高致病型藍耳病快速檢測技術的應用

徐建平

（新疆生產建設兵團庫爾勒第二師畜牧獸醫工作站841023）

高致病型藍耳病快速檢測技術的應用

徐建平

（新疆生產建設兵團庫爾勒第二師畜牧獸醫工作站841023）

1 高致病型藍耳病快速檢測卡簡介

1.1 檢測卡的原理

檢測卡利用抗體快速金標檢測卡法 （簡稱金標法）檢測抗體效價。金標法是在酶聯免疫吸附法基礎上發展起來的一種固相標記免疫測定新技術。其檢測原理是以微孔濾膜為載體，包被已知抗原，加入待檢標本后，經濾膜的毛細管作用，標本中抗體與膠體金結合的抗原相結合，再通過與膜上包被的抗原結合顯色而達到檢測目的。金標法的試劑為試紙條形式，即為金標試紙條。判定標準：藍耳抗體陽性≥1：40；藍耳抗體陰性＜1：40。

1.2 特點

操作簡便、特異性好、快捷迅速、易于判斷。

1.3 檢測卡使用說明

（1）檢測卡在夏天、冬天都可使用，但為加快檢測速度，建議使用4000轉的簡易離心機快速析出血清，使整個檢測過程在5～10min完成。

（2）說明：只用于防疫的監督檢查、檢疫的監督檢查，免疫自查，不作為免疫抗體結果的最終結論。

2 藍耳病檢測卡檢測母源抗體

（1）試劑：所用疫苗：豬藍耳疫苗 （NVDC-JXA1株）吉林和元生物工程股份有限公司生產，批號：20131213；疫苗使用方法藍耳1～2頭份。

（2）采用檢測卡 （金標法）在農牧團場，選取免疫效價合格的母豬所產的仔豬為試驗對象。隨機抽檢在21日齡斷奶的6窩仔豬，每窩仔豬抽檢采血4～6頭，共31頭仔豬。以剛出生沒有吃上初乳為0日齡，第2天為1日齡，以此類推。可以看出幼畜在未吃初乳前，體內基本沒有抗體，吃過初乳后，抗體迅速上升，隨著日齡的增加，抗體效價呈明顯的線性下降之勢。

（3）仔豬藍耳母源抗體合格率，在0日齡為零，在25日齡達到最高，到40日齡是降到合格以下，所以在40日齡就可以作為豬藍耳首免日齡。母源抗體檢測結果見圖1。

3 藍耳病檢測卡檢測免疫效價

（1）在農牧團場豬場，采用檢測卡對仔豬進行藍耳的免疫，采用檢測卡查看首免、二免、三免測定抗體效價。

（2）單獨注射藍耳疫苗，每次注射間隔15d，檢測52頭仔豬，免疫15d后采血樣。免疫合格率，在首免時效果不理想，二免效果較好，三免最好。但采用spss軟件分析第2次和第3次差異也不顯著，免疫效價檢測結果見圖2。

（3）結果。注射一次疫苗效果較差，免疫合格只在20～30%左右。2次免疫效果可以達到合格水平，3次免疫比2次效果好，但差異不顯著。故一種疫苗至少免疫2次。

4 討論

檢測卡具有使用簡單、快捷、準確、易于操作、夏天、冬天都可使用的特性，且在動物防疫工作中的免疫自查、檢疫、監督工作上都可使用，其應用前景廣闊，值得推廣應用。

圖1 母源抗體檢測結果

圖2 免疫效價檢測結果

新疆建設兵團第二師科技項目 （2013NYGG1）。