法氏囊活性七肽BSP—Ⅱ對傳染性法氏囊疫苗的免疫增強作用

王嘉偉　閆婉婉　張巫凡　張聰　王臣

摘要：傳染性法氏囊病（IBD）是由傳染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的主要以破壞雛雞法氏囊中樞免疫器官為發病機理的傳染病，給我國的養雞業帶來了巨大經濟損失。為研制具有良好免疫效果的免疫肽，本實驗用人工合成的法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ和傳染性法氏囊疫苗共同免疫雛雞群，通過對體液免疫指標的檢測來評價其對傳染性法氏囊疫苗的免疫增強作用。結果表明，法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ能夠促進雛雞中樞免疫器官法氏囊的生長發育，同時對傳染性法氏囊疫苗具有免疫增強作用，為進一步的研究奠定了基礎。

關鍵詞：法氏囊；法氏囊活性肽BSP-Ⅱ；體液免疫

傳染性法氏囊病具有發病突然、傳播速度快、病程短、發病率高的特點。是近些年來嚴重危害我國養雞業的主要傳染性疾病之一。由于傳染性法氏囊病的病原存在容易變異和損害中樞免疫器官的特性，因此該病的疫苗研制、開發以及臨床上的應用都是一個持續性的難題。研究表明，法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ能夠促進B、T淋巴細胞的生成，增強淋巴細胞轉化成漿細胞時產生抗體的能力。還能夠提高機體抗過氧化應激的能力，是具有廣泛應用前景的免疫調節劑。本研究擬以傳染性法氏囊疫苗聯合人工合成的BSP-Ⅱ免疫雞，通過對免疫指標水平的檢測來評價BSP-Ⅱ對傳染性法氏囊疫苗的免疫增強作用，為進一步研究開發新型免疫佐劑奠定基礎。

一、材料與方法

1.試驗材料。健康非免疫來航雛雞105只，購于洛陽現代禽業有限公司；傳染性法氏囊弱毒苗購自遼寧益康生物制品有限公司；傳染性法氏囊標準強毒株（BC6/85株）由本實驗室保存。

2.法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ的設計及合成。法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ根據TPSGLVY氨基酸序列由上?？齐纳锟萍加邢薰竞铣?，純度達95%以上。

3.動物的分組及免疫。將105只雛雞分為三組：空白組、單獨疫苗組、疫苗+BSP-Ⅱ組，每組35只?？诜緩綄﹄r雞進行免疫接種。劑量：空白組（生理鹽水0.5ml/只）；疫苗組（傳染性法氏囊弱毒苗1頭份/只）；疫苗+BSP-Ⅱ組（傳染性法氏囊弱毒苗1頭份/只+BSP-Ⅱ10ug/只）；首免后間隔一周進行第二次免疫。

4.雛雞法氏囊指數的測定。首免后7 d、14 d采集法氏囊。測定雛雞法氏囊指數。

5.雛雞AGP抗體效價的測定。將雛雞在首免后14 d分離得到的血清用瓊脂擴散實驗測其AGP抗體效價。

6.數據統計學分析。采用SPSS17.0軟件進行計算分析，不同組間比較采用單因素方差分析，各組之間存在顯著性差異用*（P<0.05）表示；各組之間存在極顯著差異用#（P<0.01）表示；各組之間不存在顯著性差異用（P>0.05）表示。

二、結果與分析

1.法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ對雛雞法氏囊免疫器官生長發育的影響。通過spss軟件分析得出在首免后7 d、14 d疫苗+BSP-Ⅱ組與空白組存在顯著性差異（P<0.05），疫苗組與空白組之間不存在顯著性差異（P>0.05），如圖1所示。由此可知，傳染性法氏囊疫苗對雛雞法氏囊中樞免疫器官的生長發育沒有影響，但法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ能夠促進雛雞中樞免疫器官法氏囊的生長發育。

2.法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ對雛雞AGP抗體效價的影響

24-48 h觀察瓊脂平板培養皿，經過最后的計算得出空白組的平均雛雞AGP抗體效價趨于0；單獨疫苗組的平均雛雞AGP抗體效價為6；疫苗+BSP-Ⅱ組的平均雛雞AGP抗體效價為8；如圖2所示，可以得出法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ對傳染性法氏囊疫苗具有免疫增強的作用。

三、討論

傳染性法氏囊病具有發生速度和傳播速度快的特點，雞舍中一旦發現有感染的雞時，在短時間內所有雞均可被感染，嚴重雞群的死亡率可高達60%。對于畜牧業來說，本病一旦發生就會造成極大的經濟損失。法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ是從法氏囊中分離出的又一種活性小肽，既可以從雞或其它禽類的法氏囊組織中提取，也可以人工化學合成，合成時成本很低，可以大量制備。實驗結果表明，法氏囊活性七肽BSP-Ⅱ作為佐劑既能夠促性雛雞法氏囊中樞免疫器官的生長發育，而且能夠增強傳染性法氏囊疫苗所誘導的AGP抗體水平。這為法氏囊活性肽的進一步研究與生產實踐中的應用奠定了理論基礎。