頸型頸椎病患者血清肌酸激酶和乳酸脫氫酶及其同功酶的含量變化分析

吳世良　張開坤　費(fèi)爽明　朱慧鋒　搖順華　張國泉

頸型頸椎病患者血清肌酸激酶和乳酸脫氫酶及其同功酶的含量變化分析

吳世良張開坤費(fèi)爽明朱慧鋒搖順華張國泉

目的 探討頸型頸椎病患者血清肌酸激酶（CK）、肌型肌酸激酶（CK-MM）、乳酸脫氫酶（LDH）及其同功酶的水平。方法 應(yīng)用病例對照研究，選擇頸型頸椎病患者80例，對照組80例，均取靜脈血，應(yīng)用瓊脂糖凝膠電泳法、聚丙烯酰胺凝膠電泳法和酶動(dòng)力學(xué)法測定兩組人群血清中總CK及其肌型同功酶、總LDH及其同功酶的活力。結(jié)果 觀察組血清CK總活力［（l54.93±58.76）IU/L］高于對照組［（l30.13±55.89）IU/L］，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；觀察組血清CK-MM同功酶中CK-MM1活力［（46.32±5.21）IU/L］低于對照組［（54.78±7.13）IU/L］（P＜0.05），CK-MM2活力［（33.11±5.02）IU/L］與對照組［（31.30±5.43）IU/L］比較無明顯差異（P＞0.05），CK-MM3活力［（23.12±4.32）IU/L］高于對照組［（12.78±3.32）IU/ L］（P＜0.01）；觀察組CK-MM3/CK- MM 1比值（0.51±0.62）高于對照組（0.22±0.19）（P＜0.01）。觀察組血清肌型同功酶LDH5雖高于對照組，但無明顯差異（P＞0.05）。結(jié)論 頸型頸椎病患者血清CK、LDH及其同功酶發(fā)生變化，說明此類患者肌肉有損傷，CK是其血清中變化較敏感的指標(biāo)。

隨著社會(huì)的發(fā)展和電子產(chǎn)品的快速普及，頸椎病的發(fā)病日趨普遍化和年輕化。頸椎病是因頸椎骨與間盤及其他附屬結(jié)構(gòu)退行性變或長期慢性勞損導(dǎo)致頸部肌肉、韌帶、神經(jīng)、脊髓及血管等受到累及而產(chǎn)生一系列臨床綜合征［1］，近年來，經(jīng)臨床研究證實(shí)，人們逐漸認(rèn)識到頸部肌肉勞損及變性是引發(fā)頸椎動(dòng)力性失衡從而導(dǎo)致頸椎病發(fā)生的重要因素［2］。因此，開展頸椎病與頸部肌肉的相關(guān)性研究，對頸椎病的防治及預(yù)后判斷具有重要意義。頸型頸椎病是最常見的臨床類型，約占頸椎病的40%［3］。本研究通過分析頸型頸椎病患者血清乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶（CK）及其同功酶活力水平的變化，探討這一類患者骨骼肌損傷程度的判斷以及對血清CK、LDH及同工酶的影響，以期為臨床上病情與治療效果判斷提供一個(gè)新的實(shí)驗(yàn)室方法。

1　臨床資料

1.1一般資料 選擇2015年2月至2016年2月在本院骨科就診的中青年頸肩痛患者組成觀察組，通過問診、填寫病例登記表，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照國家中醫(yī)藥管理局頒布的《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》［4］：（1）主要臨床癥狀及體征：頸項(xiàng)部痛，頸椎活動(dòng)受限，局部肌肉僵硬，有明確的壓痛點(diǎn)。（2）X線片示：頸椎曲度改變，且影像學(xué)改變節(jié)段與發(fā)生臨床癥狀節(jié)段相符。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并頸部嚴(yán)重創(chuàng)傷者。（2）頸部外傷或外科手術(shù)史者。（3）頸椎先天畸形者。（4）椎骨破壞者。選擇本院體檢中心健康人員組成對照組，共得到符合要求的病例80例，其中男5l例，女29例，平均年齡（32.4±6.9）歲。另選取同期體檢健康人員80例設(shè)為對照組，其中男48例，女22例，平均年齡（31.8±7.1）歲。兩組性別、年齡方面差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。上述人員均知情同意并簽署知情同意書。l.2 方法 觀察組和對照組各取靜脈血5ml，采出的全血靜置于室溫下30min，并于3000r/min離心15min，分離后的血清標(biāo)本通過日立7170型全自動(dòng)生化分析儀，利用酶動(dòng)力學(xué)法測定其CK和LDH 的總酶活力。肌型肌酸激酶同功酶（CK-MM 同功酶）測定采用聚丙烯酰胺凝膠電泳法，LDH同功酶的測定采用瓊脂糖凝膠電泳法。

2　結(jié)果

2.l 血清中CK、LDH總活力 觀察組血清CK總活力［（l54.93±58.76）IU/L］高于對照組［（130.13±55.89）IU/L］，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0l）；觀察組的血清LDH總活力［（161.63±44.59）IU/L］高于對照組［（155.28±31.54）IU/L］，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2血清中CK-MM、LDH同功酶活力 觀察組血清CK-MM同功酶中，結(jié)果顯示CK- MM1活力低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而CK-MM2活力與對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），CK-MM3活力也顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0l）；觀察組CK-MM3/CK-MM1比值顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0l），見表1；觀察組血清LDH同功酶LDH5雖高于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表1　對照組及觀察組CK-MM同功酶活性［IU/L，（±s）］

表1　對照組及觀察組CK-MM同功酶活性［IU/L，（±s）］

組別nCK-MM1CK-MM2CK-MM3CK-MM3/CK-MM1觀察組8046.32±5.21*33.11±5.0223.12±4.32#0.51±0.62#對照組8054.78±7.1331.30±5.4312.78±3.320.22±0.19注：與對照組比較，*P＜0.05，#P＜0.01

表2　對照組及觀察組LDH同功酶活性［IU/L，（±s）］

表2　對照組及觀察組LDH同功酶活性［IU/L，（±s）］

注：與對照組比較，*P＜0.05

組別nLDH1LDH2LDH3LDH4LDH5觀察組8030.02±5.42*33.81±4.0220.15±4.289.57±3.127.65±2.10對照組8031.08±5.1634.30±4.8320.98±5.029.81±2.026.76±1.49

3　討論

據(jù)相關(guān)資料統(tǒng)計(jì)，＞55歲人群中約有30%曾患過或正患有此?。?］，年輕人群較少受此疾病困擾；但隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏加快、工作壓力加大及生活工作習(xí)慣的改變，近年來頸椎病發(fā)病情況已經(jīng)有明顯年輕化趨勢。尤其是近20年來，由于電腦、手機(jī)及網(wǎng)絡(luò)的普及，埋（低）頭于電腦、網(wǎng)絡(luò)和游戲的低頭族人群日益增多，且年輕化與職業(yè)化，從而使頸椎病的初發(fā)年齡提前10年左右，統(tǒng)計(jì)數(shù)字顯示上海市既往大學(xué)生頸椎病發(fā)生率僅占1%左右，而2013年的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，發(fā)生率已＞25%［6］，頸椎病目前在臨床上可分為5型，即頸型頸椎病、神經(jīng)根型頸椎病、椎動(dòng)脈型頸椎病、交感型以及混合型頸椎?。?］。其中頸型頸椎病臨床上最為常見，也是最早期的頸椎病，同時(shí)還是其他頸椎病共同的早期表現(xiàn)。其主要以頸部癥狀為主，多表現(xiàn)為頸、肩、枕部不適，如酸痛、脹麻等感覺異常，并伴有局部的壓痛點(diǎn)和（或）頸部呈僵直狀，導(dǎo)致頸部屈、伸及轉(zhuǎn)頭活動(dòng)受限，嚴(yán)重時(shí)甚至出現(xiàn)斜頸姿勢，亦可伴有頭暈癥狀。影像學(xué)檢查可正?；騼H有生理曲度改變或輕度椎間隙狹窄，少有骨贅形成。上述的頸椎病中的年輕群體，多為頸型頸椎病。所以，臨床醫(yī)生要加大對頸型頸椎病的關(guān)注程度。

頸椎周圍肌肉豐富，約有30余條肌肉組成肌群，與頸椎一起擔(dān)負(fù)支撐頭顱重量的作用，同時(shí)保護(hù)頸部的神經(jīng)血管，維持頭頸的靜態(tài)與動(dòng)態(tài)平衡。不過由于頸周肌群肌組織相對單薄，肌力小、耐力差，易發(fā)生疲勞及勞損，尤其不能長時(shí)間超負(fù)荷工作［8］。頸周肌群勞損后會(huì)出現(xiàn)局部肌肉組織腫脹、僵硬，從而出現(xiàn)頸型頸椎病的一系列臨床癥狀。

CK在人體內(nèi)主要分布于骨骼肌和心肌，在腦組織和平滑肌等組織中僅有少量存在，不同的臨床改變同工酶指標(biāo)即有不同的變化，單純根據(jù)總酶系的指標(biāo)升高難以判斷為何種組織受損及其受損程度，要結(jié)合具體病史、臨床表現(xiàn)及有關(guān)檢查綜合判斷，CK有三種主要的同工酶，即 CK-MM（肌型）、CK-MB（心肌型）、CK-BB（腦型），骨骼肌主要含有的CK-MM，是肌細(xì)胞中能量代謝的關(guān)鍵酶之一，當(dāng)骨骼肌組織發(fā)生一定程度的損傷，肌細(xì)胞膜通透性增加，血液中CK的水平會(huì)發(fā)生相應(yīng)變化，正常人血清中 MM亞型為MM1、MM2和MM3，其中以MM1為主，而當(dāng)肌肉組織損傷時(shí)肌細(xì)胞膜通透性增加，CK-MM3釋放入血增多，入血后的CK-MM3經(jīng)過化學(xué)修飾作用，即產(chǎn)生中間型CK-MM2和血液型的CK-MM1，而且這種轉(zhuǎn)變是不可逆轉(zhuǎn)的。所以，CK-MM3/CK-MM1值更能反映骨骼肌組織新釋放的CK-MM成分變化，比總酶活力更靈敏，能更早地反映肌肉損傷后酶釋放的狀況。LDH是糖元無氧酵解代謝途徑的關(guān)鍵酶，含有5種同功酶，實(shí)驗(yàn)室按照電泳速度不同，自陽極至陰極排列，分別為LDH1-LDH5。這五種同功酶在不同組織細(xì)胞中的分布不同，形成了不同組織細(xì)胞中的不同酶譜，基于此，LDH同功酶水平的改變對特定部位損傷情況的判斷發(fā)揮一定的輔助作用，以往的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，家兔在靜態(tài)負(fù)荷一定時(shí)間后，血清中LDH顯著升高，說明靜態(tài)負(fù)荷時(shí)骨骼肌的代謝增強(qiáng)，通過LDH的增加，來提高骨骼肌的無氧酵解水平，證明其骨骼肌發(fā)生了損傷性變化。但本實(shí)驗(yàn)觀察組和對照組血清LDH分析表明，LDH5指標(biāo)雖有增加，但差異不明顯?？紤]因?yàn)長DH是一個(gè)多臟器分布的同功酶，LDH5在人的血清中的比例較小，因此，影響的因素較多，僅具有參考作用。

［1］Lin Q,Zhou X,Wang X,et al.A comparison of anterior cervical discectomy and corpectomy in patients with multilevel cervical spondylotic myelopathy .Eur Spine J,2012,21(3):474-481.

［2］Nagamoto Y, Ishii T, Sakaura H, et al. Invivo three-dimensional kinematics of the cervical spine during head rotation in patients with cervical spondylosis.Spine,2011,36(10):778-783.

［3］賈連順.頸椎病的現(xiàn)代概念.脊柱外科雜志,2004,2(2):123-126.

［4］國家中醫(yī)藥管理局.中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn).南京:南京大學(xué)出版社,1994:186.

［5］李增春,陳德玉,吳德升,等.第三屆全國頸椎病專題座談會(huì)紀(jì)要.中華外科雜志,2008,46(23):1796-1799.

［6］趙定麟.頸椎病之我見.中國骨與關(guān)節(jié)雜志,2015,8(4):594-601.

［7］賈連順.頸椎病的診斷學(xué)基礎(chǔ).脊柱外科雜志,2004,2(3):187-189.

［8］王永紅,段俊峰,寧俊忠.頸肌與頸椎病關(guān)系淺析.頸腰病雜志,2004,25(1):46-47.

Objective To discuss levels of serum CK，CK-MM，LDH and isozyme in patients with cervical type cervical spondylopathy. Methods 80 patients with cervical type cervical spondylopathy were selected as case group and 80healthy were defined as control group. Agarose gel electrophoresis，SDS-PAGE and biochemical methods were used to assay the activities of CK，LDH and their iso-enzymes. Results Values than 1 mm CK-MM3/CK-（23.12（vigor（CK-MM1（total serum CK activity［（l54.93±58.76）IU/L］higher than that of the control group［（130.13±55.89）IU/L］，the difference was significant（P＜0.01）；observation group serum CK-MM isoenzyme activity［（46.32±5.21）IU/L］lower than that of the control group［（54.78±7.13）IU/L］（P＜0.05），CK-MM2［（33.11±5.02）U/L］and the control group［（3.13±5.43）IU/L］had no significant difference（P＞0.05），CK-MM3activity［（23.12±4.32）IU/L］higher than that of the control group［（12.78±3.32）IU/L］（P＜0.01）.The observation group（0.51±0.62）was higher than that of control group（0.22±0.19）（P＜0.01）. Observation of serum muscle isoenzyme LDH5group was higher than control group，but no significant difference（P＞0.05）.Conclusions The results showed the levels of serum CK，LDH and their iso-enzymes have changed in patients with cervical type cervical spondylopathy.It indicated serum CK activity was sensitive to muscle injury.

Cervical type cervical spondylopathy Creatine kinase（CK） Lactic dehydrogenase（LDH）

杭州市衛(wèi)生科技計(jì)劃項(xiàng)目（編號：2014B33）

311121 杭州市余杭區(qū)第二人民醫(yī)院

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。