大腸癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達

王 莉，任秀英，辛 華，孫玉鴻，朱艷麗，王李鳴

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯 154003)

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大腸癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達

王 莉，任秀英，辛 華，孫玉鴻，朱艷麗，王李鳴

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：探討研究大腸癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達及其臨床意義。方法：選擇2013-01～2015-01于我院就診的大腸癌患者共60例作為本次研究的觀察組，同期60例正常黏膜者為對照組，依據免疫組化LSAB法檢測兩組患者的P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達，比較兩組患者表達結果并探討臨床意義。結果：觀察組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達率分別為55.67%、40.00%和58.33%，對照組患者分別為11.67%、81.67%和6.67%，觀察組患者P53和MMP-9基因表達遠高于、nm23-H1基因表達遠低于對照組，比較有統計學意義(P<0.05)。浸潤深度在黏膜及黏膜下患者的P53和MMP-9基因表達遠高于、nm23-H1基因表達遠低于肌層及外肌層組，比較有統計學意義(P<0.05)，淋巴結轉移患者的P53和MMP-9基因表達遠高于、nm23-H1基因表達遠低于淋巴結未轉移患者，比較有統計學意義(P<0.05)。結論：利用LSAB法檢測大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達發現，P53和MMP-9基因表達高于正常，nm23-H1低于正常，P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達與大腸癌患者的浸潤深度和淋巴結是否轉移有直接相關性，這對臨床疾病診斷和預后判斷有重要意義。

大腸癌；P53；nm23-H1；MMP-9；基因表達

大腸癌是臨床上常見消化道惡性腫瘤的一種，是指患者結腸黏膜上皮在多因素作用下發生了基因改變，一般認為遺傳因素占據主要地位，發病率和年齡呈正比關系。患者臨床癥狀表現為腹部隱痛，排便習慣和糞便形狀改變。近年來，大腸癌的發病率呈現逐漸上升的趨勢，研究大腸癌患者的異常基因表達對于研究大腸癌發病機理和治療方法有重要現實意義。本次研究的主要目的是觀察研究大腸癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達及其臨床意義，選取2013-01～2015-01于我院就診的60例大腸癌患者作為本次研究的對象，進行對照試驗，分析報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013-01～2015-01于我院就診的60例大腸癌患者作為本次研究的觀察組，同期60例正常黏膜者為對照組。60例觀察組年齡53～78歲，平均(61.8±5.6)歲，其中男32例，女28例，35例為結腸癌，25例為直腸癌，15例患者浸潤到黏膜及黏膜下，45例患者浸潤到肌層和外膜層，38例為中高分化，22例為低分化，43例發生淋巴結轉移，17例沒有淋巴結轉移；對照組患者年齡36～69歲，平均(53.2±5.4)歲，男33例，女27例。兩組患者年齡和性別等一般資料的比較沒有顯著性差異(P>0.05)，因此具有可比性。

1.2 檢測方法

免疫組化檢測通過LSAB法進行，陰性對照選擇PSB代替一抗，陽性對照選擇已知陽性標本，檢測步驟如下所述：①常規石蠟切片二甲苯脫蠟，使用梯度酒精逐級水化[1]。②通過3%的雙氧水浸泡玻片5min實現阻斷類圓形過氧化物酶活性的目的。③使用乙二胺四乙酸(EDTA)修復液修復10min完成微波抗原修復[2]。④在溫室下孵育15min封閉非特異性抗原后，以1∶100稀釋度的第一抗體滴加，冰箱溫度設置4℃過夜。⑤分別將生物素標記的第二抗體、LSAB復合物滴加到玻片[3]。⑥DAB顯色，蘇木素復染，60℃下烤箱烤60min，最后顯微鏡觀察表達結果。

1.3 評價指標

比較兩組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達情況，分析大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達與浸潤深度的關系，分析大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達與淋巴結轉移的相關性。

1.4 統計學方法

采用統計軟件SPSS16.0分析，計數資料采取率(%)表示，組間率對比取χ2檢驗，P<0.05為具有統計學差異。

2 結果

2.1 兩組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達

觀察組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達率分別為55.67%、40.00%和58.33%，對照組患者分別為11.67%、81.67%和6.67%，觀察組患者P53和MMP-9基因表達遠高于對照組，nm23-H1基因表達遠低于對照組，兩組患者比較有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達情況比較(n=60)

2.2 大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達與浸潤深度的關系

浸潤深度在黏膜及黏膜下患者的P53和MMP-9基因表達遠高于肌層及外肌層組，nm23-H1基因表達遠低于肌層及外肌層組，兩組患者比較有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達與浸潤深度的關系

2.3 大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達與淋巴結轉移的相關性

淋巴結轉移患者的P53和MMP-9基因表達遠高于淋巴結未轉移患者，nm23-H1基因表達遠低于淋巴結未轉移患者，兩組患者比較有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達與淋巴結轉移的相關性

3 討論

大腸癌致病原因是患者結腸黏膜上皮在多因素作用下發生了基因改變，因此筆者研究了P53、nm23-H1和MMP-9三種基因的表達[4]。P53是細胞分裂和增殖負調控作用的重要參與者[5]，突變P53不具有細胞調控作用，突變P53和野生P53結合形成的寡聚蛋白可以導致癌變基因的轉錄失控[6]，從而引起腫瘤的發生。nm23-H1是人類17號染色體上的一個基因[7]，又稱為腫瘤的轉移抑制基因，產物為17kd的蛋白質，包含152個氨基酸[8]，研究證明它的產物參與微管的集合和分解，通過影響細胞骨架狀態開控制細胞的運動、黏連、傳遞信號以及增殖分化等活動[9]。基質金屬蛋白酶是降解細胞外基質的重要參與者，它能有效破壞腫瘤細胞侵襲的組織學屏障，促進腫瘤的侵襲和轉移[10]，腫瘤細胞中可以發現明顯的上調活性增強現象。

本研究通過對60例大腸癌患者和正常黏膜者進行對照試驗發現。觀察組患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達率分別為55.67%、40.00%和58.33%，對照組患者分別為11.67%、81.67%和6.67%，觀察組患者P53和MMP-9基因表達遠高于對照組，nm23-H1基因表達遠低于對照組，兩組患者比較有統計學意義(P<0.05)。浸潤深度在黏膜及黏膜下患者的P53和MMP-9基因表達遠高于肌層及外肌層組，nm23-H1基因表達遠低于肌層及外肌層組，兩組患者比較有統計學意義(P<0.05)，淋巴結轉移患者的P53和MMP-9基因表達遠高于淋巴結未轉移患者，nm23-H1基因表達遠低于淋巴結未轉移患者，兩組患者比較有統計學意義(P<0.05)。結果表明P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達與大腸癌的發生具有密切的相關性，在臨床上可以作為疾病侵入的生物學標志物。

綜上所述，利用LSAB法檢測大腸癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達發現，P53和MMP-9基因表達高于正常，nm23-H1低于正常者，P53、nm23-H1和MMP-9基因的表達與大腸癌患者的浸潤深度和淋巴結是否轉移有直接相關性，對臨床疾病和預后判斷有重要意義。

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黑龍江省衛生和計劃生育委員會科研項目，編號：2016-301。

王莉(1974～)女，黑龍江佳木斯人，學士，主管技師。

辛華(1970～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，主任技師，碩士研究生導師。E-mail:xh70128@163.com。

R735.3+4

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1008-0104(2016)06-0042-02

2016-06-12)