基礎治療慢性牙周炎對齦溝液中EMMPRIN和MMP-2的影響

朱建華,李佳薇,賈會敏,苗藝繽,劉繼光

(佳木斯大學附屬第二醫院口腔醫院牙周科，黑龍江 佳木斯 154002)

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基礎治療慢性牙周炎對齦溝液中EMMPRIN和MMP-2的影響

朱建華,李佳薇,賈會敏,苗藝繽,劉繼光

(佳木斯大學附屬第二醫院口腔醫院牙周科，黑龍江 佳木斯 154002)

目的:研究慢性牙周炎患者在牙周基礎治療前后齦溝液(GCF)中細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子(EMMPRIN)和基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)水平的改變,并探討其相關性。方法:初診時進行臨床指標的檢測并采集GCF,然后分別進行齦上潔治和齦下刮治等牙周基礎診療,同時給予口腔衛生指導,診療結束后4周再次查看臨床指標并收集GCF。采用ELISA的方法對慢性牙周炎患者基礎治療前后GCF中EMMPRIN、MMP-2水平的變化進行直觀的量化的比較,同時探討EMMPRIN、MMP-2與臨床指標之間的相關關系。結果:牙周基礎診療后GCF中EMMPRIN、MMP-2和GCF的含量均較治療前顯然有所下降,但仍超過健康對照組,且GCF中EMMPRIN和MMP-2的量與臨床指標的改變有一定關聯性。結論:齦溝液中EMMPRIN和MMP-2可能與慢性牙周炎的破壞有關,當炎癥被控制時分泌量明顯減少,對其的監測與控制對慢性牙周炎的治療有積極的作用。

牙周炎;齦溝液;細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子;基質金屬蛋白酶-2

慢性牙周炎是一組條件感染性病因造成的破壞牙齦結締組織和牙齦周圍牙槽骨吸收的炎癥[1]。齦溝液是從牙齦結締組織滲出的唯一液體,并具有血清的一些成分,是一種炎性分泌液。同時GCF的取樣還具有無創。便捷等優點,從中探討牙周炎相關因素是現在的研究熱點。酶類是牙周組織中非常重要的成分,且在齦溝液中不受性別、年齡等因素的影響,具有一定的穩定性[2]。基質金屬蛋白酶(MMPs)是宿主細胞衍生酶,其直接參與牙周組織炎性破壞過程。有關研究顯示,MMP-2為破壞牙周組織過程的關鍵酶,在慢性牙周炎膠原纖維的毀壞中扮演著極其緊要的作用[3]。細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子(EMMPRIN)也稱CD147,根據其糖基化的程度,是免疫球蛋白家族的跨膜蛋白,分子量從44-66kDa。EMMPRIN是MMPs的誘導因子,最初在腫瘤細胞表面發現,可直接參與信號傳導,誘導刺激鄰近組織細胞中MMPs的表達。有學者認為,引起參與牙周疾病進展的調控因子的EMMPRIN,可與牙周組織的生理和病理過程相關聯[4]。本實驗通過對慢性牙周炎基礎治療前后GCF中EMMPRIN和MMPs含量的改變并與健康對照組實行對比,研討其關聯性。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取來本院確診的慢性牙周炎患者26例,男14例,女12例,均符合入組標準。同期選取26例牙周康健的患者作為空白對照組,男13例,女13例,兩組實驗對象均知情同意,其一般資料差別沒有統計學的價值,可以進行分析比較。

1.2 方法

1.2.1 齦溝液樣本與臨床指標的收集

對全部患者均對其進行齦上潔治、齦下刮治及根面平整術,詢問相關病史,治療前后查看并記載牙周指標,采用剪成2mm×10mm的條狀濾紙進行GCF的收集,進行隔濕后,將條狀濾紙放入取樣牙頰側的三個位點齦溝中,1min后拿出,放于Ep管里,稱量后放于低溫冰箱。健康組采用同樣方法采集齦溝液。

1.2.2 齦溝液中EMMPRIN和MMP-2的測定

使用人MMP-2 ELISA試劑盒和人EMMPRIN ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法(ELISA)檢驗齦溝液中MMP-2和EMMPRIN含量的變化。

1.3 統計學方法

采用SPSS 19.0軟件包進行統計學分析，配對t檢驗，Spearman相關分析等相關統計剖析,P<0.05差別具有統計學價值。

2 結果

2.1 慢性牙周炎牙周基礎治療前后和健康對照組之間GCF中EMMPRIN、MMP-2含量,組間差別都具有顯著性(P<0.01)。牙周基礎治療后GCF中EMMPRIN、MMP-2和GCF的含量都較治療前顯然有所下降,但仍高于健康對照組。見表1。

表1 慢性牙周炎治療前后以及健康對照組之間EMMPRIN、MMP-2、GCF總量的比較

2.2 臨床指標探針出血指數(BOP)與治療前后齦溝液中EMMPRIN、MMP-2明顯相關,牙周探診深度(PD)與牙周基礎之療前GCF中EMMPRIN、MMP-2明顯相關,但是與治療后齦溝液內因子量無明顯相關性。見表2。

表2 慢性牙周炎治療前后GCF中EMMPRIN和MMP-2的量與臨床指標關聯性分析

3 討論

牙周基礎治療為慢性牙周炎治療程序中的第一個階段,也是最重要的階段,在臨床中應用廣泛,其影響著慢性牙周炎的后續的治療及預后。基礎治療的目的是去除病因、消除炎癥,從而使患者病情得到緩解控制或者獲得治愈[5]。經相關研究顯示,經牙周基礎治療后的慢性牙周炎,牙齦指數(GI)、探診出血指數(BOP)，牙周探針深度(PD)都有顯著降低,說明牙周基礎治療可以明顯獲得很好的治療效果[6]。齦溝液中含有炎性細胞且其成分與組織液有所區別,為一種炎性滲出液。在牙齦組織發炎時,結締組織水腫,上皮細胞的間隙增加,GCF滲出量增加。本實驗結果顯示,基礎治療后牙周臨床指標均照治療前有所好轉,齦溝液分泌量減少,證明牙周基礎治療對于慢性牙周炎治療的有效性,并且炎癥的改善使得GCF的分泌量減少。

已有報道顯示,EMMPRIN與慢性牙周炎的嚴重程度有關[7]。EMMPRIN在牙齦中主要在上皮細胞中表達,并且在健康和炎癥狀態下均有所表達,其在牙周炎癥狀態下表達上調,并參與牙周組織炎癥的破壞[8]。

牙齦結締組織是由精致緊密的Ⅰ型膠原纖維構成的網狀構造,其新陳代謝是牙齦組織的康健的緊要保證?而MMPs是可以分解細胞外基質的一類蛋白酶。MMP-2能夠使性狀改變的I、II、III型膠原明膠分解的特殊力量,同時可以對天然IV、V、VII、XI型膠原進行切割[9]。MMPs可以在齦溝液中檢測到,在慢性牙周炎的產生。發展過程中施展著緊要的作用,直接參加牙周組織破壞降解過程。探究顯示慢性牙周炎患者的GCF與結締組織中的MMPs的水平和慢性牙周炎的嚴峻程度息息相關,炎癥程度越重,其活性酶與衍生出來的產物就越多[10]。

牙周治療前后與健康對照組GCF中都檢測出EMMPRIN與MMP-2,具有明顯的組間差別(P<0.01),牙周基礎治療后GCF中EMMPRIN、MMP-2和GCF的量都比治療前顯然有所下降,但仍高于健康對照組，且齦溝液中EMMPRIN、MMP-2與臨床指標探診出血有明顯相關性(P<0.05),與治療前牙周探診深度有明顯相關性(P<0.05)。在慢性牙周炎癥重時,齦溝液分泌量增多,EMMPRIN與MMP-2的表達也明顯增加。這一結果顯示EMMPRIN與MMP-2的表達可能與炎癥程度相關。推測EMMPRIN與MMP-2的表達可以反映牙周組織的炎癥程度,能夠成為反映慢性牙周炎癥程度的客觀指標。慢性牙周炎患者齦溝液中炎癥因子的監測可以用于慢性牙周炎的診斷與預后效果評估,有利于慢性牙周炎的早期治療。

[1]Mark Feldmana, Vu Dang La.Porphyromonas gingivalis-mediated shedding of extracellular matrixmetalloproteinase inducer (EMMPRIN) by oral epithelial cells: a potentialrole in inflammatory periodontal disease[J]. Microbes and Infection,2011，13:126-1269

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[5]張玉杰,張勇,翟秀英,等. 基礎治療慢性牙周炎對齦溝液的影響[J].解放軍醫藥雜志,2013,25(4) :55-57

[6]張冬梅,趙戩,潘亞萍. 牙周病基礎治療前后臨床指標的變化及相關分析[J]. 中國醫科大學學報,2004,33( 5) : 424,427

[7]Li C.Expression of extracellular matrix metalloproteinase inducer (EMMPRIN) in healthy and inflamed human gingival[J].Quintessence Int, 2009,40:683-690

[8]韓偉,向軍波.EMMPRIN與牙周炎的相關性研究[J]. 口腔醫學研究,2013,29(10)：964-967

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The effect of basal treatment on EMMPRIN and MMP-2 levels in gingival crevicular fluid from chronic periodontitis patients

ZHUJian-hua,LIJia-wei,JIAHui-min,MIAOYi-bin,LIUJi-guang

(Periodontal Department, The Second Affiliated Hospital of Stomatology Hospital of Jiamusi University, Jiamusi 154002,China)

Objective: To study the changes of gingival crevicular fluid (GCF) of extracellular matrix metalloproteinase inducer (EMMPRIN) and matrix metalloproteinase-2 changes (MMP-2) levels on patients with chronic periodontitis before and after periodontal treatment, and to explore its relevance. Methods: Newly diagnosed clinical indicators were detected and GCF was collected. Then the subgingival scaling and subgingival scaling and other periodontal treatment were taken. At the same time, oral hygiene instruction was offered. Four weeks after the end of treatment, clinical indicators and collected GCF were detected again. ELISA method was used to compare the changes of EMMPRIN, MMP-2 levels before and after basic treatment of chronic periodontitis gingival sulcus fluid, and the relationship between EMMPRIN, MMP-2 and clinical metrics were explored. Results: As for periodontal disease, the amount of EMMPRIN, MMP-2 and GCF gingival sulcus fluid was lower than that before treatment significantly, but still higher than the healthy control group. The amount of EMMPRIN and MMP-2 in the gingival sulcus fluid and changing clinical indicators have some relevance. Conclusion: EMMPRIN and MMP-2 in gingival sulcus fluid may be associated with damage related to chronic periodontitis. When the inflammation is controlled, the secretion is significantly reduced, which have a positive effect on its monitoring and control of chronic periodontitis treatment.

periodontitis; gingival crevicular fluid; EMMPRIN; MMP-2

佳木斯大學研究生科技創新項目，編號：LM2015_055。

朱建華(1959～)女,黑龍江佳木斯人,學士，教授,碩士研究生導師。

劉繼光(1956～)男,黑龍江佳木斯人,博士,教授,碩士研究生導師。E-mail:v6lucky@163.com。

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1008-0104(2016)06-0054-02

2016-05-10)