九龍蟲散對慢性支氣管炎大鼠模型氧自由基及內(nèi)皮素—1的影響

胡小杰　潘朝旺

【摘 要】 目的：觀察九龍蟲對脂多糖煙霧誘導(dǎo)慢性支氣管炎模型大鼠超氧自由基和內(nèi)皮素-1（ET-1）的影響。方法：取雄性SD大鼠60只，用脂多糖煙霧誘導(dǎo)法復(fù)制慢性支氣管炎模型，經(jīng)給藥治療后，測定血清和肺組織中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和內(nèi)皮素-1（ET-1）含量。結(jié)果：與正常組比較，模型組血清和肺組織SOD水平降低（P<001），MDA和ET-1含量升高（P<001）；各給藥組與模型組比較，以上指標(biāo)均有改善（P<005或P<001）。結(jié)論：九龍蟲具有抗慢性支氣管炎作用，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)SOD、MDA和ET-1水平有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 九龍蟲；慢性支氣管炎；超氧化物歧化酶；丙二醛；內(nèi)皮素-1

【中圖分類號】R2855 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2016）20-0016-02

慢性支氣管炎是臨床上一種常見病和多發(fā)病，以咳嗽、咳痰或伴有氣喘等反復(fù)發(fā)作為主要癥狀。本實(shí)驗(yàn)擬通過在研究九龍蟲對慢性支氣管炎模型大鼠血清和肺組織SOD、MDA和ET-1的影響，探討其抗慢性支氣管炎作用機(jī)制。

1 儀器與材料

11 動物 清潔級雄性SD大鼠，體重（200±20）g，由成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動物研究中心提供，許可證號：SCXK（川2013-24）。

12 藥物與試劑 九龍蟲散（本院自制，用前配成混懸液）； SOD（批號：20160115）、ET-1（批號：20151223）等試劑盒購自南京建成生物工程研究所；桂龍咳喘寧膠囊（批號：20160106，桂龍藥業(yè)（安徽）有限公司）。

13 儀器 PT-MR3100D組織勻漿機(jī)（瑞士Polytron公司）；Z160M微量高速離心機(jī)（德國HERMLE）；臺式冷凍離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器公司）； UV754紫外可見分光光度計(jì)（上海佑科儀器儀表有限公司）。

2 方法

21 動物造模及分組給藥 隨機(jī)抽10只大鼠，為正常組。其余54只參照文獻(xiàn)[1]建立脂多糖煙霧誘導(dǎo)慢性支氣管大鼠模型：實(shí)驗(yàn)第1、14天將大鼠麻醉，固定，將01%脂多糖200μL用靜脈導(dǎo)管針套管快速注入氣管；從第2天開始，將大鼠分置在自制的2個(gè)煙室中，煙室大小為100cm×60cm×40cm，每個(gè)煙室放置27只大鼠，用硫磺15 g及煙葉、刨花、鋸末各10g混勻，點(diǎn)燃熏煙，每天2次，每次1h，持續(xù)到第28天（第14天除外），第29天，將造模大鼠隨機(jī)抽取4只，取肺組織切片，觀察造模是否成功。正常組在無煙環(huán)境中正常飼養(yǎng)。將以上造模成功的大鼠混合并隨機(jī)分為5組，即模型組、陽性對照組、九龍蟲高、中、低劑量組，加上正常組共6組，正常組及模型組給予生理鹽水15mL/kg·d，陽性對照組給予桂龍咳喘寧膠囊混懸液075g/kg·d，九龍蟲高、中、低劑量組分別給予九龍蟲混懸液004、002、001g/kg·d，連續(xù)給藥15d。

22 觀察指標(biāo)

221 血清SOD、MDA和ET-1的測定 末次給藥24h后，將大鼠斷頭取血約8mL，3000 r/min離心15min，制備血清，按試劑盒說明測定血清中SOD、MDA和ET-1含量。

222 肺組織SOD、MDA和ET-1的測定 大鼠處死后，在右肺中葉距離肺門1/3取肺組織約05g，用4℃生理鹽水漂洗，吸濕，稱重，剪碎，加入預(yù)冷的9倍生理鹽水，用組織勻漿機(jī)制成10%的肺組織勻漿。3000 r/min離心15min，按試劑盒說明測定SOD、MDA和ET-1含量。

23 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)用SPSS190軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，各實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)均采用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差（x[TX-*3]±s）表示，用方差分析進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。P<005表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

31 對血清SOD、MDA和ET-1的影響 與正常組比較，模型組血清SOD水平降低（P<001），MDA和ET-1含量升高（P<001）；各給藥組與模型組比較，SOD水平升高（P<005或P<001），MDA和ET-1含量明顯降低（P<005或P<001）。

32 對肺組織SOD、MDA和ET-1的影響 與正常組比較，模型組肺組織SOD水平明顯降低（P<001），MDA和ET-1含量明顯升高（P<001）；各給藥組與模型組比較，SOD水平明顯升高（P<005或P<001），MDA和ET-1含量明顯降低（P<005或P<001）。

4 討論

研究表明[3]，氧化應(yīng)激可引起和促進(jìn)氣道中多種炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，從而導(dǎo)致慢性支氣管炎。SOD是一種清除體內(nèi)氧自由基的重要酶，是機(jī)體抵抗氧化損傷的保護(hù)屏障之一，可以保護(hù)呼吸道細(xì)胞免受氧化損傷，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，從而維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，具有非常重要的意義。MDA作為機(jī)體細(xì)胞脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的一種產(chǎn)物，其含量越高表示機(jī)體氧化損傷程度越大，炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生就會越多，容易引起和加重慢性支氣管炎的病情。研究結(jié)果顯示，九龍蟲可有效提高慢性支氣管炎大鼠血清和肺組織SOD水平，而降低MDA含量。（P<005）。

ET-1是目前發(fā)現(xiàn)最強(qiáng)的縮血管物質(zhì)，是由內(nèi)皮細(xì)胞合成內(nèi)源性肽類物質(zhì)，可引起肺血管收縮、支氣管收縮以及氣道和肺血管平滑肌增生，并且上調(diào)炎癥反應(yīng)，在慢性支氣管炎的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，九龍蟲可有效降低慢性支氣管炎大鼠血清和肺組織ET-1含量（P<005）。

綜上所述，九龍蟲具有抗慢性支氣管炎的作用，其機(jī)制可能與提高機(jī)體血清和肺組織SOD水平，降低MDA和ET-1含量有關(guān)。

參考文獻(xiàn)

[1]張良芝，謝文英，常學(xué)輝.愛羅咳喘寧口服液對慢性支氣管炎大鼠模型LTB4、IL-8 表達(dá)的影響[J].中醫(yī)學(xué)報(bào)，2014，29（19）：1267-1268.

[2]王勤，鄧家剛，楊柯，等. 芒果苷對慢性支氣管炎大鼠炎癥因子及小鼠巨噬細(xì)胞環(huán)氧化酶-2表達(dá)的影響[J].中國中藥雜志，2011，36（10）：1348-1352.

[3]MENG Y，YU C，LI T，et al. Expression and significance of Toll-like receptor-4 in rats lung established by passive smoking orassociated with intratracheal instillation of lipopolysaccharide[J]. Chin Med J，2013，93（28）：2230-2234.

（編輯：梁志慶）