高效液相色譜法測定復方醋酸曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德含量

程洪兵

（河南省濮陽市人民醫院，河南 濮陽 457000）

高效液相色譜法測定復方醋酸曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德含量

程洪兵

（河南省濮陽市人民醫院，河南 濮陽 457000）

目的 建立測定復方醋酸曲安奈德尿素乳膏中測定醋酸曲安奈德含量的高效液相色譜法。方法 色譜柱為 Welchrom C18柱（250 mm×4．6 mm，5 m），流動相為甲醇-水（70∶30），檢測波長為240 nm。結果醋酸曲安奈德質量濃度在25．4～89．0 g／mL范圍內與峰面積線性關系良好，平均回收率為99．08%，RSD為1．10%(n＝6)。結論 該法簡便快捷、準確可靠，可作為測定醋酸曲安奈德含量的質量控制方法。

復方醋酸曲安奈德尿素乳膏；醋酸曲安奈德；含量測定；高效液相色譜法

復方醋酸曲安奈德尿素乳膏是本院醫院制劑（批準文號為豫藥制字H20121649＜濮＞），用于脂溢性皮炎、神經性皮炎、蟲咬性皮炎、濕疹、銀屑病等癥的治療，效果較佳，已在臨床應用多年。該藥物原質量標準中，醋酸曲安奈德和尿素2組分的含量測定均采用紫外分光光度法。由于醋酸曲安奈德含量較低，且易受尿素和其他基質的干擾，操作過程煩瑣、費時，且準確度較差。本研究中通過方法學考察，建立測定醋酸曲安奈德含量的高效液相色譜法[1]，旨在減少測定時間和強度，提高結果準確度，更好控制藥品質量。現報道如下。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

Waters 515型高效液相色譜儀（美國Waters公司）；

92SM-202A型電子天平（瑞士Precisa公司）；電熱恒溫水溫箱（北京科學儀器廠）。

1．2 試藥

復方醋酸曲安奈德尿素乳膏及陰性樣品（批號分別為150722，150819，150915，濮陽市人民醫院制劑室提供）；醋酸曲安奈德對照品(中國食品藥品檢定研究院，供含量測定用，批號100125-201103)；甲醇為色譜純，水為注射用水。

2 方法與結果

2．1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：Welchrom C18柱（250 mm×4．6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水（70∶30）；流速：1．0 mL／min；檢測波長：240 nm；進樣量：20 μL；柱溫：40℃。在擬訂色譜條件下，醋酸曲安奈德的保留時間為15．6 min，理論板數按醋酸曲安奈德峰計算應不低于2 500。

2．2 溶液制備

取醋酸曲安奈德對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1 mL中約0．125 mg的溶液，作為對照品貯備液。精密量取此溶液20 mL，置50 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。取復方醋酸曲安奈德尿素乳膏3．0 g，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加甲醇約60 mL，置80℃水浴中加熱2 min，振搖使醋酸曲安奈德溶解，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻2 h以上，取出，迅速濾過，取續濾液，放置室溫，作為供試品溶液。取處方中不含醋酸曲安奈德的其他藥物制成的陰性樣品同法制備陰性對照品溶液。

2．3 方法學考察

專屬性試驗：取2．2項下的對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液，按擬訂色譜條件進行測定。結果供試品溶液中醋酸曲安奈德和其他組分色譜峰可達到基線分離，陰性對照品溶液對醋酸曲安奈德的測定無干擾，見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察：分別精密量取對照品貯備液2．0，3．0，4．0，5．0，6．0，7．0 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。分別吸取20 μL，按擬訂色譜條件進樣，測定醋酸曲安奈德峰面積。以醋酸曲安奈德質量濃度（C，μg／mL）對峰面積（A）進行線性回歸，得回歸方程A＝2．081 9×104C＋1．415 1×104，r＝0．999 9(n＝6)。結果表明，醋酸曲安奈德質量濃度在25．4～89．0 μg／mL范圍內與峰面積呈良好的線性關系。

精密度試驗：精密量取2．2項下的同一對照品溶液20 μL，按擬訂色譜條件重復進樣5次，以峰面積計算。結果的 RSD為0．46%(n＝5)，表明儀器精密度良好。

重復性試驗：精密量取同一批號的樣品（批號為150819）5份，依法制備供試品溶液并進樣，測得峰面積。結果的 RSD為 0．65%（n＝5），表明方法重復性良好。

穩定性試驗：取同一份供試品（批號為150819）溶液，室溫放置，于0，1，2，4，8 h時分別進樣20 μL，按擬訂色譜條件，注入高效液相色譜儀，記錄峰面積。結果的 RSD為0．81%(n＝5)，表明供試品溶液在8 h內穩定。

加樣回收試驗：取同一批樣品（批號為150915，含量為1．95 mg／g）6份，精密稱取，分別精密加入醋酸曲安奈德對照品貯備液6．0，8．0，10．0 mL，依2．2項下供試品溶液方法制備溶液，按擬訂色譜條件進行測定，并計算回收率。結果見表1。

表1 醋酸曲安奈德加樣回收試驗結果（n＝6）

2．4 樣品含量測定

分別精密量取樣品 3批（批號分別為 150722，150819，150915），依2．2項下的方法制備3份供試品溶液，分別吸取對照品溶液和3份供試品溶液各20 μL注入液相色譜儀中，測定峰面積，按內標法計算含量，結果見表2。

表2 3批樣品中醋酸曲安奈德含量測定結果（n＝3）

3 討論

曾考察超聲30 min提取樣品，經圖譜比較計算，最終選擇置80℃水浴中加熱2 min后冰浴提取的方法。對醋酸曲安奈德對照品溶液進行波長掃描，顯示于240 nm波長處有最大吸收，尿素在此處無吸收。由于本品中尿素含量較高，曾選用其他成分及比例的流動相[2-4]，結果顯示流動相比例為70∶30，醋酸曲安奈德峰與鄰近組分色譜峰分離度大于 1．5，保留時間適宜。保持柱溫40℃，醋酸曲安奈德峰對稱性好，其他組分峰明顯減少，結果滿意。

高效液相色譜法測定復方醋酸曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德含量，簡便快捷、準確可靠，可作為測定醋酸曲安奈德含量的質量控制方法。

[1]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（二部）[M]．北京:中國醫藥科技出版社，2010：附錄23-附錄24．

[2]劉光斌，劉效栓，姜芳寧，等．高效液相色譜法測定濕疹乳膏中氯霉素和醋酸曲安奈德乳膏含量[J]．中國藥業，2010，19（23）: 34-35．

[3]王 艷，徐 暉，劉玉強，等．HPLC法測定乳膏中聯苯芐唑和醋酸曲安奈德的含量[J]．中國新藥雜志2007，16（8）:631-633．

[4]李愛英，尹艷連，趙作連．復方曲氯乳膏的制備及臨床應用[J]．中國醫院藥學雜志，2007，27（2）:260-262．

Content Determination of Triamcinolone Acetonide Acetate in Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream by HPLC

Cheng Hongbing
(Puyang People′s Hospital,Puyang,Henan,China 457000)

Objective To establish an HPLC method for the content determination of triamcinolone acetonide acetate in Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream．Methods Welchrom C18column(250 mm×4．6 mm,5 μm)was used with methanol-water (70∶30)as mobile phase and UV detection wave length was 240 nm．Results The linear range of triamcinolone acetonide acetate was 25．4～89．0 μg／mL．The average recovery was 99．08% and RSD was 1．10%(n＝6)．Conclusion The method is simple,convenient and accurate．It can be used for quality control of Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream．

Compound Triamcinolone Acetonide Acetate Urea Cream;triamcinolone acetonide acetate;content determination;HPLC

R927．2；R986

A

1006－4931(2016)11－0063－03

程洪兵，男，大學本科，副主任藥師，主要從事藥品檢驗及新制劑開發工作，（電子信箱）pychbing＠126．com。

2015－08－13；

2016－01－11)