微波輔助提取香椿葉中黃酮成分工藝研究

摘要：對微波輔助條件下乙醇溶液提取香椿葉中黃酮成分進行了研究，以總黃酮提取量為考察目標，綜合單因素影響確定通過L9（34）正交實驗初步確定最佳提取工藝條件為：甲醇濃度50%，微波頻率取700 W，料液比1∶25，回流25 min，獲得的黃酮提取收率5.34%。

關鍵詞：香椿；黃酮；微波；提取工藝

中圖分類號：O629.9

文獻標識碼：A 文章編號：1674-9944（2016）20-0120-02

1 引言

香椿，其春季所發嫩芽是傳統的菜肴，不但營養豐富還具有食療保健作用，具有瀉毒下火、保護肝臟、抵抗炎癥、降低血壓、解除痙攣等多種生理活性功效[1～3]。經現代科學研究，香椿樹嫩葉中富含具有廣泛生物活性和重要藥用價值的黃酮類化合物，其提取物具有抗氧化、抗菌、抵抗炎癥、降壓、抗癌等多種生理活性功效藥理作用[4～7]。但是，目前香椿在秋季落葉的利用研究極少，擬在傳統的熱回流提取工藝之上對微波輔助提取香椿老葉中黃酮的工藝進行研究[8]，豐富香椿老葉黃酮提取的工藝方法，將為香椿老葉黃酮成分提取及分析的相關研究奠定理論基礎。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

實驗儀器與試劑有：UV2550紫外分光光度計（日本島津），蘆丁分析標準品（阿拉?。?，香椿（秋后老葉，達州萬源），其余試劑均為分析純。

2.2 檢測標準曲線的繪制

精密稱取蘆丁分析標準品20.0 mg，使用30%乙醇溶解并定容至100 mL制備的蘆丁標準貯備液（0.2 mg/mL）。準確移取0，1.0 mL， 2.0 mL， 4.0 mL， 6.0 mL， 8.0 mL， 10.0 mL標準儲備液至7支25 mL容量瓶中。然后分別先加30%乙醇至體積一半，后加入0.7 mL質量分數為5%的亞硝酸鈉溶液，搖勻后放置5 min，再分別加入0.7 mL質量分數為10%的硝酸鋁溶液，搖勻后放置5 min，最后加入1 mol/L的氫氧化鈉溶液5 mL并用30%的乙醇定容至刻度，放置10 min。以未添加蘆丁儲備液的溶液為空白，在510 nm測定吸光度值，以吸光度Y為縱坐標，黃酮濃度為橫坐標，繪制標準曲線（圖1）。

2.3 香椿老葉黃酮的提取與含量測定

將香椿老葉去梗后放入干燥箱內30℃干燥至恒重，經中藥粉碎機粉碎后放入干燥器備用。準確稱取1.00 g 香椿葉粉末移入燒瓶中，加入一定量的乙醇溶液，在一定的微波功率和一定的溫度下提取一定的時間，將提取液減壓抽濾除去濾渣，轉移至100 mL容量瓶并用30%乙醇定容至刻度，搖勻。取10 mL定容后溶液的于轉子中，用離心機以10000 r/min的速度離心5 min，精確量取4 mL離心后的上層清液于25 mL容量瓶，再加入質量分數為5%的Na（NO2）溶液0.7 mL，搖勻使其充分反應后等待5 min，然后加入質量分數為10%的Al（NO3）3溶液0.7 mL，搖勻使其充分反應后等待5 min，然后加入1 mol/L的NaOH溶液5 mL混勻使其充分反應，最后用30%的乙醇定容至刻度，放置10 min作為待測溶液測其吸光度。

2.4 正交試驗

2.4.1 正交試驗因素水平

利用提前對微波輔助下提取香椿葉中的黃酮成分進行了單因素實驗計算后，確立了以乙醇水溶液濃度、微波輻射功率、微波輻射時間、料液比4個因素，每個因素3個水平，進行L9（34）正交試驗（表1）；將總黃酮提取率為最后考察指標，結合實際情況確定最佳提取工藝。

2.4.2 正交試驗結果

按上述因素與水平設計實驗方案，并進行正交試驗，結果如表2所示。

由表2可知，各因素的極差大小關系為RA>RB>RC>RD ，因此各因素對香椿葉總黃酮提取的影響順序為A>B>C>D，即乙醇濃度>微波功率>微波時間>料液比，乙醇濃度的極差為0.194，影響程度最大；料液比極差為0.035，影響程度最小。綜合以上各因素的影響，確定提取香椿葉中黃酮成分的最佳工藝為即乙醇濃度50%，微波頻率700 W，微波時間25 min，料液比1∶25。

3 結果與討論

從實驗結果上看，乙醇濃度、微波功率、微波輻射時間、料液比幾個因素對香椿葉中黃酮成分的提取都有著明顯的影響。根據正交試驗我們確定最佳提取工藝條件為乙醇濃度50%，微波頻率700 W，微波時間25 min，料液比1∶25。經在最佳工藝條件下提取驗證黃酮提取率為5.34%，我們對香椿葉提取物經過一次D101大孔樹脂純化富集后黃酮含量即可達26.7%，經高效液相色譜對其成分分析表明組分簡單且主要成分集中，這些表明了香椿老葉黃酮成分的后續開發利用具有很好的前景。

參考文獻：

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