合并高脂血癥的胃癌患者PGE2 VEGF表達水平和臨床病理特征的相關研究

張驁 劉嘉 黃飛 周揚 李衛東 付蔚華 劉彤

·臨床研究與應用·

合并高脂血癥的胃癌患者PGE2 VEGF表達水平和臨床病理特征的相關研究

張驁 劉嘉 黃飛 周揚 李衛東 付蔚華 劉彤

目的：比較合并高脂血癥的胃癌患者與未合并高脂血癥患者的血清前列腺素E2（ptodyshlsnfin E2，PGE2）、血清血管內皮生長因子（voscular endothelial growth factor，VEGF）水平、胃癌組織VEGF表達水平和腫瘤臨床病理特征的差異，探討高脂血癥對胃癌進展的影響。方法：將全部天津醫科大學總醫院2014年3月至2014年12月102例胃癌患者分為兩組，合并高脂血癥患者組49例，不合并高脂血癥患者組53例。應用酶聯免疫吸附測定法及免疫組織化學法測定102例胃癌患者血清PGE2、VEGF的濃度及腫瘤組織中VEGF的表達水平。結果：與不合并高脂血癥的患者相比，合并高脂血癥的胃癌患者，其血清PGE2、VEGF濃度以及胃癌組織中VEGF的表達水平均有明顯升高（P＜0.05）；且胃癌組織分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移枚數、TNM分期差異均具有統計學意義（P＜0.05）。結論：合并高脂血癥的胃癌患者可能通過上調PGE2和VEGF的表達促進胃癌的進展。

胃癌高脂血癥前列腺素E2血管內皮生長因子臨床病理特征

胃癌是全球范圍內第4大常見惡性腫瘤，死亡率在惡性腫瘤中排名第3位［1］。隨著生活水平的提高，我國高脂血癥的患病率也在不斷攀升［2］，作為一種基礎疾病，在胃癌患者中同時合并有高脂血癥者存在相當大的比例。已有諸多報道發現高脂血癥與多種惡性腫瘤具有一定關系。

血管生成是促進腫瘤進展的重要機制之一。作為與血管生成密切相關的重要因子，血清血管內皮生長因子（voscular endothelial growth factor，VEGF）與血脂水平有著密切關系［3］。此外，高脂血癥會損傷血管內皮引起內皮細胞功能障礙并導致動脈硬化，這項病理過程會引起包括前列腺素E2（ptodyshlsnfin E2，PGE2）在內的多種炎性因子水平的變化。因此，本研究收集102例進展期胃癌病例初步觀察高脂血癥對胃癌的影響，并通過分析患者血清PGE2、VEGF表達水平研究其可能的影響機制。

1 材料與方法

1.1病例資料

收集2014年3月至2014年12月天津醫科大學總醫院普通外科收治的胃癌手術病例，排除晚期復發轉移及無法手術治療的患者，最終納入102例。所有患者術前均行胃鏡檢查并取活檢經病理證實，且未接受針對胃癌的一切相關治療。其中男性50例，女性52例，年齡為31～82歲，中位年齡為61.6歲。根據《中國成人血脂異常防治指南》［4］分為兩組，合并高脂血癥患者組49例，未合并高脂血癥患者組53例。高脂血癥組入選標準為近期2次空腹血清總膽固醇（TC）≥5.18 mmol/L或甘油三酯（TG）≥1.7 mmol/L或低密度脂蛋白膽固醇≥3.37 mmol/L或高密度脂蛋白膽固醇≤1.04 mmol/L。TNM分期標準采用2010年國際抗癌聯盟、美國癌癥聯合委員會標準［5］，根據術后病理，Ⅰ期9例、Ⅱ期31例、Ⅲ期56例、Ⅳ期6例。

1.2方法

1.2.1實驗方法取患者術前外周靜脈血，取血前避免高脂高蛋白飲食，空腹12 h。以酶聯免疫吸附法測定外周血清PGE2及VEGF含量。PGE2 ELISA檢測試劑盒購自美國CUSABIO公司、VEGF ELISA檢測試劑盒購自武漢博士德公司。

1.2.2結果判定標準標本經35%甲醛水溶液固定，石蠟包埋，4 μm厚連續切片，應用免疫組織化學法檢測腫瘤組織切片中的VEGF分子表達情況，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。兔抗人VEGF抗體、SABC羊抗兔免疫組化試劑盒、DAB顯色試劑盒購自武漢博士德公司。判讀方法根據文獻報道的評分標準［6］：無細胞陽性率為0分；≤25%為1分；26%～50%為2分；51%～75%為3分；＞75%為4分。染色強度：無色為0分；淡黃色為1分；棕黃色為2分；棕褐色為3分。將兩部分得分相加，最高總計7分。0～3分為低表達，4～7分為高表達。

1.3統計學分析

應用SPSS 19.0軟件進行統計學分析。計量資料統計描述采用±s，組間比較采用t檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析及Spearman等級相關性分析。以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1高脂血癥組與非高脂血癥組PGE2和VEGF的表達水平的比較

高脂血癥組外周血清PGE2水平、VEGF水平分別為（28.27±4.25）pg/mL、（274.4±19.4）pg/mL，非高脂血癥組外周血清PGE2水平、VEGF水平分別為（20.44±3.69）pg/mL、（206.3±22.8）pg/mL，兩組間差異具有統計學意義（P＜0.001）；高脂血癥組胃癌組織VEGF高表達者占75.51%（37/49），非高脂血癥組胃癌組織VEGF高表達者占28.30%（15/53），二者間差異具有統計學意義（P＜0.001，表1）。

2.2血脂水平、血清PGE2、血清VEGF之間表達水平的相關性分析

Pearson相關分析發現，血清PGE2與VEGF的表達呈正相關（r=0.62，P＜0.001）；患者TC水平與血清PGE2及VEGF水平呈正相關，分別為（r=0.581，P＜0.001）和（r= 0.574，P＜0.001）；TG水平與血清PGE2及VEGF水平呈正相關，分別為（r=0.494，P＜0.001）和（r=0.348，P=0.005）；低密度脂蛋白（LDL）水平與血清PGE2及VEGF水平呈正相關，分別為（r=0.501，P＜0.001）和（r=0.336，P=0.007），高密度脂蛋白水平與血清PGE2及VEGF水平無顯著相關性，分別為（r=0.199，P=0.116）和（r=0.235，P=0.062）。

2.3血清與胃癌組織VEGF的表達水平相關性分析

胃癌組織VEGF高表達患者外周血清VEGF濃度為（258.3±44.0）pg/mL，胃癌組織VEGF低表達患者外周血清VEGF濃度為（218.6±41.5）pg/mL，由Spearman等級相關分析可知血清VEGF濃度與癌組織VEGF表達水平呈正相關（r=0.418，P=0.001）。

2.4高脂血癥組與非高脂血癥組臨床病理資料比較

高脂血癥組和非高脂血癥組在性別、年齡、腫瘤位置及腫瘤長徑的差異無統計學意義（P＞0.05）；在腫瘤組織分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移枚數及TNM分期，差異具有統計學意義（P＜0.05），合并高脂血癥患者腫瘤的組織分化程度更低、浸潤深度更深、淋巴結轉移枚數更多、TMN分期更晚（表2）。

表1　高脂血癥組與非高脂血癥組PGE2、VEGF血清濃度及組織VEGF表達水平比較Table 1Relationship between hyperlipidemia and PGE2 and VEGF expression levels

表2　高脂血癥組與非高脂血癥組的臨床病理資料比較Table 2Difference in the clinicopathological characteristics in the hyperlipidemia and normal lipidemia groups

圖2　非高脂血癥組腫瘤組織中VEGF低表達，胞漿內可見少量棕色顆粒（SABC×200）Figure 2Hyperlipidemia group with low VEGF expression in tumor tissue of a small number of brown granules，as seen in the cytoplasm（SABC method，×200）

3 討論

高脂血癥作為一種常見的基礎疾病，其對惡性腫瘤的影響在近年來越來越受到關注。有研究發現高脂血癥與乳腺癌、前列腺癌以及結腸癌等的發生發展具有一定關系［7-9］，如通過影響雌激素或雄激素水平而增加患乳腺癌及前列腺癌的風險，以及促進膽汁酸的合成而增加患結腸癌的風險。迄今為止亦有少數研究發現高脂血癥與胃癌的進展有關。Kitayama等［10］在2004年報道高脂血癥與早期胃癌淋巴結轉移呈正相關，并在后續的研究中發現高脂血癥對胃腸道惡性腫瘤的生長、轉移具有促進作用，但只于其機制的研究少見報道。本研究收集的病例研究顯示合并高脂血癥的胃癌患者的病理表現出的分化程度、浸潤深度和淋巴結轉移枚數相較于不合并高脂血癥的患者更不樂觀，所以本研究進一步檢測了患者的其PGE2和VEGF的表達情況，以研究其可能的影響。

本研究結果顯示TC、TG以及LDL與血管內皮損傷密切相關的指標與患者血清PGE2及VEGF水平均有顯著的相關性。血管內皮的損傷是高脂血癥最重要的病理過程，增多的氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）在造成血管內皮損傷的過程中上調單核細胞磷脂酶活動，使花生四烯酸釋放并被環氧化酶-2（COX-2）代謝二生成更多的PGE2［11］。有研究發現在細胞水平上PGE2的濃度升高會引起VEGF的顯著增多，在上皮細胞中通過激活ERK2/JNK1信號轉導通路上調VEGF mRNA和蛋白表達［12］。VEGF是腫瘤進展過程中的重要因子，VEGF會促進血管、淋巴管形成，為胃癌的生長和轉移提供條件［13-14］。而PGE2本身也被發現會顯著地限制T淋巴細胞的細胞因子分泌功能，減弱CD8+T細胞的抗腫瘤作用并減弱CD4+T細胞介導的免疫反應從而加速腫瘤生長［15］。本研究中，高脂血癥組PGE2及VEGF表達水平均與非高脂血癥組有著明顯的升高，因此高脂血癥可能在促進PGE2表達的同時間接促進VEGF的生成，最終在PGE2抑制T細胞抗腫瘤作用及VEGF促進新生血管生成的共同作用下導致胃癌的生長及轉移。

降脂藥物如他汀類或依替米貝均被發現了有降低血膽固醇水平并抑制腫瘤血管生成的作用［16-17］，這些研究結果在一定程度上也可運用本研究中的機制來解釋。因此，本研究認為對于罹患胃癌的患者，血脂水平在一定程度上可能影響著疾病的進展。如果能夠通過降脂治療來降低血脂水平，減少高脂血癥方式引起的對PGE2和VEGF的表達影響，可以降低胃癌浸潤及轉移的風險。

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（2016-07-18收稿）

（2016-08-30修回）

（編輯：楊紅欣校對：孫喜佳）

張驁專業方向為胃腸腫瘤的診治。

E-mail：zhangao-s@hotmail.com

Association of serum PGE-2 and VEGF levels and the expression of VEGF in gastric cancer tissue and clinicopathological features of gastric carcinoma patients with hyperlipidemia

Ao ZHANG，Jia LIU，Fei HUANG，Yang ZHOU，Weidong LI，Weihua FU，Tong LIU
Correspondence to:Tong LIU；Email:liutonga@126.com

Department of General Surgery，Tianjin Medical University General Hospital，Tianjin 300052，China

Objective:This study aims to compare the difference in the expression levels of prostaglandin E2（PGE2），vascular endothelial growth factor（VEGF），and the clinicopathological features among gastric carcinoma patients with and without hyperlipidemia and to assess whether hyperlipidemia promotes gastric carcinoma progression.Methods:We analyzed the PGE2 and VEGF serum levels and the VEGF expression in gastric carcinoma tissues in 102 gastric carcinoma patients.The PGE2 and VEGF serum levels were detected by enzyme-linked immunosorbent assay，and the VEGF expression in gastric carcinoma tissues was detected by SABC immunohistochemical staining.Results:Among the 102 gastric carcinoma patients，49 patients had hyperlipidemia，and 53 did not have the condition. The PGE2 and VEGF expressions in the serum and the VEGF expression in gastric carcinoma tissues were higher in hyperlipidemic patients than in those without hyperlipidemia（P＜0.05）.The degrees of differentiation，depths of invasion，lymph node metastasis，and TNM staging in the two groups also showed statistical differences（P＜0.05）.Conclusion:Hyperlipidemia possibly contributes to the progression of gastric carcinoma by upregulating the PGE2 and VEGF expressions.

gastric carcinoma，hyperlipidemia，prostaglandin E2，vascular endothelial growth factor，clinical pathological features

10.3969/j.issn.1000-8179.2016.19.843

天津醫科大學總醫院普通外科（天津市300052）

劉彤liutonga@126.com