法氏囊活性五肽BPP—Ⅱ對新城疫疫苗免疫雞免疫水平的影響

閆婉婉　張巫凡　張聰　王臣

摘要：新城疫是由新城疫病毒引起禽的一種急性、熱性、敗血性和高度接觸性傳染病，給我國的養雞業帶來了巨大損失。為研制具有良好免疫效果的免疫肽，本實驗通過人工合成法氏囊活性肽BPP-Ⅱ，將其作為佐劑添加到新城疫疫苗中免疫雛雞，通過對體液免疫指標的檢測來評價其對新城疫疫苗免疫效果的影響。結果表明：BPP-Ⅱ不僅對新城疫疫苗有免疫增強作用，而且對法氏囊器官的發育有促進作用。

關鍵詞：法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ；新城疫疫苗；法氏囊指數；抗體滴度

新城疫（newcastle disease，ND）具有很高的發病率和死亡率，是危害養禽業的一種主要傳染病。給養禽業帶來非常巨大的經濟損失。研究發現，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ可以促進T淋巴細胞和B淋巴細胞的增殖、提高機體的細胞免疫和體液免疫的水平、還可以提高機體的抗過氧化應激能力，并且具有廣泛應用前景。本研究通過人工合成法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ，將其作為免疫添加劑配合疫苗使用，通過檢測免疫指標水平的變化評價BPP-Ⅱ對新城疫疫苗免疫效果的影響，從而為BPP-Ⅱ作為免疫佐劑在臨床上的應用提供依據并且為進一步研究奠定基礎。

一、材料與方法

1.試驗材料

1日齡健康的來航雞購于洛陽峪口禽業有限公司。新城疫弱毒疫苗購于遼寧益康生物制品有限公司。新城疫病毒毒株F48E9，由本實驗室保存。

2.法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ合成

法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ，由上海科肽生物科技有限公司合成，純度達到95%以上。

3.動物分組及免疫

將105只小雞隨機分成3組，每組35只。9日齡首免，14d后進行二免。采用注射免疫，空白對照組免疫PBS；疫苗對照組每只雞免疫1頭份量的新城疫弱毒苗；疫苗加肽組，每只雞除了免疫1頭份量的新城疫疫苗外，還免疫10ug的法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ。

4.雛雞脾臟、法氏囊指數的測定

首免后14d、21d第二次采集脾臟和法氏囊。常規方法測定脾臟、法氏囊指數。

5.雛雞HI抗體效價的測定

將雛雞在首免后21 d分離得到的血清進行HI試驗，測定雛雞HI抗體效價。

6.統計學處理

采用SPSS 17.0軟件，不同組間比較采用單因素方差分析。

二、結果與分析

1.法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ對雞的脾臟器官發育的影響

經SPSS分析，疫苗+肽組的脾臟指數與空白對照和疫苗對照組相比，無顯著性差異（P>0.05）。由此可見，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ對雞的脾臟的生長無明顯促進作用。

2.法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ對雞的法氏囊器官發育的影響

經SPSS進行分析，疫苗+肽組法氏囊指數顯著高于空白對照組和疫苗對照組（P<0.05），如表1。由此可見，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ對雞的法氏囊的生長有一定的促進作用，也即對雞的免疫器官有一定的促進作用。

3.法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ對抗體效價的影響

兩次免疫后發現，只用疫苗的對照組，平均抗體效價達到5.3，而法氏囊活性五肽配合疫苗組，平均抗體效價達到6.2。由此可見，法氏囊活性五肽對雞新城疫疫苗免疫雞產生抗體有一定促進作用。

三、討論

法氏囊活性肽是從法氏囊中提取到的一種活性因子，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ結構簡單，其氨基酸序列為：Met-Thr-Leu-Thr-Gly。分子量小，無免疫原性，無化學毒性，制備很簡單，可以從雞或其它禽類的BF中提取，也可以用化學的方法合成，化學合成的成本也很低，可以大量的制備。實驗結果表明，法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ作為佐劑能顯著提高雞新城疫弱毒疫苗的體液免疫應答，這為法氏囊活性五肽BPP-Ⅱ作為免疫佐劑配合弱毒疫苗使用提供了參考依據。