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西寧地區(qū)農戶散養(yǎng)生豬藍耳病感染情況調查

2016-11-18 12:46:33甄森萍
獸醫(yī)導刊 2016年4期
關鍵詞:血清檢測

甄森萍

(青海省西寧市畜牧獸醫(yī)站,青海西寧 810003)

西寧地區(qū)農戶散養(yǎng)生豬藍耳病感染情況調查

甄森萍

(青海省西寧市畜牧獸醫(yī)站,青海西寧 810003)

應用 ELISA試劑診斷盒對西寧市郊的160份生豬血清,進行了PRRS的血清抗體檢測,共檢出陽性血清7份。

豬藍耳病;酶聯(lián)免疫吸附試驗

豬藍耳病(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的豬的一種高度接觸性傳染病,不同年齡、品種和性別的豬均能感染,但以妊娠母豬和1月齡以內的仔豬最易感;該病以母豬流產、死胎、弱胎、木乃伊胎以及仔豬呼吸困難、敗血癥、高死亡率等為主要特征。1992年國際獸醫(yī)組織將其定為B類傳染病。該病1987年首先在美國報道,其后在德國、加拿大、日本和荷蘭等發(fā)達國家相繼報道。1996年郭寶清等專家首次從國內發(fā)病豬群中分離出PRRSV,從而證實我國存在本病[1],1997年以后有青海省發(fā)現(xiàn)本病的報道[2],[3]。為了更加詳細了解PRRS在西寧市的最新感染情況,我們于2015年9月對農戶散養(yǎng)生豬進行了PRRS 的血清學調查,現(xiàn)報告如下:

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 檢測樣品 隨機從西寧市郊農戶散養(yǎng)生豬采集血液160份,分離血清,置于4℃冰箱備用,采集生豬均沒有注射豬藍耳病疫苗。

1.1.2 ELISA試劑盒 美國IDEXX公司生產,購自上海羅曼動物保健公司。

1.2 方法

(1)將待檢血清用稀釋液40倍稀釋,取100μl加于酶標板的病毒(PRRSV)包被孔和正常宿主細胞(NHC)對照孔中,同時做2份陽性對照和1份陰性對照,室溫孵化30min。

(2)棄去酶標板中的溶液,每孔加300μl洗滌液洗滌3~5次,每次靜置2~3min,最后一次用吸水紙拍干。

(3)每孔加酶標二抗100μl,室溫孵化30min。

(4)重復(2)步驟,每孔加底物溶液100μl,室溫孵化15min。

(5)每孔加終止液100μl終止反應,用酶標儀測定OD650值。

1.3 結果判定

檢測結果若出現(xiàn)陽性對照PRRS孔OD值與陰性對照PRRS孔OD值之差≥0.15,陽性對照NHC孔OD值≤0.12,陰性對照NHC孔OD值≤0.25者,判定為有效,否則判結果無效,必須重做。PRRS抗體的檢測結果根據樣品與陽性對照的比值S/P計算:

當S/P≥0.40時被檢樣品判為陽性;當S/P< 0.40時被檢樣品判為陰性。

2 檢測結果

整個調查共采血160份,檢出陽性結果7份,陽性率為4.38%。

3 小結與討論

(1)本次結果顯示,PRRS感染的陽性率為4.38%,低于王生祥[2]、馬利青[3]的報道,這與當時豬藍耳病流行有關。

(2)目前,國內外診斷PRRS常用的血清學方法較多,有間接熒光抗體試驗(IFA)、免疫過氧化物酶單層試驗(IPMA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、血清中和試驗(SN)[4]。本試驗選用IDEXX公司的ELISA試劑盒進行檢測,該方法用正常細胞培養(yǎng)物包被孔作為對照,血清作40倍稀釋,減少了血清與細胞成分間的非特異性反應,降低了試驗誤差,提高了準確度,所測結果穩(wěn)定,重復性好,操作簡單快速,可用于大規(guī)模血樣檢測。

(3)豬藍耳病的傳播常發(fā)生于豬只之間的密切接觸,因此豬只移動成為最主要的傳播方式。加強對調運生豬的監(jiān)管,嚴格執(zhí)行生豬運輸的報檢制度,這些措施對控制本病的流行和傳播具有十分重要的意義。

(4)由于散養(yǎng)農戶的仔豬來源主要是外地販運仔豬,并且飼養(yǎng)管理較差,因此,大力發(fā)展母豬養(yǎng)殖,提高生豬自販自育水平,加強飼養(yǎng)管理,也是防治本病流行的重要途徑之一。

(5)目前疫苗注射仍然是防治本病的最重要的手段之一,因此,在生豬飼養(yǎng)的各個環(huán)節(jié)注重疫苗免疫注射,注意注射方法和注射劑量,確保免疫抗體達到保護水平,對控制和凈化豬藍耳病病具有決定性的意義。

[1] 郭寶清,陳章水,劉文興,等.應用間接血凝法從國內生殖障礙綜合征豬群中測定生殖和呼吸系統(tǒng)綜合征抗體的研究[J].中國獸醫(yī)科技,1996,26(30):3-5.

[2] 王生祥,王裕敦,許丙根,等.用ELISA檢測豬生殖和呼吸綜合征血清抗體[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志,1997,27(6):20-21.

[3] 馬利青.豬繁殖與呼吸綜合征的血清學調查[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志,2000,30(4):29.

[4] 朵紅.豬生殖和呼吸系統(tǒng)綜合征診斷技術研究進展[J].青海畜牧獸醫(yī)雜志,2003,33(5):47-48.

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