測(cè)定儀（CHI660B，上海辰華儀器公司）；電子分析天平（FA2004B，上海化工研究院儀表廠）；超聲波清洗器（KQ3200E型，昆山市超聲儀器有限公司）；電熱鼓風(fēng)干燥箱（9070（A），上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；島津高效液相色譜儀（Shimadzu LC-10AT，島津制作所）。

試驗(yàn)在室溫下進(jìn)行（約15 ℃），所用水為蒸餾水。

1.2 色譜試驗(yàn)條件

流動(dòng)相為甲醇∶水=70∶30（V/V），將抽濾過(guò)的甲醇和水混合用超聲波排氣，色譜柱為Shimaudzu Shim-pack vp-ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm），流速為1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm，進(jìn)樣量為20 μm，靈敏度為0.08 AUFS，柱溫為室溫。

1.3 試驗(yàn)方法

采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法來(lái)測(cè)定2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的含量。分別稱取0.04、0.06、0.08、0.12、0.16 g共5組樣品加入5個(gè)50 mL的容量瓶中，分別加入40 mL溶劑，超聲溶樣10 min，定容50 mL，搖勻，用移液管移取5 mL至另一50 mL容量瓶中定容、搖勻，待用。進(jìn)樣前，將樣品溶液過(guò)濾，進(jìn)樣時(shí)用100 μm的進(jìn)樣器抽取80 μm（注意趕氣泡），每個(gè)樣品進(jìn)2個(gè)平行樣，兩次進(jìn)樣峰面積平均誤差不能超過(guò)1%[計(jì)算公式為（A1-A2）/（A1+A2）]。否則需要重復(fù)進(jìn)樣，直到兩次進(jìn)樣峰面積平均誤差不超過(guò)1%。

采用卡爾費(fèi)休水分滴定儀測(cè)定水分。爾費(fèi)休水分滴定儀測(cè)定水分操作簡(jiǎn)單、應(yīng)用廣泛、自動(dòng)化程度高，結(jié)果可靠準(zhǔn)確[20]。對(duì)編號(hào)為A、B、C的3批產(chǎn)品分別進(jìn)行多組平行樣的測(cè)定。

烘箱干燥法測(cè)定干燥失重。干燥失重[21]是評(píng)價(jià)2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，采用烘箱干燥法測(cè)定，干燥溫度設(shè)定為50 ℃，干燥時(shí)間為45 min。

2 結(jié)果與分析

2.1 高效液相色譜測(cè)定2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的含量

2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的測(cè)定數(shù)據(jù)及濃度的計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表1和圖1。由表1和圖1可知，標(biāo)樣的濃度與峰面積呈正比。當(dāng)稱樣量增大時(shí)，濃度增大，其峰面積增大。由多組數(shù)據(jù)得到峰面積（x）與濃度（y）的關(guān)系，y=0.131 5x-0.09 7，R2=0.099 1。

以2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶在0.040 0～0.140 0 g范圍內(nèi)配制溶液，在相同色譜條件下測(cè)定，以2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶對(duì)內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的峰面積為橫坐標(biāo)繪制線性關(guān)系曲線圖，得到線性關(guān)系方程為y=0.100 0x-0.009 7，R2=0.999 1。

選取1個(gè)2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶樣品進(jìn)行方法精密度的測(cè)定，按上述色譜條件平行測(cè)定7次，結(jié)果見(jiàn)表2和圖2，經(jīng)計(jì)算，得到線性方程y=0.108 5x-0.005 8，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.21，變異系數(shù)為0.21%。

2.2 2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶水分的含量

水分測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3、表4、表5。可見(jiàn)該產(chǎn)品的水分含量較穩(wěn)定，均小于限量（0.06%），說(shuō)明該方法所測(cè)的平行性較好。

2.3 2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶干燥失重

干燥失重情況見(jiàn)表6、表7、表8。該產(chǎn)品的干燥失重含量較穩(wěn)定，均小于限量（0.5%），且該方法所測(cè)的平行性較好。可廣泛應(yīng)用于工業(yè)化操作。

3 結(jié)論

利用高效液相色譜法對(duì)2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶進(jìn)行分析，具有操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性好、易于工業(yè)化生產(chǎn)操作等一系列優(yōu)點(diǎn)。根據(jù)此方法還可以制定出快速粗測(cè)檢測(cè)2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶含量的歸一化法，兩種方法的配合使用，可以有效提高工業(yè)化生產(chǎn)的效率。通過(guò)對(duì)2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的水分和干燥失重的測(cè)定，其含量穩(wěn)定有效，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 張一賓.磺酰脲類除草劑的世界市場(chǎng)、品種及主要中間體[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2010（3）：6-9.

[2] 薛振祥.農(nóng)藥中間體手冊(cè)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2004.

[3] 張敏恒.磺酰脲類除草劑的發(fā)展現(xiàn)狀、市場(chǎng)與未來(lái)趨勢(shì)[J].農(nóng)藥，2010，49（4）：235-240.

[4] 徐 偉，王震宇，張 勤，等.2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的合成研究[J].化工中間體，2013（8）：30-33.

[5] 吳 培，劉敬民，林 波，等.2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶毛細(xì)管氣相色譜分析[J].農(nóng)藥，2011，50（12）：38-39.

[6] 于世林.高效液相色譜方法及應(yīng)用[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

[7] 鐘新華，王純利，王 全，等.煤化工廢水中硝基苯胺類污染物的HPLC測(cè)定[J].環(huán)境保護(hù)科學(xué)，2011，37（6）：59-62.

[8] 田志銘.高效液相色譜柱切換技術(shù)在油相內(nèi)石油磺酸鹽分析中的應(yīng)用[J].油氣地質(zhì)與采收率，2006，13（5）：81-82.

[9] 張艷麗，金艷春，王海君，等.高效液相色譜法測(cè)定柴油中芳烴含量[J].煉油與化工，2006，17（2）：52-53.

[10] 厲將斌，張 壯，李曰慶，等.反相高效液相色譜法測(cè)定兔血清中小檗堿濃度[J].實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2003，9（3）：27-29.

[11] 楊 娟，王 興，李曉倩，等.RP-HPLC檢測(cè)大鼠大血管中異鉤藤堿的含量[J].實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（23）：235-238.

[12] 閆 寒，付 衍，彭 娟，等.大鼠含藥血清中芍藥苷的含量測(cè)定[J].實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（14）：89-91.

[13] 龔竹青，王志興.現(xiàn)代電化學(xué)[M].長(zhǎng)沙：中南大學(xué)出版社，2010.

[14] 謝乃賢.電世界的奇葩話說(shuō)生物電化學(xué)[M].長(zhǎng)沙：湖南教育出版社，1998.

[15] 左國(guó)防，王小芳.生物電化學(xué)與電化學(xué)生物傳感研究進(jìn)展[J].儀表技術(shù)與傳感器，2010（5）：16-18.

[16] 王宗花，郭新美，夏建飛，等.基于納米材料電化學(xué)生物傳感器的研究進(jìn)展[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2011，30（11）：1216-1223.

[17] 趙曉琴，陳金媛，宋莉莉.納米二氧化鈦管電化學(xué)生物傳感器用于測(cè)定水體中微囊藻毒素[J].浙江工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，40（2）：148-151.

[18] 趙青山，許 晶，付茂輝.高效液相色譜儀器的進(jìn)展[J].生命科學(xué)儀器，2005，3（5）：18-20.

[19] 昝川南，葉梁銀.淺析高效液相色譜分析法在各領(lǐng)域的應(yīng)用及發(fā)展前景[J].化學(xué)工程與裝備，2013（2）：162-165.

[20] 李 芳，于素青，原 雯.卡爾費(fèi)休水分滴定儀在分析中的應(yīng)用[J].化學(xué)工程師，2011（9）：65-68.

[21] 冷文君.干燥失重測(cè)定法的實(shí)踐體會(huì)[J].蛇志，2008，20（3）：49.