Ezrin蛋白在頭頸部腫瘤中的研究進展

曹鳳祥+戴德

【摘要】 Ezrin蛋白是ERM蛋白家族（Ezrin，Radixin和Moesin）中的重要成員，在介導腫瘤細胞分化、增殖、侵襲及轉移等惡性行為中發揮重要作用，是多系統惡性腫瘤發生、發展的一個關鍵因素。目前許多研究表明：頭頸部惡性腫瘤中Ezrin蛋白的表達均顯著增加，并且與其臨床TNM分期及其病理分級呈正相關。這提示Ezrin蛋白對頭頸部惡性腫瘤的診斷、判斷預后具有重要的臨床價值。

【關鍵詞】 Ezrin蛋白； 鼻咽癌； 喉癌； 食管癌； 甲狀腺乳頭狀癌

【Abstract】 Ezrin protein is ERM protein family（Ezrin，Radixin and Moesin） important member，in mediating cancer cell differentiation，proliferation，invasion and metastasis of malignant behavior plays an important role，and is multiple system malignant tumor occurrence and development of a key factor.Many studies have shown that the expression of Ezrin protein is significantly increased in multi-system malignancies and their clinical TNM staging and pathological grading are positively correlated at present.This suggests Ezrin protein diagnosis and prognosis of head and neck malignant tumor has important clinical value.

【Key words】 Ezrin protein； Nasopharyngeal carcinoma； Laryngeal carcinoma； Esophageal carcinoma； Papillary thyroid carcinoma

First-authors address：Guangdong Medical University Affiliated Hospital，Zhanjiang 524000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.30.041

ERM家族蛋白質是近年來發現的膜細胞骨架連接蛋白質，是4.1蛋白超家族的一部分，分布于細胞間、卵裂溝及微絨毛集中的地方和胞膜波動處[1-2]；ERM家族蛋白一方面參與調節多種細胞過程包括肌動蛋白細胞骨架重組、細胞生存、運動、遷移、黏附和膜突變，另一方面扮演著細胞內支架的重要角色，參與細胞內和細胞外間的信號轉導及與其他膜磷脂相互作用[3-4]。腫瘤的浸潤與轉移是多系統、多步驟和多因素作用的結果，大多數腫瘤患者死于遠處轉移，隨著分子生物學研究的進展，Ezrin蛋白與多種人類腫瘤的惡性進展密切相關。本文就Ezrin蛋白在頭頸部腫瘤中的研究進展予以綜述。

1 Ezrin蛋白概述

Ezrin蛋白是ERM蛋白家族中的一個重要信號分子，分子長度為585個氨基酸，主要調節細胞生存、黏附、遷移和入侵；Ezrin蛋白作為膜細胞肌動骨架連接蛋白通過大量的生長因子CD44、CD46受體和細胞黏附分子ICAM-1等促進信號轉導[5]；例如在乳腺癌，Ezrin蛋白原本位于正常細胞頂端結構被轉移至異常定位的細胞膜和細胞質上，導致上皮間充質轉化使細胞失去正常分化，導致腫瘤的發生發展[6]。Ezrin是由Bretscher在1983年于雞的小腸上皮細胞刷狀緣內首次純化出來并命名的，識別關鍵的調控分子對于了解惡性腫瘤的播散轉移干預措施至關重要，Ezrin蛋白作為一個渠道之間的信號轉移相關細胞表面分子和信號轉導的組件首先在骨肉瘤及橫紋肌肉瘤中發現的[7-8]。這表明，Ezrin蛋白在ERM家族對于調節惡性腫瘤轉移和預后方面起到關鍵性的作用。

2 Ezrin蛋白的生物學功能

2.1 Ezrin蛋白參與腫瘤轉移的細胞信號轉導通路 （1）Rho途徑：磷酸化后的Ezrin蛋白發生構像轉變，Rho的信號通路被激活，研究已經證明，Rho信號通路的轉導對于腫瘤的轉移起到重要作用。Chen等[9]發現，阻斷Rho通路激酶介導的Ezrin蛋白的磷酸化可以降低肝臟腫瘤的轉移；（2）P13-K/Akt通路：即磷脂酰肌醇3激酶（Phos-phoinositide 3-kinase，P13K）/蛋白質絲、蘇氨酸激酶（Akt）通路，該通路的信號轉導可以控制細胞的存活[10]。P13K通路調節細胞的增殖和轉化，它在磷脂酰肌醇的肌醇環第3位加磷酸產生磷脂酰肌醇3，4二磷酸，而Akt作為后者的效應分子，其N端的PH區（pleekstrin domain）可與磷脂酰肌醇結合，激活Akt而起到抑制細胞凋亡的作用，促進腫瘤的轉移。

2.2 Ezrin蛋白參與細胞黏附及細胞骨架連接 腫瘤發生遠處轉移定植靶器官的過程中還需要細胞膜黏附和細胞骨架蛋白發揮作用。Ezrin蛋白一方面可以通過橋接細胞膜蛋白和細胞骨架蛋白（主要為肌動蛋白），從而調節細胞的遷移和分化；另一方面在與腫瘤細胞的作用過程中，Ezrin蛋白還可以通過與腫瘤表面直接接觸后作用于其表面的黏附因子，進一步影響腫瘤的分化、侵襲性及轉移[11-12]。

3 Ezrin蛋白與頭頸部腫瘤

3.1 Ezrin蛋白與鼻咽癌 鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是一類在東南亞及我國南方尤其是珠江流域地區最為多發的頭頸部鼻咽黏膜惡性腫瘤。該病具有惡性程度高、侵襲力強、轉移率高、臨床癥狀復雜、漏誤診率高等特點。大多數鼻咽癌患者在治療后出現復發和遠處轉移，有文獻報道Ezrin蛋白在鼻咽癌的高表達量與鼻咽癌的淋巴結轉移率方面成正相關，如Wang等[13]發現Ezrin蛋白表達與鼻咽癌患者的臨床病理特點、疾病進展的時間和總存活率相關，表明Ezrin蛋白對疾病的轉歸和預后顯著相關，可能參與腫瘤的發生發展和侵襲；張艷平等[14]通過對比來自鼻咽癌和慢性鼻咽炎患者鼻咽組織中Ezrin蛋白的表達情況，結果顯示在鼻咽癌患者的鼻咽組織細胞膜和胞漿中均呈現Ezrin蛋白的顯著陽性表達，這表明Ezrin蛋白的表達與鼻咽癌的發病明顯相關。臨床可將Ezrin蛋白作為一項重要的鼻咽癌腫瘤發生標志物，通過檢測Ezrin蛋白在鼻咽組織中的表達來早期診斷鼻咽癌的發病和判斷其預后效果，并可進一步研發基于Ezrin蛋白的抗腫瘤藥物，對臨床預防和治療鼻咽癌具有重要意義。

3.2 Ezrin蛋白與喉癌 喉癌大部分起源于喉上皮組織，它在中國的北方地區頭頸部腫瘤發病率中位居第二，浸潤和轉移是影響其預后的主要原因[15]。Gao等[16]通過Western blotting、反轉錄-多聚酶聯反應和免疫組織化學法檢測喉鱗癌組織及相鄰的非癌喉組織中的Ezrin蛋白的表達，結果顯示喉鱗癌組織Ezrin的蛋白和mRNA水平較正常喉組織中高，其石蠟包埋的喉鱗癌標本中Ezrin蛋白的表達也明顯增高，比較差異有統計學意義，該研究也發現Ezrin蛋白還在≥60歲組及T3+T4組中表達增強。同時，Wang等[17]以同樣的方法檢測喉癌組織、鄰近正常組織及頸部轉移性淋巴結中Ezrin蛋白的表達情況，結果證明Ezrin蛋白在三者中的表達顯著不同，喉癌組織表達明顯高于癌旁鄰近正常組織，頸部轉移淋巴結表達也明顯高于喉癌組織，這證明Ezrin蛋白表達明顯與TNM分期、浸潤深度及頸部淋巴結轉移相關。以上足以證明Ezrin蛋白不僅是一種癌基因，而且Ezrin蛋白高表達與喉鱗癌的入侵和轉移相關，Ezrin蛋白在喉癌患者的預后和治療中可能是重要的分子標記物。

Ezrin促進喉癌發生與發展的機制如下：細胞骨架調節腫瘤細胞的運動及細胞間、細胞與細胞外基質間的黏附，參與胞內及胞外信號轉導通路（TGF-B通路、MARK通路、Twist通路）及上皮間質轉化，接受生長因子、轉錄因子和miRNAs的調控[18-19]。Ezrin蛋白在多種上皮腫瘤中呈陽性表達，表明Ezrin蛋白在促進喉鱗癌侵襲和轉移的過程中表達量持續增高[20]。

3.3 Ezrin蛋白與食管癌 食管鱗狀細胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）是一種常見的食道癌，其預后不良主要是由于轉移。目前的分期不足以準確預測ESCC的臨床結果并確定治療方案，因此，識別ESCC高危患者和改善總體疾病的預后是當前臨床研究的迫切需求[21]。但目前通過Ezrin蛋白調節細胞與基質之間黏附分子和信號轉導作用，在細胞周期中對ESCC進展、入侵和轉移研究進行總結。該實驗利用原位雜交和免疫組化法檢測Ezrin蛋白在食管鱗狀細胞癌的表達，結果顯示Ezrin蛋白的表達水平在食管鱗癌和癌旁正常上皮組織在統計學上是不同的。在上皮組織中，Ezrin蛋白在棘細胞和多核細胞中高度表達，并在基底細胞弱表達或缺失；在癌癥組織，Ezrin表達主要是在相鄰細胞膜的細胞質中，在細胞膜上很少表達[22]。該研究表明Ezrin蛋白表達與ESCC侵襲和淋巴結轉移相關，而與患者年齡、性別、腫瘤大小及分化程度無關。因此，Ezrin蛋白表達的檢測可用于確定ESCC的早期預后。

3.4 Ezrin蛋白與甲狀腺乳頭狀癌 甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinomas，PTC）是甲狀腺癌中最常見的一種，整體治療效果和預后較好，但由于大部分患者晚期出現頸淋巴結轉移，嚴重影響預后[23]。Liu等[24]采用免疫組織化學SP法，分析Ezrin蛋白在甲狀腺乳頭狀癌和癌旁正常組織中的表達。結果表明，Ezrin蛋白在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達顯著高于鄰近正常組織，并且Ezrin蛋白的表達與患者的入侵、淋巴結轉移及TNM分期有關，說明Ezrin蛋白的表達可能成為甲狀腺乳頭狀癌的入侵、轉移和預后的重要指標。

3.5 Ezrin蛋白與頭頸部其他腫瘤 近年來研究發現，Ezrin在口腔鱗狀細胞癌、涎腺腺樣囊性癌的癌組織中表達較正常上皮組織中明顯增加，提示Ezrin蛋白可能是一種致癌基因導致頭頸部腫瘤的發生[25-26]。文獻[27]報道，Ezrin的高表達與頭頸部鱗癌的不良生存明顯相關（P=0.04），其預后作用機制是復雜的。

綜上所述，Ezrin蛋白廣泛參與頭頸部腫瘤細胞的侵襲及轉移等過程的多個環節，表明其與頭頸部腫瘤的發生發展過程密切相關。在所有真核生物中，細胞質對維持細胞的結構完整性具有重要作用，Ezrin蛋白是一類參與皮質肌動蛋白膜細胞骨架的高度同源蛋白，它在調節黏附分子和信號轉導參與腫瘤的復發和轉移扮演重要的角色。此外，頭頸部腫瘤主要以鱗狀細胞癌為主，其細胞質的異常表達與生存預后有關，有研究表明細胞質的異常定位可能導致惡性腫瘤表型入侵，但其機制還未明確，尚有待進一步闡明。未來可將Ezrin蛋白作為一種新的腫瘤生物學標記物并有望為腫瘤的基因治療和新藥物的開發找到新的突破點，為頭頸部惡性腫瘤的診斷、預防、治療及預后提供新的方法。

參考文獻

[1] Fehon R G，McClatchey A I，Bretscher A.Organizing the cell cortex：the role of ERM proteins[J].Nat Rev Mol Cell Biol，2010，11（4）：276-287.

[2] Wakayama T，Nakata H，Kurobo M，et al.Expression，localization，and binding activity of the ezrin/radixin/moesin proteins in the mouse testis[J].J Histochem Cytochem，2009，57（4）：351-362.

[3] Pore D，Gupta N.The ezrin-radixin-moesin family of proteins in the regulation of B-cell immune response[J].Crit Rev Immunol，2015，35（1）：15-31.

[4] Bretscher A，Edwards K，Fehon R G.ERM proteins and merlin：integrators at the cell cortex[J].Nat Rev Mol Cell Biol，2002，3（8）：586-599.

[5] Gavert N，Ben-Shmuel A，Lemmon V，et al.Nuclear factor-kappaB signaling and ezrin are essential for L1-mediated metastasis of colon cancer cells[J].J Cell Sci，2010，123（Pt12）：2135-2143.

[6] Sarrio D，Rodriguez-Pinilla S M，Dotor A，et al.Abnormal ezrin localization is associated with clinicopathological features in invasive breast carcinomas[J].Breast Cancer Res Treat，2006，98（1）：71-79.

[7] Bretscher A.Purification of an 80，000-dalton pmtein that is a component of the isolate microvillus cytoskeletonand Its localization in non-muscle cells[J].J cell Biol，1983，97（2）：425-432.

[8] Yu Y，Khan J，Khanna C，et al.Expression profiling identifies the cytoskeletal organizer ezrin and the developmental homeoprotein Six-1 as key metastatic regulators[J].Nat Med，2004，10（2）：175-181.

[9] Chen Y，Wang D，Guo Z，et al.Rho kinase phosphorrylation promotes Ezrin mediated metastasis in hepatocellular carcinoma[J].Cancer Res，2011，71（5）：1721-1729.

[10] Gautreau A，Poullet P，Louvard D，et al.Ezrin，a plasma mem- brane-mierofilament linker，signals cell survival through the phosphatidylinositol 3-kinase/Akt pathway[J].Proe Natl Acad Sci USA，1999，96（13）：7300-7305.

[11]屈洪波，李漢賢.Ezrin蛋白與腫瘤侵襲轉移的研究進展[J].實用癌癥雜志，2009，24（1）：93-94.

[12]歐英富，林黎娟，蔡英蘭，等.Ezrin蛋白在結腸癌組織中的表達及意義[J].山東醫藥，2011，51（43）：14-16.

[13] Wang L，Lin G N，Jiang X L，et al.Expression of ezrin correlates with poor prognosis of nasopharyngeal carcinoma[J].Tumour Biol，2011，32（4）：707-712.

[14]張艷平，李雪蘭，楊杰，等.Ezrin蛋白在鼻咽癌組織中的表達及其對鼻咽癌遠處轉移的影響[J].中國基層醫藥，2014，21（17）：2643-2645.

[15] Ji W，Guan C，Pan Z.Analysis of curative effects on laryngeal carcinoma patients in the northeast region of China[J].Acta Otolaryngol，2008，128（5）：574-577.

[16] Gao W，Zhang C，Feng Y，et al.Fascin-1，ezrin and paxillin contribute to the malignant progression and are predictors of clinical prognosis in laryngeal squamous cell carcinoma[J].Plos One，2012，7（11）：e50 710.

[17] Wang X，Liu M，Zhao C Y.Expression of ezrin and moesin related to invasion，metastasis and prognosis of laryngeal squamous cellcarcinoma[J].Genet Mol Res，2014，13（3）：8002-8013.

[18] Wu D W，Cheng Y W，Wang J，et al.Paxillin predicts survival and relapse in non-small cell lung cancer by mieroRNA-218 targeting[J].Cancer Res，2010，70（24）：10 392-10 401.

[19] Buda A，Pignatelli M.Cytoskeletal network in colon cancer：from genes to clinical application[J].Int J Biochem Cer Biol，2004，36（5）：759-765.

[20] Xie J J，Xu L Y，Xie Y M，et al.Roles of ezrin in the growth and invasiveness of esophageal squamous carcinoma cells[J].Int J Cancer，2009，124（11）：2549-2558.

[21] Jacobson B C，Hirota W，Baron T H，et al.The role of endoscopy in the assessment and treatment of esophageal cancer[J].Gastrointest Endosc，2013，77（3）：817-822.

[22] Zhai J，Wang Y，Yang F，et al.DRP-1，ezrin and E-cadherin expression and the association with esophageal squamous cell carcinoma[J].Oncol Lett，2014，8（1）：133-138.

[23] Mazzaferri E L，Massoll N.Management of papillary and Follicular（differentiated） thyroid cancer：new paradigms using recombinant human thyrotropin[J].Endcr Related Cancer，2002，9（4）：227-247.

[24] Liu C.The study of the correlation of papillary thyroid carcinomas invasion toward Ezrin and E-cadherin[J].Journal of Clinical Otorhinolaryngology，Head，and Neck Surgery，2012，26（17）：789-791，795.

[25] Martin-Villar E，Scholl F G，Gamallo C，et al.Characterization of human PA2.26 antigen （T1alpha-2，podoplanin），a small membrane mucin induced in oral squamous cell carcinomas[J].Int J Cancer，2005，113（6）：899-910.

[26]卿菁，張詮，賴非云，等.Ezrin在涎腺腺樣囊性癌組織中表達[J].中華腫瘤防治雜志，2007，14（20）：1542-1544.

[27] Madan R，Censler M.Differential tissue and subcellular expressionof ERM proteins in normal and malignant tissues：cytoplasmic ezrin expression has prognostic significance for head and neck squamous cell carcinoma[J].Head Neck，2006，28（11）：1018-1027.

（收稿日期：2016-08-05） （本文編輯：李穎）