奶牛MOET技術研究進展

劉艷萍 王貴 梅步俊

（河套學院，內蒙古巴彥淖爾 015000）

奶牛MOET技術研究進展

劉艷萍 王貴 梅步俊

（河套學院，內蒙古巴彥淖爾 015000）

根據我國國情來看，我國優質土地資源稀缺，高品質奶源地較少，若要提升我國優質牛奶產量，不能完全通過擴大生產與盲目進口國外優質種牛的方法來解決。本文對今年有關奶牛同期發情、超數排卵以及胚胎移植技術研究的相關報道進行了總結，對國內外國外有關奶牛在MOET技術中應用的方法與其效果進行了綜述。

奶牛 同期發情 超數排卵 胚胎移植

MOET（multiple ovulation and embryo transfer）技術就是超數排卵（multiple ovulation）和胚胎移植（embryo transfer）技術的簡稱，是上世紀七十年代才發展起來的生物高新技術。近3年來，家畜超數排卵和胚胎移植（MOET）技術的研究與應用取得了巨大的成果，目前在奶牛生產中已得到廣泛應用，并且在奶牛生產上顯著的繁育成效和良好的經濟效益將會隨著該技術的發展而日益表現出來。從50年代開始，許多國家為了加快家畜生產性能改良的步伐，紛紛建立了后裔測定育種體系，并主要在奶牛上得到了很好的應用。但是隨著后裔測定選擇的不斷進行，單胎動物的母畜繁殖力低下成為限制進一步提高家畜遺傳進展的主要因素。MOET技術則很好地打破了這一限制，通過超數排卵和胚胎移植，使母畜的繁殖力提高幾十倍，為進一步提高家畜育種進程提供了一個新的技術保證。

1 MOET技術在國內外家畜育種中的發展概況

國外應用MOET技術發展的較早，自1951年胚胎移植牛誕生以來，這項技術發展得很快，1974年成立的國際胚胎移植協會（IETS），1976年牛的非手術胚胎移植成功，并得到推廣應用。1977年開始進入商業化應用，13個國家成立了數百家商業性的胚胎移植公司。根據國際胚胎移植協會（IETS）的統計，1991年全世界移植牛胚胎總數為24073枚，到2000年全世界移植牛胚胎總數達到528540枚［1］，到2010年時達到590561枚［2］。根據IETS在2000年的統計，每頭供體奶牛采得可用胚約為6枚，鮮胚妊娠率平均約為62%，凍胚妊娠率約為54%，而2010年時，每頭供體奶牛采得可用胚約為6.1～6.7枚/次，妊娠率達58.2%［3］。

國外應用MOET技術，使優秀母牛資源得到了充分利用。應用MOET技術生產了大量后裔測定公牛，加拿大已占58%，美國、法國分別占50%。每年世界各國牛胚胎移植可能遠超過35萬頭。其他家畜胚胎移植數量相對較少，全世界綿羊和山羊主要進出口的胚胎數量約為牛的5%～10%［4］。

我國在應用MOET技術選育高產黑白花奶牛的研究和建立中，西門塔爾牛開放育種核心體（ONBS）方面都取得了較大進展。在“八五”期間，由張沅［5］教授主持的國家科技攻關課題“應用MOET技術提高中國荷斯坦牛生產性能的研究”作為國家科技攻關專題，取得了突破性進展，在北京市中心良種場實施了MOET核心群育種方案，經過5年的努力，建立了由270余頭優秀ET母牛組成的核心群。

2 奶牛超數排卵技術的研究狀況

超數排卵就是在動物發情周期的一定階段，通過外源激素刺激，提高血液中促性腺激素濃度，降低發育卵泡的閉鎖，增加早期卵泡發育到高級階段（成熟）卵泡的數量（即增加每次排卵的數量），使動物產多胎，并準確的按照預定的時間進行排卵，達到提高繁殖率的目的。

使用激素及方法：牛超數排卵使用的激素主要有促卵泡素（FSH）、孕馬血清促性腺激素（PMSG）、絨毛膜促性腺激素（HCG）等幾種。使用前應根據母牛體重、超數排卵次數等情況，確定超數排卵所使用FSH劑量，一般體形較大的牛劑量大些，重復超數排卵的劑量也要適當提高。

韋家周［6］等人采用FSH-PGc方法進行超數排卵處理，對符合供體條件的優質澳洲荷斯坦奶牛肌肉注射FSH，2次/d，間隔12h，連續注射4d。劑量為：第1d每次肌肉注射4.0ml，以后每次逐漸減少1.0ml，第4d則每次注射1.0ml。在肌肉注射FSH后的第3d上午同時肌肉注射0.6 mg PGc，并觀察母牛發情情況；在肌肉注射PGc 48 h后進行第1次人工授精，隔12h再輸精1次；第1次輸精同時注射促排卵素3號（LHRH-A3 ） 50 g/頭。不同月份對澳洲荷斯坦奶牛超數排卵效果的影響均不同。

吳志強［7］的“超數排卵法生產奶牛的效果”文中，其在超數排卵處理中，采用孕酮+FSH+PGF2a+BST法（Ⅰ）、促卵泡素（FSH）減量注射法（FSH+氯前列烯醇法）（Ⅱ）、FSH+PVP+PGF2a法（Ⅲ）三種處理模式，超數排卵處理共192頭牛，計357頭次，其中165頭中進行了第2次超排處理。結果顯示，總體而言超排成功率95.2%，頭均獲卵數9. 95枚，頭均獲胚數6.35枚，共獲得可用胚2162枚。在第一次超排間隔50天后，進行第2次超排，第2次超排成功率92.7%，比第一次低4.8%；頭均獲卵數9.98枚，與第一次一致，但變異范圍為±6.87，比第一次±5.43大；頭均可用胚數6.27枚，比第一次低2.5%，而變異范圍為± 5.12，比第一次±4.86大，經t檢驗，頭均獲卵數和頭均可用胚數與第一次比，差異不顯著（P＞0.05）。第2胎牛和第3胎牛，頭均獲卵數分別為9.43±7.32、10.82±5.26，頭均可用胚數分別為6.23±5.63、6.57 ±4.51，經t檢驗，差異均不顯著（P＞0.05）。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ超排處理模式中，頭均獲卵數分別為10.14±4.72、9.76±5.43、9.98±6.87，頭均可用胚數分別為6.52±4.86、6.31±5.12、6.23±5.31，模式Ⅰ在超排成功率、頭均可用胚數等指標上優于模式Ⅱ、模式Ⅲ，經t檢驗差異不顯著（P＞0.05）。結果表明，實際生產中以孕酮+FSH+PGFZa+BST法效果較好。

3 奶牛同期發情技術的研究狀況

同期發情是家畜繁殖的一項新技術，就是利用某些激素制劑，人為地控制并調整母畜的發情周期，使其在預定的時期內集中發情的方法。

對奶牛的同期發情方案人們已經進行了深入的研究。提出的方案很多，在這些方案中同期化排卵（Ovsynch）程序及其改進程序是近些年來研究較多的同期發情（Ovsynch）程序是：注射GnRH的時間記為0天，第7天注射PGF，第9天注射GnRH，注射GnRH后8-18h后配種。在生產應用中，至于方案的優劣并不是絕對的，應根據自己牛場的實際情況選擇合適的方案，同時提高飼養管理水平，最大限度地減少應激和疾病，才會取得良好的效果。

4 奶牛胚胎移植技術的研究狀況

世界上第一例胚胎移植是由英國人W·希普于1890年完成的，胚胎移植技術由此創始。但當時純屬生物科學實驗性質。希普在劍橋大學將純種安哥拉兔的兩具胚胎移植到一只已和同種交配、毛色特征完全不同的比利時兔的輸卵管內。結果生出4只比利時仔兔和2只由胚胎發育而成的安哥拉仔兔。20世紀30年代以后，以兔、小白鼠和大白鼠等為對象的胚胎移植試驗持續不斷，但家畜方面的應用研究開展較晚。牛和豬的胚胎移植遲至1951年才分別由美國和蘇聯報道成功。但限于技術水平，當時的采卵和移植都用外科手術完成，60年代后，胎的收集、培養、冷凍長期保存以及顯微外科操作和移植技術取得重要進展。同時，使用激素人工誘導超數排卵和同期發情、用非手術采卵和移植的技術也獲得成功，提高了回收率和著床率，這使胚胎移植技術進入了實用階段，開始用于家畜育種及奶牛生產。70年代后，許多西方國家在奶牛業中發展從事胚胎移植的商業企業。

1981年，德國農業科學院的專家們將授精后第8天的兩個初期發育的占胚胎通過顯微手術對稱地分割為兩對（即4個）胚胎，然后將其移植到兩頭受體母牛的子宮里。1981年12月8日，兩種雙胞胎，4頭小牛犢落地出生，世界上第一次胚胎分割移植試驗獲得完全成功。此后，一分為三、一分為四的胚胎分割移植也相繼在多個國家獲得成功。這一技術可進一步開發良種母畜的繁殖能力。

在國內，牛的胚胎移植從1975年開始，1978年在上海牛奶公司第七牧場產出第一頭犢牛（當時每頭供體牛采胚約1.5枚，妊娠率約為28%）近年來，國內牛胚胎移植技術的研究與推廣應用步伐很快，到2011年時，我國胚胎移植技術已達國際平均水平（此時每頭供體牛采胚約8.51枚，妊娠率約為40.39%）。

5 展望

我國奶業發展歷史較短，到上世紀末奶牛存欄數量基數較低，受乳制品消費需求的持續增長及國家產業政策扶植等有利因素推動，我國奶業在本世紀以來得到了快速發展，奶牛存欄數量從2000年起快速增加，至2013年，我國奶牛存欄數量已達1440.00萬頭；奶類產量總體上呈增加趨勢，2012年達到了3875.40萬噸的高峰。為提升產品的核心競爭力，運用高效的培養技術生產高質量的奶源成為競爭未來市場的核心力量。

MOET技術在國內的應用并不廣泛，主要因為胚胎移植技術效率不高，成本高，技術人員少，但常規的胚胎移植技術已基本成熟。根據我國國情來看，我國優質土地資源稀缺，高品質奶源地較少，若要提升我國優質牛奶產量，不能完全通過擴大生產與盲目進口國外優質種牛的方法來解決。利用MOET育種技術快速選育出良種高產奶牛，可解決中國現已引進的良種奶牛品種的培育問題，不僅可以節約大量外匯，還可以減少疫病的傳入。MOET作為畜牧產業中的新興技術產業，無論在育種領域，還是在提高畜牧整體遺傳水平上，都會發揮越來越大的作用，隨著活體取卵，體外成熟，體外受精，體外培養技術的完善，體外生產胚胎的商業化應用會進一步提高，其成本將會顯著降低，并將為奶牛行業產生巨大的經濟效益。

［1］楊煒峰.胚胎移植技術的現狀與展望.西北農林科技大學家畜生殖內分泌與胚胎工程農業部重點實驗室，2002（8）∶29-33.

［2］黃德均.牛胚胎移植研究進展，重慶市畜牧科學院.重慶榮昌.2015（4） ∶10-14.

［3］朱化彬.我國胚胎生物技術進展及其在良種牛擴繁中的應用，中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所.北京.2014（50） ∶61-67.

［4］張嘉保.胚胎工程在肉牛生產中的應用及發展趨勢，解放軍農牧大學.長春. 1998（2）∶39-40.

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［6］韋家周，蔣欽楊，蔣和生，韋精衛，韋志堅，張 宇，張詩新，韋英明.澳洲荷斯坦奶牛MOET技術研究［J］.廣西農業科學，2014（41）∶835-837.

［7］吳志強.超數排卵法生產奶牛胚胎效果的研究，四川農業大學碩士學位論文，2004年11月.

［8］王希朝，王光亞.MOET技術在家畜育種中的應用［J］.西北農業大學學報，2000（1）∶92-97.

［9］王曉蘭，和占星，李瑞生.胚胎移植技術在現代養牛業中的應用［J］.黃牛雜志，2005（2）∶63-65 .

［10］李躋.牛MOET技術研究現狀與進展［J］.中國畜禽種業，2010（4）∶141-143.

［11］孫曉玉，甘文平，韓光毅.MOET技術在奶牛生產上的應用［J］.黑龍江動物繁殖，2003（3）∶21-22.

［12］陳紅躍，凌虹，景開旺.應用性別控制與0123 技術加速奶業健康發展［J］.中國奶牛，2009（12）∶5-7.

［13］姬秋梅，張成福，信金偉，達娃央拉.牦牛MEOT技術研究進展［J］.中國牛業科學，2011（37）∶58-64.

［14］2016-2022年中國奶牛市場發展現狀及戰略咨詢報告.

項目名稱：河套地區場站式高產奶牛生產群培育MOET技術推廣研究（NJZY14331）

項目來源：內蒙古自治區教育廳

劉艷萍（1969—），女，內蒙古五原人，副教授，理學學士，主要承擔生物化學的理論與實踐教學，研究方向為動物的胚胎移植及家畜的保種育種。