蛋氨酸水平對(duì)羅非魚蛋白質(zhì)代謝及血清生化指標(biāo)的影響

向 梟 周興華 曾本和 羅 莉 文 華

蛋氨酸水平對(duì)羅非魚蛋白質(zhì)代謝及血清生化指標(biāo)的影響

向 梟1周興華1曾本和1羅 莉2文 華3

（西南大學(xué)榮昌校區(qū)水產(chǎn)系；淡水魚類資源與生殖發(fā)育教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；水產(chǎn)科學(xué)重慶市市級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室1，重慶 402460）
（西南大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院2，重慶 400715）
（中國水產(chǎn)科學(xué)院長江水產(chǎn)研究所；中國水產(chǎn)科學(xué)院淡水生態(tài)與健康養(yǎng)殖重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室3，荊州 434000）

為了探討不同蛋氨酸水平對(duì)羅非魚生長過程中蛋白質(zhì)代謝及血液生化指標(biāo)的影響。通過在半精制基礎(chǔ)飼料中添加包膜DL-蛋氨酸，配制成蛋氨酸水平分別為0.26%、0.55%、0.85%、1.14%、1.44%和1.73%的6 種等氮等能（32.09%粗蛋白質(zhì)，17.82 kJ／g總能）的試驗(yàn)飼料。以初始體質(zhì)量（66.76 ±2.29）g的羅非魚為試驗(yàn)對(duì)象，每種試驗(yàn)飼料設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放養(yǎng)試驗(yàn)魚25尾，養(yǎng)殖系統(tǒng)為室內(nèi)養(yǎng)殖系統(tǒng)，每天表觀飽食投喂3次，養(yǎng)殖時(shí)間為60 d。結(jié)果表明，隨飼料蛋氨酸水平的增大，羅非魚的增重率（WGR）、飼料蛋白沉積率（PDR）及脂肪沉積率（LDR）均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。且WGR和LDR均在蛋氨酸水平為1.14%時(shí)達(dá)到最大（分別為361.91%和107.54%）；PDR則在飼料蛋氨酸水平為1.44%時(shí)達(dá)到最大（47.22%）。隨著飼料中蛋氨酸水平的提高，羅非魚肝臟中的肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活性及AST／ALT比值均呈先升后降的變化趨勢(shì)。當(dāng)?shù)鞍彼崽砑铀綖?.14%時(shí)，羅非魚肝臟中AST、ALT、AST／ALT均達(dá)到最高（分別為165.33 U／mg、48.38 U／mg和3.43）；肝臟中谷氨酸脫氫酶（GDH）活性及血氨水平均隨著飼料中蛋氨酸水平的提高呈先降后升的變化趨勢(shì)，且當(dāng)?shù)鞍彼崽砑铀綖?.14%時(shí)均達(dá)到最低（分別為103.97 U／mg和564.72 μmol／L）（P ＜0.05）。隨飼料蛋氨酸水平的增加，羅非魚血清中膽固醇（CHO）、甘油三酷（TG）均隨飼料蛋氨酸水平的升高而呈先升高后穩(wěn)定的變化趨勢(shì)。說明適宜的蛋氨酸水平有利于促進(jìn)機(jī)體的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)代謝，提高羅非魚的生長速度。

羅非魚 蛋氨酸 蛋白質(zhì)代謝 生化指標(biāo)

蛋氨酸是動(dòng)物都需要的一種必需氨基酸。與動(dòng)物谷胱甘肽等含硫化合物的代謝有密切的關(guān)系。在魚類的生長發(fā)育過程中，蛋氨酸可直接參與蛋白質(zhì)合成，也可轉(zhuǎn)化成半胱氨酸用于合成魚體蛋白質(zhì)，同時(shí)蛋氨酸是重要的甲基供體，能為肌酸、膽堿等的合成提供甲基。陳乃松等［1］研究表明，飼料中蛋氨酸水平為1.23%（占飼料蛋白質(zhì)的2.77%）時(shí)，大口黑鱸（Micropterus salmoides）的蛋白沉積率最大。Yan等［2］認(rèn)為，飼料蛋氨酸水平能顯著影響許氏平鲉（Sebastes schlegeli）的蛋白質(zhì)沉積率；飼料中補(bǔ)充DL-蛋氨酸會(huì)顯著提高異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）幼魚的特定生長率和蛋白質(zhì)沉積率［3］。蛋氨酸在魚體內(nèi)可合成胱氨酸，防止大西洋鮭（Salmo salar L.）脂肪肝等疾病的產(chǎn)生，增加其對(duì)脂肪的消化率利用率［4］。杜瀅［5］用缺乏蛋氨酸等必需氨基酸的飼料處理小鼠7 d后發(fā)現(xiàn)能不同程度地減少其脂肪含量；蛋氨酸［6］和MHA［7］對(duì)幼建鯉（Cyprinus carpio Var.Jian）的體蛋白和脂肪沉積率均有極顯著或顯著的影響。且蛋氨酸是豆粕等魚類常用植物蛋白質(zhì)源的第一限制性氨基酸，則其缺乏或添加不足將引起飼料氨基酸不平衡，使飼料可利用率下降，影響蛋白質(zhì)和脂肪代謝。因此，在飼料中補(bǔ)充適量的蛋氨酸能促進(jìn)動(dòng)物生長，增加動(dòng)物肌肉組織中蛋白質(zhì)的沉積。本研究以吉富羅非魚（Genetic Improvement of Farmed Tilapia，Oreochromis niloticus）為研究對(duì)象，探討蛋氨酸水平對(duì)吉富羅非魚生長過程中蛋白質(zhì)代謝及血清生化指標(biāo)的影響，旨在為設(shè)計(jì)吉富羅非魚養(yǎng)殖中所需的高效、環(huán)保的飼料配方提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 飼料

以明膠、魚粉、花生粕、包膜氨基酸混合物（包被材料為卡拉膠、羥甲纖維素鈉、α-淀粉作為包膜材料，比例為1∶1∶1）為主要蛋白源，豆油為脂肪源。氨基酸的包膜參照王冠［8］的方法。模擬與羅非魚全魚相似的氨基酸組成，除蛋氨酸和甘氨酸（平衡氮）的水平不同外，其余的必需和非必需氨基酸按照羅非魚全魚氨基酸組成模式。配制成低蛋氨酸的基礎(chǔ)飼料（見表1），并設(shè)定為對(duì)照組。在基礎(chǔ)飼料中分別添加0%、0.3%、0.6%、0.9%、1.2%和1.5%的包膜DL-蛋氨酸，同時(shí)用包膜L-甘氨酸節(jié)飼料中L-甘氨酸的含量，以0.3%的水平遞減，調(diào)節(jié)飼料中氮的水平。設(shè)計(jì)6種等氮（粗蛋白含量為32.09% ）等能（總能為17.82 kJ／g）的實(shí)驗(yàn)飼料。各原料均粉碎過80目篩，稱重后混勻，量少的組分采用逐級(jí)擴(kuò)大法混合，用實(shí)驗(yàn)室小型絞肉機(jī)制成直徑為2 mm的硬顆粒料，自然晾干后于-20℃保存。經(jīng)測(cè)定6種試驗(yàn)飼料中蛋氨酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.26%、0.55%、0.85%、1.14%、1.44%和1.73%，占飼料蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.81%、1.71%、2.65%、3.55%、4.49% 和5.39%。飼料的氨基酸組成見表2。

表1 基礎(chǔ)飼料配方及主要營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2 魚及飼養(yǎng)管理

羅非魚購自重慶白市驛漁場(chǎng)，體重（66.76±2.29）g。購回后先用5%的食鹽水消毒后放入暫養(yǎng)池，用商品飼料暫養(yǎng)7 d。試驗(yàn)開始前，對(duì)暫養(yǎng)魚進(jìn)行24 h饑餓處理，選擇健康、無傷病的羅非魚450尾，隨機(jī)投入18個(gè)試驗(yàn)水泥池（150 cm×100 cm×50 cm）中。并隨機(jī)分成6組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25尾魚，分別投喂6種不同蛋氨酸水平的飼料。每天按魚體重的3%～5%投喂飼料（根據(jù)魚的攝食情況及水溫等環(huán)境狀況及時(shí)調(diào)整投喂率），每天8：00、13：00、16：00各投飼1 次，投喂前虹吸清污，飽食后30 min迅速虹吸殘餌并風(fēng)干測(cè)定其質(zhì)量。養(yǎng)殖期間每天換水1次，每次換水量為養(yǎng)殖水體的1／3。試驗(yàn)用水為曝氣后的自來水，每日監(jiān)測(cè)水溫、水質(zhì)、試驗(yàn)魚的攝食行為和死亡數(shù)量等。水溫維持在28～30 ℃，溶氧高于6.0 mg／L，pH 為7.0 ～7.5，養(yǎng)殖時(shí)間60 d。

表2 基礎(chǔ)飼料中氨基酸組成分析／%干物質(zhì)

1.3 樣品采集

試驗(yàn)開始和結(jié)束前1天停食24 h，對(duì)每尾魚進(jìn)行體質(zhì)量及體長測(cè)量。每個(gè)重復(fù)組中隨機(jī)各取3尾實(shí)驗(yàn)魚，于-80℃下保存，用于魚體粗蛋白、粗脂肪分析。試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)試驗(yàn)組中隨機(jī)取5尾魚用50 mg／L的MS-222溶液麻醉，測(cè)定體質(zhì)量和體長后，用1 mL注射器于尾靜脈取血，并用離心機(jī)（4℃，3 500 r／min）離心15 min，制備血清，用于測(cè)定血清生化指標(biāo)；再在冰盤上解剖并分離出肝臟，用4℃預(yù)冷的生理鹽水沖洗，然后用濾紙吸干，精度稱量肝臟團(tuán)的質(zhì)量。加入相當(dāng)于其重20倍的生理鹽水，迅速用冰凍玻璃勻漿器勻漿后用離心機(jī)（4℃，3 500 r／min）離心20 min，取上清液作為粗酶提取液，測(cè)定肝臟代謝指標(biāo)。

1.4 指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 生長指標(biāo)的測(cè)定

根據(jù)測(cè)定的數(shù)據(jù)計(jì)算魚的增重率（weight gain rate，WGR）、蛋白質(zhì)沉積率（Protein deposition rate，PDR）、脂肪沉積率（Lipid deposition rate，LDR），計(jì)算公式：

式中：W0為魚初始體質(zhì)量／g；Wt為魚終末體質(zhì)量／g；P0為魚初始體蛋白質(zhì)含量／%；Pt為魚終末體蛋白質(zhì)含量／%；P為飼料中粗蛋白質(zhì)含量／%；L0為魚初始體脂肪含量／%；Lt為魚終末體脂肪含量／%；L為飼料中粗脂肪含量／%；F為飼料攝入總質(zhì)量／g。

1.4.2 飼料及魚體營養(yǎng)成分的測(cè)定

飼料水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分和總能級(jí)試驗(yàn)魚粗蛋白的測(cè)定參照AOAC的方法［11］。水分采用105℃干燥恒重法；粗蛋白質(zhì)采用凱氏定氮法；粗脂肪采用索氏提取法；灰分采用馬福爐550℃灼燒法；飼料能量采用氧彈熱量計(jì)（WGR-1，中國）測(cè)定。

1.4.3 蛋白質(zhì)及脂肪代謝指標(biāo)的測(cè)定

肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷氨酸脫氫酶（GDH）、血氨、甘油三酷（TG）、膽固醇（CHO）、均采用南京建成生物工程研究所相應(yīng)試劑盒測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)處理方法

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Means±SD）表示，采用SPSSStatistics 19.0統(tǒng)計(jì)軟件中one-way ANOVA進(jìn)行方差分析，若組間差異顯著，再用Duncan′s進(jìn)行多重比較，差異顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 蛋氨酸水平對(duì)羅非魚蛋白質(zhì)和脂肪沉積率的影響

由表3可知，飼料蛋氨酸水平能顯著影響羅非魚的增重率、蛋白質(zhì)沉積率及脂肪沉積率。隨飼料蛋氨酸水平的升高，羅非魚的增重率（WGR）、蛋白質(zhì)沉積率（PDR）和脂肪沉積率（LDR）均呈先升后降的變化趨勢(shì)。在飼料蛋氨酸水平為1.14%時(shí)，羅非魚的WGR及LDR均達(dá)到最大。WGR在飼料蛋氨酸水平為0.85%～1.44%時(shí)差異不顯著（P ＞0.05）；LDR在飼料蛋氨酸水平為1.14%～1.44%時(shí)差異不顯著外（P＞0.05），與其余各試驗(yàn)組差異顯著（P＜0.05）；PDR在飼料蛋氨酸水平為1.44% 時(shí)達(dá)到最大。除0.85%～1.44%蛋氨酸組差異不顯著外（P＞0.05），與其余各試驗(yàn)組差異顯著（P ＜0.05）。

表3 蛋氨酸水平對(duì)羅非魚蛋白質(zhì)和脂肪沉積率的影響（n＝3）

2.2 蛋氨酸水平對(duì)羅非魚蛋白質(zhì)代謝酶的影響

由表4可知，隨著飼料中蛋氨酸水平的提高，羅非魚肝臟中的肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活性及AST／ALT比值均呈先升后降的變化趨勢(shì)。當(dāng)?shù)鞍彼崽砑铀綖?.14%時(shí)，魚肝臟中AST、ALT、AST／ALT 均達(dá)到最高。AST、ALT、AST／ALT 除與0.85%蛋氨酸組差異不顯著外（P＞0.05），與其余各試驗(yàn)組均有顯著差異（P＜0.05）；谷氨酸脫氫酶（GDH）活性則隨著飼料中蛋氨酸水平的提高呈先降后升的變化趨勢(shì)，且當(dāng)?shù)鞍彼崽砑铀綖?.14%時(shí)達(dá)到最低，與其余各試驗(yàn)組差異顯著（P＜0.05），而0.85%蛋氨酸組與1.44%～1.73%蛋氨酸組的差異不顯著（P ＞0.05）。

表4 蛋氨酸水平對(duì)羅非魚肝臟蛋白質(zhì)代謝的影響（n＝3）

2.3 蛋氨酸水平對(duì)羅非魚血液生化指標(biāo)的影響

由表5可知，羅非魚血氨水平則隨飼料蛋氨酸水平的升高而呈先降后升的變化趨勢(shì)。1.14%蛋氨酸組血氨含量最低，除與0.85%蛋氨酸組差異不顯著外（P＞0.05），與其余各試驗(yàn)組差異顯著（P＜0.05）；膽固醇（CHO）、甘油三酷（TG）均隨飼料蛋氨酸水平的升高而呈先升高后穩(wěn)定的變化趨勢(shì)。蛋氨酸水平小于1.14%時(shí)，CHO和TG隨著蛋氨酸水平的增加而增加（P＜0.05），而當(dāng)?shù)鞍彼崴酱笥诘扔?.14%時(shí)，蛋氨酸水平對(duì)羅非魚CHO和TG無顯著影響（P ＞0.05）。

表5 蛋氨酸水平對(duì)羅非魚血液生化指標(biāo)的影響（n＝3）

3 討論

蛋氨酸是水產(chǎn)動(dòng)物所需的一種含硫必需氨基酸，與動(dòng)物體內(nèi)各種含硫化合物的代謝有密切的關(guān)系。當(dāng)?shù)鞍彼岷坎蛔銜r(shí)將導(dǎo)致飼料中氨基酸的不平衡，降低飼料利用效率［9］。在以植物蛋白為主的實(shí)用飼料中添加適量的結(jié)晶D-蛋氨酸能顯著改善奧尼羅非魚（Oreochromis niloticus ×O．a(chǎn)ureus）的蛋白沉積率［10］；添加DL-蛋氨酸可顯著提高異育銀鯽幼魚的蛋白質(zhì)沉積率［3］；且其蛋白質(zhì)貯積率隨飼料蛋氨酸含量增加而增加，而達(dá)到最適需求量之后則呈下降趨勢(shì)［11］；Zhou 等［12］研究證明，蛋氨酸能顯著影響黑鯛（Sparus macrocephalus）的生長速度和體蛋白沉積率；對(duì)大西洋鮭、鯉（Cyprinus carpio）的研究均表明，飼料中蛋氨酸缺乏將顯著降低魚類蛋白質(zhì)和脂肪的沉積量［13-14］。本試驗(yàn)中飼料蛋氨酸水平對(duì)羅非魚的蛋白質(zhì)沉積率（PDR）及脂肪沉積率（LDR）有顯著的影響。隨飼料蛋氨酸水平的升高，羅非魚的PDR和LDR均呈先升后降的變化趨勢(shì)，且PDR在飼料蛋氨酸水平為1.44%時(shí)達(dá)到最大；LDR在飼料蛋氨酸水平為1.14%時(shí)達(dá)到最大，與向梟等［15］報(bào)道的蛋氨酸水平對(duì)羅非魚生長速度和飼料系數(shù)影響的結(jié)論相一致。這說明飼料中各種氨基酸平衡時(shí)，動(dòng)物體內(nèi)各種物質(zhì)的合成代謝大于分解代謝，蛋白質(zhì)和脂肪的沉積率最高；當(dāng)?shù)鞍彼崛狈虿蛔銜r(shí)，飼料中的氨基酸模式失衡，限制了魚類對(duì)其他氨基酸的利用，加強(qiáng)了多余氨基酸的脫氨基作用，導(dǎo)致體蛋白合成的受限［16］。蛋氨酸是蛋白質(zhì)合成中核糖體在mRNA起始位置結(jié)合的第1個(gè)氨基酸。當(dāng)?shù)鞍彼崛狈r(shí)，單位RNA所合成的蛋白質(zhì)減少［17］，使魚體合成蛋白質(zhì)的兩減少；蛋氨酸添加過量則導(dǎo)致蛋氨酸的氧化，使有毒的代謝物質(zhì)積聚［18］，從而抑制魚體蛋白質(zhì)的沉積。但解緩啟［19］認(rèn)為，蛋氨酸水平對(duì)長吻鮠（Leiocassis longirostris）的蛋白質(zhì)貯積率無顯著影響，Rodehustocrd 等［20］發(fā)現(xiàn)，虹鱒（Oncorhynchus mykiss）的蛋白質(zhì)貯積率隨蛋氨酸水平的增加呈先增加后逐漸趨于穩(wěn)定的變化趨勢(shì)，與本研究結(jié)論有一定的差異這可能與魚的種類、生長階段、飼料有效成分等有關(guān)。

谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）是人和動(dòng)物體內(nèi)重要的氨基酸代謝酶［21］，在肝臟中負(fù)責(zé)特定氨基酸的氨基轉(zhuǎn)移，肝臟中AST、ALT的活性能較好地反應(yīng)動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝狀況。AST、ALT活性升高，尤其是AST／ALT比值的升高表明氨基酸代謝旺盛，蛋白質(zhì)分解下降而合成加強(qiáng)，有利于氮在體內(nèi)的蓄積［22］。本試驗(yàn)中，羅非魚肝臟中的肝臟中AST、ALT活性及AST／ALT比值均隨著飼料中蛋氨酸水平的提高呈先升后降的變化趨勢(shì)，且均在蛋氨酸添加水平為1.14%時(shí)達(dá)到峰值。說明添加適量的蛋氨酸能促進(jìn)了羅非魚體內(nèi)的氨基酸代謝和蛋白質(zhì)合成。遲淑艷等［23］研究表明，添加蛋氨酸能顯著提高軍曹魚（Rachycentron canadum）AST、ALT活性及AST／ALT比值；顯著提高了中期草魚（Ctenopharyngodon idellus）肝胰臟中AST、ALT活性，且當(dāng)?shù)鞍彼崴椒謩e達(dá)7.18 g／kg 和12.21 g／kg 時(shí)，草魚肝胰臟中AST 和ALT 活性達(dá)到最大［24］，柯帥［6］也認(rèn)為幼建鯉肝臟中AST的活性隨蛋氨酸水平的提高呈先升后降的變化趨勢(shì)，與本研究結(jié)果相一致。說明添加一定量的蛋氨酸可促進(jìn)動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的周轉(zhuǎn)代謝，當(dāng)氨基酸趨于平衡后，合成代謝高于分解代謝，有利于蛋白質(zhì)在體內(nèi)的沉積。

動(dòng)物代謝過程中，很多氨基酸都是轉(zhuǎn)化為谷氨酸來參與代謝的。因此谷氨酸脫氫酶（GDH）是蛋白質(zhì)分解代謝和非必需氨基酸合成的關(guān)鍵酶，其活性的高低一定程度上反映了動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝的情況［25］。本試驗(yàn)中，羅非魚肝臟中GDH活性隨飼料中蛋氨酸水平的提高呈先降后升的變化趨勢(shì)。尚曉迪等［26］研究表明，草魚肝臟中GDH活性與飼料中異亮氨酸的水平呈先降后升的二次回歸曲線關(guān)系。飼料中蛋氨酸缺乏或過量時(shí)，肝臟對(duì)氨基酸的分解代謝作用加強(qiáng)，肌肉中的蛋白質(zhì)合成降低，而當(dāng)飼料氨基酸趨于平衡時(shí)，通過抑制GDH活性而使氨基酸合成體蛋白質(zhì)的能力增強(qiáng)，肝臟分解氨基酸的速度減慢；氨是水產(chǎn)動(dòng)物氨基酸分解代謝的主要產(chǎn)物。肝臟代謝過程中所產(chǎn)生的氨將在血液中逐漸累積，最后排出體外。則血氨的濃度與飼料氨基酸的含量有密切的關(guān)系［27］。本試驗(yàn)中，羅非魚血氨水平隨飼料蛋氨酸水平的升高而呈先降后升的變化趨勢(shì)。其原因可能為，當(dāng)飼料中蛋氨酸水平不足或過量時(shí)，飼料氨基酸不平衡而引起氨基酸分解代謝加強(qiáng)，體蛋白質(zhì)的沉積減少，血氨濃度上升。一定范圍內(nèi)，隨著蛋氨酸添加量的增強(qiáng)，飼料氨基酸組成逐漸趨于平衡，則氨基酸合成代謝加強(qiáng)而分解代謝減弱，血氨濃度下降。肖偉偉認(rèn)為，血氨濃度與肝胰臟AST、ALT活性呈極顯著或顯著負(fù)相關(guān)，適宜水平的MHA可顯著降低幼建鯉的血氨含量。與本研究結(jié)論相一致。

甘油三酯和膽固醇與機(jī)體脂肪代謝狀況有關(guān)［28］。本試驗(yàn)中，羅非魚血清膽固醇（CHO）、甘油三酷（TG）含量均隨蛋氨酸水平的升高而呈先升高后穩(wěn)定的變化趨勢(shì)。隨著蛋氨酸水平的提高，卵形鯧鲹（Trachinotus Ovatus）血清CHO、TG含量顯著提高［29］。飼料蛋氨酸水平為0.64%～1.15% 時(shí)，胭脂魚（Myxocyprinus asiaticus）血清CHO、TG含量先隨蛋氨酸水平的提高而顯著增加，而后則隨氨酸水平的繼續(xù)增加而趨于穩(wěn)定［30］。與本試驗(yàn)的結(jié)論相一致。含硫氨基酸對(duì)人和動(dòng)物血清脂質(zhì)含量有明顯的影響［31］，Susgiyama 等［32］在麥谷蛋白的氨基酸混合物中增加蛋氨酸的含量而除去除胱氨酸，可使大鼠血清中CHO、TG的濃度升高；Oda等［33］研究發(fā)現(xiàn)，在大鼠飼料中添加蛋氨酸能使其肝微粒體中膽固醇合成的關(guān)鍵酶3-羥基-3-甲基戊二酞輔酶A還原酶的活性增加。說明蛋氨酸在動(dòng)物脂質(zhì)代謝中有重要作用。當(dāng)?shù)鞍彼崽砑恿吭龃蠛螅斐砂被峤M成的不平衡，使被氧化的氨基酸量增加，大量的氨基酸脫氨后進(jìn)入三羧酸循環(huán)被氧化而供能，減少了蛋白質(zhì)的沉積，而轉(zhuǎn)化成糖和脂肪［34］，增大了血清中CHO、TG的濃度。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，飼料蛋氨酸水平對(duì)羅非魚蛋白質(zhì)沉積和代謝，血清中CHO、TG均有顯著影響，說明蛋氨酸能有效地改善羅非魚對(duì)飼料蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的代謝能力，因此，飼料中添加適量的蛋氨酸可增強(qiáng)羅非魚的代謝能力，提高其生長速度。

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Effects of Methionine Levels on Protein Metabolism and Serum Biochemical Indices of Tilapia

Xiang Xiao1Zhou Xinghua1Zeng Benhe1Luo Li2Wen Hua3
（Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development，Ministry of Education，Key Laboratory of Aqucatic Science of Chongqing，Department of Fisheries in Rongchang Compust，Southwest University1，Chongqing 402460）
（Department of Fishery Science，Collage of Animal and Technology of Southwest University2，Chongqing 400715）
（Key Laboratory of Freshwater Ecology and Aquaculture，Yangtze River Fisheries Research Institute，Chinese Academy of Fishery Sciences3，Jingzhou 434000）

In order to discuss the effects of different methionine levels on protein metabolism and blood biochemical indices of tilapia in the process of growth，six kines of experience feeds with （32.09%crude protein）and isoenergetic （17.82 kJ／g gross energy）semipurified diets were formulated with the graded methionine levels （0%，0.3%，0.6%，0.9%，1.2%and 1.5%dry diet，respectively），using gelatin，fishmeal，peanut meal and crystalline amino acids mixtures as the main dietary protein sources.Amino acid pattern in diet was to simulate the amino acid pattern found in the whole body protein of Oreochromis niloticus except for methionine.The six trial diets were determined to contain methionine of 0.26%，0.55%，0.85%，1.14%，1.44%and 1.73%dry diet，respectively.Each diet was randomly assigned to triplicate groups of 25 fish and fed to apparent satiation by hand thrice daily

（8：00，13：00 and 16：00）for 60 days.The results showed that the weight gain rate（WGR），protein deposition rate（PDR）and Lipid deposition rate（LDR）all initially increased with increasing dietary methionine levels but then decreased.The WGR，LDR were all highest（361.91%and 107.54%respectively）when the dietary methionine level was 1.14% （P ＜0.05），the PDR was the highest（47.22%）（P ＜0.05）when the dietary methionine level was 1.44% （P ＜0.05）.The AST and ALT activities，AST／ALT in liver all initially increased with increasing dietary methionine levels but then decreased.The AST and ALT activities，AST／ALT were all highest（165.33 U／mg、48.38 U／mg and 3.43 respectively）when the dietary methionine level was 1.14% ，at the same time，the GDH activities in liver and the serum ammonia concentration all first decreased with increasing dietary methionine levels but then increased，the GDH activities and serum ammonia concentration were all the lowest（103.97 U／mg and 564.72 μmol／L respectively）when the dietary methionine level was1.14%.The cholesterol（CHO）and triglyceride（TG）in serum first increased with increasing dietary methionine levels and then leveled off.Results of above show that the optimum dietary methionine level could promote the protein and lipid metabolism，enhance the growth of Oreochromis niloticus．

Oreochromis niloticus，methionine，protein metabolism，biochemical indices

S963.3

A

1003-0174（2016）11-0092-08

重慶市基礎(chǔ)與前沿研究計(jì)劃（cstc2013jcyjA 80033），國家羅非魚現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)（CARS-49），農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)科研專項(xiàng)（2010 03020）

2015-04-02

向梟，男，1973年出生，副教授，水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料