2型糖尿病患者分泌型卷曲相關蛋白5水平和胰島素抵抗與尿白蛋白的關系

許 娜 馬競軒 郭淑芹 張云良 王 翯 白廣芹 常文龍 李 杰

?

2型糖尿病患者分泌型卷曲相關蛋白5水平和胰島素抵抗與尿白蛋白的關系

許 娜1馬競軒1郭淑芹2，*張云良2王 翯2白廣芹2常文龍2李 杰2

目的：分析2型糖尿病(T2DM)患者分泌型卷曲相關蛋白5(SFRP5)水平和胰島素抵抗(IR)與尿白蛋白的關系。方法：137例T2DM住院患者，根據尿白蛋白排泄率(UAER)分為三組：正常白蛋白尿組(DM1組，n=47)；微量白蛋白尿組(DM2組，n=45)；大量蛋白尿組(DM3組，n=45)。另選同期體檢健康者作為對照組(NC組，n=50)。采用ELISE檢測各組血清SFRP5、葡萄糖氧化酶法測定空腹血糖(FBG)、電化學發光免疫分析法測定空腹胰島素(FINS)，計算穩態胰島素抵抗指數(HOMA-IR)。比較組間差異并分析其相關性。結果：與NC組比較，T2DM各組HOMA-IR、FINS、FBG和UAER均升高(P<0.05或P<0.01) ，以DM3組升高最明顯(P<0.05或P<0.01)；DM1組SFRP5水平顯著低于NC組(P<0.01)，但DM2組、DM3組則較DM1組升高，以DM3組升高最明顯(P<0.01)。相關性分析顯示，T2DM患者SFRP5與HOMA-IR呈正相關(r=0.507，P<0.01),且SFRP5和HOMA-IR與UAER亦成正相關(r=0.791、0.345，P<0.01)。結論：SFRP5可能與IR共同參與糖尿病腎病(DN)的發生發展，或可成為DN診療的新靶點。

分泌型卷曲相關蛋白5；胰島素抵抗；2型糖尿病；糖尿病腎病

糖尿病腎病(Diabetic Nephropathy,DN)是糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)特異性微血管并發癥，也是DM患者常見的慢性并發癥之一[1]。DN發病機制復雜，目前尚未完全闡明。有研究[2]認為可能是慢性炎癥通過胰島素抵抗(Insulin Resistance,IR)加速了DM患者的微血管病變進展。分泌型卷曲相關蛋白5(Secreted Frizzled-related Protein 5，SFRP5)是新發現的抗炎脂肪因子，已有研究表明其與腫瘤、冠心病、肥胖及T2DM有關[3-5]，對于SFRP5在DM微血管病變中作用的研究較少見。本研究測定T2DM不同程度尿白蛋白排泄率(Urinary Albumin Excretion Rate，UAER)患者血清SFRP5水平，探討其與IR、UAER的相關性以及與DN的關系。

1 資料與方法

1.1 對象和分組

選取2015-12—2016-05于河北省保定市第一中心醫院內分泌科住院的T2DM患者137例,根據2012年ADA推薦指南中UAER標準[6]將其分為三組：正常白蛋白尿組(DM1組，UAER<20μg/min，n=47)，男25例，女22例，年齡38-69歲，平均(55.04±8.52)歲；微量白蛋白尿組(DM2組，20μg/min≤UAER<200μg/min，n=45)，男21例，女24例，年齡31-72歲，平均(57.56±9.58)歲；大量白蛋白尿組(DM3組，UAER≥200μg/min，n=45)，男28例，女17例，年齡30-74歲，平均(56.27±9.94)歲。所有研究對象均符合2013年中國T2DM防治指南的T2DM診斷標準[1]。并排除(1)心臟、肝臟、其它腎臟疾病以及各種感染性疾病患者；(2)T1DM患者；3個月內發生酮癥酸中毒或高滲性昏迷者；(3)近2周服用血管緊張素轉化酶抑制劑、血管緊張素受體阻斷劑、胰島素增敏劑及其它影響尿蛋白藥物者。選取同期于本院體檢健康者為對照組(NC組，n=50)，男25例，女25例，年齡30—72歲，平均(53.96±10.33)歲。四組性別、年齡、體重指數(BMI)差異均無統計學意義(均P>0.05)；病程、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)差異有統計學意義(P<0.01)。見表1。

表1 各組一般資料比較

注：與NC組比較，1)P<0.05;與DM1組比較，2)P<0.05;與DM2組比較，3)P<0.05

1.2 檢測指標和方法

記錄各研究對象的年齡、性別、病程，測量其身高、體重、血壓。所有研究對象均隔夜禁食10h，次日清晨采集空腹肘靜脈血10ml，離心(3 000r/min)10min 分離血清均分為兩份，一份采用已糖激酶法(日本日立公司全自動7600型生化分析儀)檢測空腹血糖(Fasting Blood Glucose,FBG，試劑由上海名典公司提供，批號：141202)；采用電化學發光法(德國羅氏公司電化學發光儀Cobas6000-E601及原廠配套試劑，批號18095303)測定空腹胰島素(Fasting Insulin,FINS)，并用穩態模式評估法(HOMA model)計算胰島素抵抗指數[Homeostasis Model Assessment for Insulin Resistance, HOMA-IR =(FBG ×FINS)/22.5]。另一份置于—80℃冰箱保存，測定前2h取出平衡至室溫，用ELISA測定血清SFRP5水平(試劑盒由上海酶聯生物科技有限公司提供，批號 20160426；批內差異<6%,批間差異<10%)。

所有對象采血后留取24h尿測定UAER(免疫比濁法，重慶博士泰生物技術有限公司提供的全自動特定蛋白分析儀及原廠配套試劑，批號 1442016003AT)。

1.3 統計學處理

2 結 果

2.1 各組各指標水平比較

各組SFRP5、HOMA-IR、UAER、FINS、FBG水平差異均有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。與NC組比較，DM1組HOMA-IR、UAER、FINS、FBG水平均升高(t/H=-4.577、-4.104、-2.457、-28.023，P<0.05或P<0.01)，SFRP5水平降低(t=19.350，P<0.01)。與 DM1組比較，DM2組SFRP5、HOMA-IR、UAER、FBG水平均升高(t/H=-5.529、-2.328、-8.260、-13.734，P<0.05或P<0.01)，FINS水平差異無統計學意義(t=-1.021，P>0.05)。與DM2組比較，DM3組SFRP5、UAER、FBG水平均升高(t/H=-7.240、-8.171、-12.955，P<0.01)，其余指標(HOMA-IR、FINS)組間水平差異無統計學意義(t/H=-0.382、-1.642，P>0.05)。見表2。

2.2 相關性分析

T2DM患者SFRP5與HOMA-IR呈正相關(r=0.507，P<0.05),且SFRP5和HOMA-IR與UAER均成正相關(r=0.791、0.345，P<0.01)。

表2 各組SFRP5、HOMA-IR、UAER、FINS、FBG水平比較

注：與NC組比較，1)P<0.05,2)P<0.01; 與DM1組比較，3)P<0.05,4)P<0.01; 與DM2組比較，5)P<0.01

3 討 論

DM患者有20%-40%發生DN，早期DN的特征是尿中白蛋白排泄輕度增加(微量白蛋白尿)，逐步進展至大量白蛋白尿和血清肌酐(Scr)水平上升，最終發生腎功能衰竭，需要透析或腎移植[1]。目前研究認為DN的發生發展是多因素綜合作用的結果，在遺傳因素與長期高血糖等環境因素的相互作用下，腎小球基底膜增厚和細胞外基質增多，所導致的腎小球硬化[6]以及炎癥可能作為多種機制的下游關鍵環節對腎臟起損害作用[7，8]。

SFRP5是一種繼脂聯素之后發現的抗炎脂肪因子，其在不同糖耐量人群中表達水平的變化趨勢與脂聯素相似[9]，可能具有與脂聯素相同的抗炎、改善IR等作用。該作用可能通過SFRP5與脂肪細胞分泌的Wnt5a結合，阻止非經典的Wnt信號通路下游的c-Jun氨基端激酶磷酸化，減少炎性因子釋放，最后減弱炎癥對胰島素信號通路的抑制作用，拮抗胰島素受體底物-1絲氨酸磷酸化，從而增加胰島素敏感性[5]。 本研究顯示，DM1組患者血清SFRP5水平較NC組降低，與Hu等[10]及尹經霞等[9]的研究結果一致。劉云濤等[11]的研究結果表明SFRP5從單純DM組到早期DN組表達水平逐漸降低，可能與DM患者INS或腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平升高抑制了SFRP5的分泌有關。 而本研究中SFRP5從DM1到DM3組表達水平逐漸升高(但未超過NC組)，有可能由不斷加重的腎臟病變加強刺激機體分泌更多SFRP5以對抗炎癥反應及不斷加重的腎臟病變導致腎臟濾過功能逐漸降低，使經尿排泄SFRP5減少，導致血液SFRP5水平升高所致。如何解釋這兩種結果的有機聯系和具體機制有待進一步探究。

IR是代謝性疾病發生的共同環節。研究[12]表明IR的嚴重程度與T2DM腎功能正常患者的尿蛋白增加密切相關。在DN發生的初始階段，IR可導致腎小球高壓和高濾過[13]。還有研究認為IR是慢性亞臨床炎癥過程，在這一過程中IR和炎癥反應相互促進，引起機體內環境的一系列改變[14]；血清SFRP5水平變化也可能與IR有關[15,16]。Lv等[15]分別給予成熟脂肪細胞高濃度INS、TNF-α及地塞米松干預后，SFRP5的基因表達和蛋白分泌水平均受到不同程度抑制，而給予INS增敏劑羅格列酮及二甲雙胍后，SFRP5的表達水平明顯升高。本研究中各組DM患者HOMA-IR明顯高于NC組，與既往研究結果[9,16]一致。同時發現DM1組SFRP5較NC組降低時，HOMA-IR較NC組升高，但DM2、DM3組患者SFRP5較DM1組升高時，HOMA-IR也較DM1組增加，而且UAER也顯著升高。相關分析顯示HOMA-IR與SFRP5呈正相關，HOMA-IR、SFRP5均與UAER水平呈正相關，提示SFRP5和IR可能共同參與DN的發生發展。因此，監測血清SFRP5水平對判斷DM患者腎臟病變的發展具有一定的臨床意義。

綜上所述，SFRP5與HOMA-IR呈正相關，且與UAER程度亦呈正相關，提示SFRP5可能與IR共同參與了DM腎臟病變,可能為DN病因分析和臨床治療提供新思路。但SFRP5與IR在DN發病中的具體作用機制還需更深入的研究證實。

?

本文第一作者簡介：

許 娜(1990-)，女，漢族，碩士研究生，研究方向：內分泌及代謝性疾病

1 中華醫學會糖尿病學分會.中國2型糖尿病防治指南(2013年版)[J].中華糖尿病雜志，2014，6(7):447-497.

2 Fujita T, Hemmi S, Kajiwara M, et al. Complement-mediated chronic inflammation is associated with diabetic microvascular complication[J]. Diabetes Metab Res Rev, 2013，29(3):220-226.

3 Xie Q, Chen LL, Shan XF，et al. Epigenetic silencing of SFRP1 and SFRP5 by hepatitis B virus X protein enhances hepatoma cell tumorigenicity through Wnt signaling pathway[J]. International Journal of Cancer,2014，135(3):635-646.

4 Miyoshi T, Doi M, Usui S, et al． Low serum level of secreted frizzled-related protein 5,an anti-inflammatory adipokine, is associated with coronary artery disease[J]. Atherosclerosis，2014，233(2):454-459．

5 OuChi N, Higuchi A, Ohashi K, et al, SFRP5 is an anti-inflammatory Adipokine that modulates metabolic dysfunction in obesity[J]. Science, 2010,329(5990):454-457．

6 American Diabetes Association. Diagnosis and classification of diabetes mellitus[J]. Diabetes Care, 2014,37(Suppl 1):S81-S90.

7 Navarro Gonzalez JF，Mora Fernandez C，Muros de Fuentes M，et al．Inflammatory molecules and pathways in the pathogenesis of diabetic nephropathy[J]．Nat Rev Nephrol，2011，7(6):327-340．

8 Garcla Garcia PM，Getino Melifm MA，Dominguez Pimentel V, et al．Inflammation in diabetic kidney disease[J]．World J Diabetes，2014，5(4):431-443．

9 尹經霞, 楊剛毅, 張利莉, 等. 不同糖耐量人群血漿分泌型卷曲相關蛋白5水平與胰島素抵抗的相關性研究[J]. 中國糖尿病雜志，2013，21(4):289-292.

10 Hu ZP, Deng HC, Qu H，et al.Plasma SFRP5 levels are decreased in Chinese subjects with obesity and type 2 diabetes and negatively correlated with parameters of insulin resistance[J].Diabetes Research and Clinical Practice，2013， 99(3):391-395.

11 劉云濤，簡 磊，潘敬芳.血清分泌型卷曲相關蛋白5與早期糖尿病腎病的相關性研究[J].中國糖尿病雜志，2016,24(2):131-134.

12 Akalin N, Koroglu M, Harmankaya O, et al. Comparison of insulin resistance in the various stages of chronic kidney disease and inflammation[J].Renal Failure,2015,37(2):237-240.

13 Karalliedde J, Gnudi L. Diabetes mellitus, a complex and heterogeneous disease,and the role of insulin resistance as a determinant of diabetic kidney disease[J].Nephrol Dial Transplant,2016,31(2):206-213.

14 陳述林, 羅 敏. 胰島素抵抗的炎癥機制[J].國外醫學內分泌學分冊,2004，24(6):376-378.

15 Lv C, Jiang YZ, Wang H, et al. SFRP5 expression and secretion in adipocyte are upregulated during the differentiation and are negatively correlated with insulin resistance[J]. Cell Biology Internationa1,2012，36(9):851-855.

16 Carstensen M, Herder C, Kempf K, et al. Sfrp5 correlates with insulin resistance and oxidative stress[J]. Eur J Clin Invest,2013,43(4):350-357.

The Correlation of Secreted Frizzled-related Protein 5 Level and Insulin Resistance with Albuminuria in Type 2 Diabetes

XU Na1,MA Jing-xuan1,GUO Shu-qin2,*,ZHANG Yun-liang2,WANG He2,BAI Guang-qin2,CHANG Wenlong2,Li Jie2

1Chengde Medical College,Chengde 067000,China;2Department of Endocrinology，Baoding NO. 1 Central Hospital，Baoding 071000，China;*Corresponding author

Objective: To investigate the correlation of secreted frizzled-related protein 5(SFRP5) level and insulin resistance with albuminuria in type 2 diabetes(T2DM).Method: A total of 137 patients with T2DM were enrolled．According to urinary albumin excretion rate,the patients with T2DM were divided into three groups：normoalbuminurial group(DM1 group,n=47),microalbuminuria group(DM2 group，n=45)，macroalbuminuria group(DM3 group，n=45).The control group included 50 healthy individuals(NC group)．Serum SFRP5 level was detected with ELISA method. Fasting blood glucose(FBG) was measured by gautose oxidase method.Fasting insulin(FINS) was measured by electrochemical iuminescence.Insulin resistance (HOMA-IR) was applied by homeostasis model assessment.To compare the differences of index among groups. Results: Compared with NC group,HOMA-IR,FINS,FBG and UAER in DM1 group,DM2 group,DM3 group were increased,especially DM3 group was increased most obviously (P<0.05 orP<0.01).SFRP5 in DM1 group was significantly lower than NC group (P<0.01), but it in the DM2 group and DM3 group were higher than DM1 group,especially DM3 group was increased most obviously (P<0.01).Correlation analysis showed that SFRP5 level was positive correlated with HOMA-IR(r=0.507,P<0.01).SFRP5 and HOMA-IR,respectively, correlate with UAER(r=0.791,0.345,P<0.01).Conclusion: SFRP5 and IR maybe involved in the occurrence and development of diabetic nephropathy(DN)，and may become the new target for diagnosis and treatment of DN.

Secreted frizzled-related protein 5;Insulin resistance;Type 2 diabetes mellitus;Diabetic nephropathy

1河北省承德醫學院，承德 067000；2河北省保定市第一中心醫院，保定 071000；*

本文2016-08-09收到，2016-08-24修回

R587.2

A

1005-1740(2016)04-0042-45