冷卻豬肉中單增李斯特菌的定量暴露評(píng)估

王 凱，葉可萍，白紅武，周光宏*（南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 教育部肉品加工與質(zhì)量控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，食品安全與營(yíng)養(yǎng)協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 南京 210095）

冷卻豬肉中單增李斯特菌的定量暴露評(píng)估

王 凱，葉可萍，白紅武，周光宏*
（南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 教育部肉品加工與質(zhì)量控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，食品安全與營(yíng)養(yǎng)協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 南京 210095）

目的：建立冷卻豬肉中單增李斯特菌的暴露評(píng)估模型。方法：通過前期對(duì)某市冷卻豬肉中單增李斯特菌污染情況的調(diào)查獲取初始污染水平數(shù)據(jù)，結(jié)合建立的生長(zhǎng)模型，利用@Risk 5.5軟件，定量模擬從銷售到家庭貯藏階段冷卻豬肉中單增李斯特菌的暴露情況。結(jié)果：大約有1.2%的冷卻豬肉中單增李斯特菌超過了風(fēng)險(xiǎn)閾值4（lg（CFU/g）），但是由于其最大值達(dá)到了6.29（lg（CFU/g）），不能忽視其潛在的風(fēng)險(xiǎn)。敏感性分析結(jié)果顯示：?jiǎn)卧隼钏固鼐某跏嘉廴舅脚c最終暴露量的相關(guān)性最高，相關(guān)系數(shù)為0.90，其次是家庭貯藏 時(shí)間和家庭貯藏溫度，相關(guān)系數(shù)分別為0.34和0.21。結(jié)論：本研究可為相關(guān)部門及消費(fèi)者采取相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)管理措施提供參考。

冷卻豬肉；單增李斯特菌；暴露評(píng)估

作為食品安全的一種新模式，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是制定完善食品安全標(biāo)準(zhǔn)和解決國際食品貿(mào)易爭(zhēng)端的重要依據(jù)，有助于提高食品安全水平，改善公眾健康狀況，在食品安全管理中處于基礎(chǔ)地位[1]。暴露評(píng)估是風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的核心內(nèi)容，從微生物危害的角度來說，暴露評(píng)估是對(duì)某個(gè)個(gè)體或者群體暴露于致病菌的可能性的估計(jì)和對(duì)攝入的菌數(shù)的估計(jì)[2]。目前，國外已在各類即食食品、水產(chǎn)品、奶制品等領(lǐng)域開展了單增李斯特菌的暴露評(píng)估工作[3-5]，由于暴露評(píng)估存在較大的地區(qū)差異性，如果直接參考國外的暴露評(píng)估結(jié)果對(duì)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行分析，存在較大的局限性。我國在這方面的研究還相對(duì)較少，田靜[6]、董慶利[7]等分別對(duì)散裝熟肉制品和即食涼拌菜中的單增李斯特菌的暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估進(jìn)行了初步研究。由于污染狀況調(diào)查，生長(zhǎng)模型等數(shù)據(jù)的限制，對(duì)冷卻豬肉中單增李斯特菌的暴露評(píng)估研究尚未報(bào)道。

單核細(xì)胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes，以下簡(jiǎn)稱單增李斯特菌）是一種重要的人畜共患病原菌，廣泛分布于自然界中，是冷卻豬肉中最常見的、公共衛(wèi)生學(xué)上最重要的食源性病原菌之一。該菌可穿透腸道、血腦、胎盤三大屏障，能引起人類腹瀉、腦膜炎、敗血癥等疾患[8]，一旦感染死亡率高達(dá)30%[9-11]。易感人群主要是新生兒、孕婦及40 歲以上的成人[12]。發(fā)病高峰在夏季和冬季，潛伏期較長(zhǎng)，新生兒、孕婦、免疫缺陷患者感染后可能引發(fā)嘔吐、化膿性結(jié)膜炎、自然流產(chǎn)、敗血癥直至死亡[13]。2014年國家食源性疾病監(jiān)測(cè)工作將單增李斯特菌感染病例列為專項(xiàng)監(jiān)測(cè)內(nèi)容，根據(jù)國家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心的數(shù)據(jù)顯示，截止至2014年5月，北京市共上報(bào)3 例圍產(chǎn)期病例，山東省1 例圍產(chǎn)期病例。我國食源性疾病監(jiān)測(cè)網(wǎng)近幾年的數(shù)據(jù)顯示[14]，我國在生肉、熟肉、水產(chǎn)品等中均受到單增李斯特菌不同程度的污染。對(duì)冷卻豬肉中單增李斯特菌進(jìn)行定量暴露評(píng)估對(duì)肉品安全控制、降低居民患病風(fēng)險(xiǎn)具有重要意義。

本研究模擬了冷卻豬肉中的單增李斯特菌在銷售、運(yùn)輸、貯藏環(huán)節(jié)的變化，對(duì)其過程中會(huì)產(chǎn)生的數(shù)量變化用概率分布進(jìn)行描述，并通過敏感性分析來確定各個(gè)因素對(duì)最終風(fēng)險(xiǎn)的影響程度，為相關(guān)部門對(duì)生鮮食品中病原微生物的控制采取相應(yīng)的措施提供標(biāo)準(zhǔn)和研究基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 冷卻豬肉中單增李斯特菌的污染情況

污染資料來源于本實(shí)驗(yàn)室2014—2015年的調(diào)查數(shù)據(jù)[15]，為了使調(diào)查數(shù)據(jù)具有一定的代表意義，以隨機(jī)抽樣方式，從某市4 個(gè)大區(qū)（人口數(shù)占該市總?cè)丝?0%以上）人口密集區(qū)的大型超市及農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)采集冷卻豬肉樣品476 份，對(duì)其進(jìn)行定量檢測(cè)，獲得污染率和污染水平。定性檢驗(yàn)方法采用國標(biāo)法GB 4789.30—2010《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》結(jié)合聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）[16]的方法，定量檢測(cè)方法采用最大可能數(shù)（most probable number，MPN）法。

1.2 生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)模型

許多研究表明菌株特異性及背景微生物對(duì)建立的生長(zhǎng)模型有一定的影響[17-19]，為了最大程度模擬自然條件下冷卻豬肉中單增李斯特菌的生長(zhǎng)規(guī)律。本實(shí)驗(yàn)在背景菌存在條件下的冷卻豬肉中接種26 株肉源性單增李斯特菌分離株混合菌液，研究不同溫度（4、10、16、22、28 ℃）下單增李斯特菌的生長(zhǎng)狀況，初級(jí)模型選用Baranyi模型，采用DMFit軟件進(jìn)行擬合，在此基礎(chǔ)上采用平方根（Belehradek）模型描述溫度對(duì)單增李斯特菌生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響，并且運(yùn)用精確因子（accurate factor，Af）、偏差因子（bias factor，Bf）及均方誤差（mean squared error，MSE）等參數(shù)對(duì)模型進(jìn)行評(píng)估。

Baranyi模型是近幾年來廣泛應(yīng)用的一種模型，其既描述了微生物隨時(shí)間的變化，也描述了微生物的生理狀態(tài)和對(duì)新環(huán)境的適應(yīng)即調(diào)整函數(shù)A（t），對(duì)遲滯期的估計(jì)以及曲線的擬合較為準(zhǔn)確[20]，其表達(dá)式為：

式中：Nt為時(shí)間t時(shí)的平均菌落數(shù)（lg（CFU/mL））；N0為Nt的初始值（lg（CFU/mL））；Nmax是Nt的最大值（lg（CFU/mL））；λ為遲滯期/h；μmax為最大比生長(zhǎng)速率/（lg（CFU/mL）/h）。

平方根（Belehradek）[21]模型的表達(dá)式如下：

式中：T為培養(yǎng)溫度/℃；Tmin為指理論上微生物細(xì)胞能夠代謝的最低溫度/℃；a、b為方程常數(shù)。

1.3 暴露評(píng)估

本研究采用概率函數(shù)模擬冷卻豬肉中的單增李斯特菌從銷售、運(yùn)輸?shù)郊彝ベA藏環(huán)節(jié)的變化，運(yùn)用美國Palisade公司的@Risk 5.5軟件，采用蒙特卡洛模擬方法，對(duì)單增李斯特菌的生長(zhǎng)情況進(jìn)行評(píng)估。

1.3.1 銷售階段冷卻豬肉中單增李斯特菌的初始污染情況

1.3.1.1 冷卻豬肉中單增李斯特菌的污染率（Pp）

為了模擬微生物存在于食品中的不確定性，污染率用Beta分布的形式進(jìn)行描述，公式為Beta（s＋1, n－s＋1），其中n表示樣品總數(shù)，s表示陽性樣品數(shù)。在本研究中，樣本總數(shù)為476，陽性樣本數(shù)為26，所以描述為Beta（26, 451）。

1.3.1.2 陽性樣品中單增李斯特菌的污染率（Lp）

本研究樣本中單增李斯特菌的濃度均低于100 MPN/g，其中僅有23.1%的樣品中濃度超過10 MPN/g。用累積分布函數(shù)描述陽性樣品中單增李斯特菌的污染水平，本實(shí)驗(yàn)參照田靜[6]、姬華[22]等研究，假設(shè)MPN/g與CFU/g等同。

1.3.1.3 陰性樣品中單增李斯特菌的污染水平（Ln）

為了估計(jì)陰性樣品中單增李斯特菌的濃度，本研究采用Jarvis[23]公式計(jì)算其污染水平，表達(dá)式為：

式中：M為樣品中的真實(shí)濃度（lg（CFU/g））；Z為陰性樣品的數(shù)量/個(gè)；N為樣品的總數(shù)量/個(gè)；m為檢測(cè)時(shí)所用樣品量/g。

本研究中，檢測(cè)時(shí)用的樣品量為25 g，陰性樣品數(shù)量為450，樣品總數(shù)量為476，可以計(jì)算出陰性樣品中單增李斯特菌的未檢出濃度為－2.65（lg（CFU/g）），將其假設(shè)為平均值，用反向偏斜累積概率分布（left-hand-tailed cumulative）描述陰性試樣中單增李斯特菌的濃度[24]，則－5.46（lg（CFU/g））的最小值（l.0%）和最大值0.48（lg（CFU/g））（99.0%）可以表示陰性樣品中單增李斯特菌實(shí)際濃度的不確定性。

1.3.1.4 冷卻豬肉中單增李斯特菌的污染水平（N0）

用離散函數(shù)描述冷卻豬肉中單增李斯特菌的污染水平[25]，冷卻豬肉銷售時(shí)單增李斯特菌量的表達(dá)式為Discrete（Lp∶Ln, Pp∶（1－Pp））。

1.3.2 銷售至食用階段冷卻豬肉中單增李斯特菌的生長(zhǎng)

1.3.2.1 銷售階段的時(shí)間和溫度

冷卻豬肉在銷售階段的時(shí)間t1和溫度T1用Pert函數(shù)進(jìn)行描述，其最大值、最可能值和最小值結(jié)合國內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)[7,24]與實(shí)地調(diào)研情況確定。

1.3.2.2 運(yùn)輸階段的時(shí)間和溫度

冷卻豬肉從銷售點(diǎn)到消費(fèi)者家中的運(yùn)輸時(shí)間t2，按照聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織（Food and Agriculture Organization of the United Nations，F(xiàn)AO）對(duì)液態(tài)奶調(diào)查的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，應(yīng)用Normal函數(shù)描述；溫度T2采用某市2014年4—10月每月的平均最低溫度（minimun），月平均溫度（mean）和平均最高溫度（maximum）代入模型，本研究假設(shè)月平均溫度為最可能出現(xiàn)的溫度，采用Pert函數(shù)進(jìn)行描述。

1.3.2.3 家庭貯藏階段的時(shí)間和溫度

家庭貯藏時(shí)間t3通常根據(jù)市場(chǎng)調(diào)查確定，大部分家庭購買冷卻豬肉后于兩日內(nèi)食用完畢。本實(shí)驗(yàn)假設(shè)貯藏時(shí)間為0～48 h，并服從均勻分布，以Uniform函數(shù)描述；消費(fèi)者家庭貯藏溫度T2，根據(jù)GB/T 8059.2—1995《家用制冷器具 冷藏冷凍箱》中規(guī)定冰箱冷藏室的溫度范圍為0～10 ℃，而常規(guī)冰箱冷藏室的溫度為4 ℃，用Pert函數(shù)描述。

1.3.3 預(yù)測(cè)模型的選用

本研究建立的Baranyi模型來模擬冷卻豬肉中單增李斯特菌在銷售、運(yùn)輸、貯藏中的變化情況，用平方根模型用來評(píng)估溫度對(duì)單增李斯特菌生長(zhǎng)的影響，以上所有的參數(shù)設(shè)置見表1。

表1 冷卻豬肉中單增李斯特菌暴露評(píng)估模型的參數(shù)設(shè)置Table 1 Parameter settings of exposure assessment models for Listeerriiaa monocytogeenneess in chilled pork

暴露評(píng)估模型構(gòu)建完成后，運(yùn)用@Risk軟件中的蒙特卡羅取樣方法運(yùn)行迭代10 000 次，對(duì)模型的參數(shù)進(jìn)行分析，評(píng)估的結(jié)果以概率分布的形式描述。

2 結(jié)果與分析

2.1 冷卻豬肉中單增李斯特菌的污染水平

所有冷卻豬肉中單增李斯特菌的污染水平表示為Discrete（Lp∶Ln, Pp∶（1－Pp）），通過@Risk軟件進(jìn)行模擬分析后得到圖1。可以看出，冷卻豬肉中單增李斯特菌的污染水平在95%置信區(qū)間為0.48（lg（CFU/g）），說明其平均污染水平處于一個(gè)較低的范圍內(nèi)，但是仍檢測(cè)到一些較大的污染水平的值。

圖1 冷卻豬肉樣品中單增李斯特菌的初始污染水平分布Fig. 1 Probability distribution of Listeria monocytogenes initial contamination level in chilled pork

2.2 銷售至食用前階段時(shí)間和溫度的概率分布

表2 各階段時(shí)間和溫度的概率分布Table 2 Probability distribution of time and temperature in each stage

銷售至食用前階段時(shí)間和溫度的概率分布如表2所示。經(jīng)過對(duì)3 個(gè)品牌冷卻肉在銷售點(diǎn)的情況調(diào)查發(fā)現(xiàn)，冷卻豬肉在大型超市或農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)的銷售時(shí)間均不超過12 h，當(dāng)天未銷售出的豬肉將作其他處理，所以表示為Pert（2, 4, 12）。通過模擬，銷售時(shí)間在95%置信區(qū)間為8.21 h，銷售溫度在95%置信區(qū)間為5.86 ℃。可以看出，該市冷卻豬肉銷售階段的冷鏈較為完善，基本符合冷卻肉銷售的標(biāo)準(zhǔn)。消費(fèi)者購買冷卻豬肉到家中運(yùn)輸時(shí)間從0.369 h（5%置信區(qū)間）到1.751 h（95%置信區(qū)間）。運(yùn)輸溫度在95%置信區(qū)間為28.37 ℃。而冷卻豬肉在消費(fèi)者家中的貯藏時(shí)間從2.4 h（5%置信區(qū)間）到45.6 h（95%置信區(qū)間）。貯藏溫度在95%置信區(qū)間為7.54 ℃。

2.3 最終冷卻豬肉中單增李斯特菌的污染水平

由上述研究結(jié)果可知在冷卻豬肉的銷售階段單增李斯特菌初始污染水平最小值為－5.46（lg（CFU/g）），最大值為1.71（lg（CFU/g）），平均值為－2.46（lg（CFU/g））。按照表1的各項(xiàng)參數(shù)作為輸入變量，最終污染水平作為輸出變量運(yùn)行模型，最終污染水平的概率分布如圖2所示，冷卻豬肉中單增李斯特菌的最終污染水平從－5.11（lg（CFU/g））到6.29（lg（CFU/g）），平均值為－0.56（lg（CFU/g）），說明經(jīng)過銷售、運(yùn)輸、貯藏后，冷卻豬肉中單增李斯特菌的平均污染水平仍處于一個(gè)較低的范圍內(nèi)，但是由于其最大值達(dá)到了6.29（lg（CFU/g）），并且有1.2%的機(jī)率超過了限量標(biāo)準(zhǔn)（4（lg（CFU/g）））[26]，所以不能忽視其潛在的風(fēng)險(xiǎn)。

圖2 最終冷卻豬肉樣品中單增李斯特菌的污染水平分布Fig. 2 Probability distribution of Listeria monocytogenes fi nal contamination level in chilled pork

2.4 敏感性分析

敏感性分析主要用于分析模型各風(fēng)險(xiǎn)因子對(duì)模型結(jié)果的影響[27]，本研究中以Spearman等級(jí)相關(guān)系數(shù)表示（圖3），相關(guān)系數(shù)在－1和＋1之間，＋1表示正相關(guān)，－1表示負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)越接近0表示這一因子與風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性越低，反之亦然。圖中B3表示初始污染水平；B8表示家庭貯藏時(shí)間；B9表示家庭貯藏溫度；B6表示運(yùn)輸時(shí)間；B7表示運(yùn)輸溫度；B4表示銷售時(shí)間；B5表示銷售溫度。可以看出，以上變量中初始污染水平與最終暴露量的相關(guān)性最大，相關(guān)系數(shù)為0.90，這一結(jié)論與駱璇等[28]研究結(jié)果一致。其次是家庭貯藏時(shí)間和溫度，相關(guān)系數(shù)分別為0.34和0.21，銷售時(shí)間和銷售溫度對(duì)風(fēng)險(xiǎn)的影響最小，均為0.03。

圖3 冷卻豬肉中單增李斯特菌暴露評(píng)估的敏感性分析Fig. 3 Sensitivity analysis of exposure assessment for Listeria monocytogenes level in chilled pork

3 討論與結(jié)論

本研究初步構(gòu)建了某市冷卻豬肉中單增李斯特菌的暴露評(píng)估模型，根據(jù)前期實(shí)驗(yàn)及文獻(xiàn)數(shù)據(jù)、專家意見等對(duì)模型的輸入量進(jìn)行分布擬合，模擬了從銷售到家庭貯藏過程冷卻豬肉中單增李斯特菌污染水平的變化過程。由于微生物本身的特異性及其在食品等基質(zhì)中不斷變化等特點(diǎn)，導(dǎo)致對(duì)其進(jìn)行的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估必然比化學(xué)性評(píng)估更為復(fù)雜，導(dǎo)致模型存在一定的不確定性。數(shù)據(jù)方面，本研究按照FAO對(duì)液態(tài)奶調(diào)查數(shù)據(jù)描述運(yùn)輸時(shí)間，主要考慮消費(fèi)者購買這兩種產(chǎn)品后運(yùn)輸時(shí)間的相似性，均趨向于盡快回到家中進(jìn)行貯藏，盡管如此，仍無法準(zhǔn)確地進(jìn)行替代，會(huì)對(duì)評(píng)估結(jié)果造成一定的影響。預(yù)測(cè)模型方面，本研究采用的生長(zhǎng)模型是基于肉源性單增李斯特菌分離株建立的，相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)菌株，更符合自然條件下冷卻豬肉中單增李斯特菌的生長(zhǎng)，但菌株之間生長(zhǎng)特性的差異性也是導(dǎo)致模型不確定性的來源之一。此外，目前我國尚未出臺(tái)關(guān)于生鮮食品中單增李斯特菌的限量標(biāo)準(zhǔn)，故本研究選擇4（lg（CFU/g））作為風(fēng)險(xiǎn)閾值，這會(huì)導(dǎo)致模型存在一定的不確定性。

敏感性分析結(jié)果表明初始污染水平與最終暴露量的相關(guān)性最高，相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.90。因此，對(duì)李斯特菌病采取控制措施時(shí)，首先要考慮減少冷卻豬肉中單增李斯特菌的含量。政府及相關(guān)部門有必要加強(qiáng)對(duì)冷卻豬肉中單增李斯特菌污染狀況的監(jiān)管，對(duì)各大銷售點(diǎn)定期進(jìn)行檢查，對(duì)衛(wèi)生條件、銷售環(huán)境不符合標(biāo)準(zhǔn)的銷售點(diǎn)進(jìn)行治理，甚至關(guān)閉，最大程度避免消費(fèi)者購買到被污染的豬肉。銷售商家應(yīng)遵守冷卻肉銷售的規(guī)章制度，同時(shí)定期對(duì)砧板、刀具、稱量托盤等進(jìn)行清洗殺菌，避免交叉污染的發(fā)生。消費(fèi)者在購買冷卻豬肉后應(yīng)盡快食用，縮短冷藏的時(shí)間，減緩病原菌的生長(zhǎng)，降低被感染的風(fēng)險(xiǎn)。此外，應(yīng)盡快出臺(tái)食品中單增李斯特菌的限量標(biāo)準(zhǔn)，完善單增李斯特菌的監(jiān)控體系，從源頭降低消費(fèi)者攝入單增李斯特菌導(dǎo)致患病的風(fēng)險(xiǎn)。

[1] Codex Alimentarius Commission. Working Principles for analysis for Food Safety for application by governments[R]. CAC/GL62-2007.

[2] FORSYTHE S J. 食品中微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[M]. 石階平, 史賢明, 岳田利, 譯. 北京: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 2002: 23-27.

[3] ROSS T, RASMUSSEN S, FAZIL A, et al. Quantitative risk assessment of Listeria monocytogenes in ready-to-eat meats in Australia[J]. International Journal of Food Microbiology, 2009, 131(2/3): 128-137. DOI:10.1016/j.ijfoodmicro.2009.02.007.

[4] BEMRAH N, SANAA M, CASSIN M H, et al. Quantitative risk assessment of human listeriosis from consumption of soft cheese made from raw milk[J]. Preventive Veterinary Medicine, 1998, 37(1/2/3/4): 129-145. DOI:10.1016/S0167-5877(98)00112-3.

[5] LINDQVIST R, WEST?? A. Quantitative risk assessment for Listeria monocytogenes in smoked or gravad salmon and rainbow trout in Sweden[J]. International Journal of Food Microbiology, 2000, 58(3): 181-196. DOI:10.1016/S0168-1605(00)00272-5.

[6] 田靜. 熟肉制品中單增李斯特菌的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及風(fēng)險(xiǎn)管理措施的研究[D]. 北京: 中國疾病預(yù)防控制中心, 2010.

[7] 董慶利, 鄭麗敏. 即食涼拌菜中單增李斯特菌的定量暴露評(píng)估[J]. 生物加工過程, 2013, 11(5): 55-60. DOI:10.3969/ j.issn.1672-3678.2013.05.011.

[8] 張麗萍, 高濤, 張克儉, 等. 食品中單增李斯特菌檢驗(yàn)方法的應(yīng)用研究[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2014, 24(3): 366-371.

[9] VAZQUEZ-BOLAND J A, KUHN M, BERCHE P, et al. Listeria pathogenesis and molecular virulence determinants[J]. Clinical Microbiology Reviews, 2001, 14(3): 584-640. DOI:10.1128/ CMR.14.3.584-640.2001.

[10] DUSSURGET O. New insights into determinants of Listeria monocytogenes virulence[J]. International Review of Cell & Molecular Biology, 2008, 270: 1-38. DOI:10.1016/S1937-6448(08)01401-9.

[11] 杭華. IMS-PCR檢測(cè)食品中的單增李斯特菌[D]. 大連: 大連工業(yè)大學(xué), 2008: 66.

[12] 沈瑩. 單核細(xì)胞增生性李斯特菌在食品安全中的研究近況[J]. 中國熱帶醫(yī)學(xué), 2008, 8(3): 484-487. DOI:10.3969/ j.issn.1009-9727.2008.03.067.

[13] 張海英, 羅茂凰, 高旗利. 食品中單核細(xì)胞增生性李斯特氏菌的污染概況及防治[J]. 食品研究與開發(fā), 2003, 24(6): 154-156.

[14] 王燕, 梅喬昕, 袁寶君, 等. 2006－2009年江蘇省食品中食源性致病菌的監(jiān)測(cè)分析[J]. 中國食品衛(wèi)生雜志, 2010, 22(5): 431-434. DOI:10.13590/j.cjfh.2010.05.011.

[15] WANG K, YE K P, ZHU Y P, et al. Prevalence, antimicrobial resistance and genetic diversity of Listeria monocytogenes isolated from chilled pork in Nanjing, China[J]. LWT-Food Science and Technology, 2015, 64(2): 905-910. DOI:10.1016/j.lwt.2015.06.015.

[16] WU S J, CHAN A, KADO C I. Detection of PCR amplicons from bacterial pathogens using microsphere agglutination[J]. Journal of Microbiological Methods, 2004, 56(3): 395-400. DOI:10.1016/ j.mimet.2003.11.005.

[17] 董慶利. 食品預(yù)測(cè)微生物學(xué): 過去 現(xiàn)在 將來[J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊, 2009(3): 38-46. DOI:10.3969/j.issn.1671-9646-B.2009.03.009.

[18] 楊振泉, 焦新安. 不同副溶血弧菌的分子鑒別與生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)模型比較[J]. 中國人獸共患病學(xué)報(bào), 2008, 24(3): 210-215. DOI:10.3969/ j.issn.1002-2694.2008.03.006.

[19] 宋金麗, 索標(biāo), 王娜, 等. 速凍水餃中背景菌對(duì)冷凍亞致死金黃色葡萄球菌修復(fù)及檢測(cè)的影響[J]. 中國食品學(xué)報(bào), 2013, 13(12): 156-162.

[20] BARANYI J, ROBERTS T A. A dynamic approach to predicting bacterial growth in food[J]. International Journal of Food Microbiology, 1994, 23(3/4): 277-294. DOI:10.1016/0168-1605(94)90157-0.

[21] RATKOWSKY D A, OLLEY J, McMEEKIN T A, et al. Relationship between temperature and growth rate of bacterial cultures[J]. Journal of Bacteriology, 1982, 149(1): 1-5.

[22] 姬華. 對(duì)蝦中食源性弧菌預(yù)測(cè)模型構(gòu)建及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[D]. 無錫: 江南大學(xué), 2012.

[23] HARRIS L J. Sampling for microbiological analysis[EB/OL]. (2012) [2012-06-17]. http://www.postharvestquality.com/uwilectures/davis freshcut/MicrobialAnalysis.pdf.

[24] 董慶利, 高翠, 鄭麗敏, 等. 冷卻豬肉中氣單胞菌的定量暴露評(píng)估[J].食品科學(xué), 2012, 33(15): 24-27. DOI:1002-6630(2012)15-0024-04.

[25] BAHK G J, HONG C H, OH D H, et al. Modeling the level of contamination of Staphylococcus aureus in ready-to-eat kimbab in Korea[J]. Food Protect, 2006, 69(6): 1340-1346.

[26] FSANZ. Microbiological limits for foods: guide to standard 1.6.1-microbiological limits for food with additional guideline criteria[EB/OL]. (2012)[2013-06-24]. http://archive.foodstandards.gov.au/ foodstandards/userguides/microbiologicallimit1410.cfm.

[27] PERKINS N, STEVENSON M. 動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析培訓(xùn)手冊(cè)[M].王承芳, 譯. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2011: 67-69.

[28] 駱璇, 郭紅衛(wèi), 王穎, 等. 上海市豬肉中金黃色葡萄球菌定量風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J]. 中國食品衛(wèi)生雜志, 2010, 22(3): 244-249.

Quantitative Exposure Assessment of Listeria monocytogenes in Chilled Pork

WANG Kai, YE Keping, BAI Hongwu, ZHOU Guanghong*
(Collaborative Innovation Center of Food Safety and Nutrition, Key Laboratory of Meat Processing and Quality Control, Ministry of Education, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)

Objective: To establish an exposure assessment model of Listeria monocytogenes in chilled pork. Methods: In the present study, we obtained the data of L. monocytogenes initial contamination level in chilled pork from our previous survey. The mathematical models established in our previous work were employed to fi t the growth kinetics of L. monocytogenes in chilled pork. The @Risk software was applied to simulate L. monocytogenes level in chilled pork from retail to home. Results: One point two percent of chilled pork contained more than 4 (lg(CFU/g)) L. monocytogenes (risk threshold), and the maximum value reached 6.29 (lg(CFU/g)), implying that the potential risk should not be ignored. Sensitivity analysis i ndicated that initial contamination level was the main risk control factor with correlation coeffi cient of 0.90, followed by home storage time and storage temperature with correlation coefficient of 0.34 and 0.21, respectively. Conclusion: This study could provide

for consumers and stakeholders to take measures for risk management.

chilled pork; Listeria monocytogenes; exposure assessment

10.7506/spkx1002-6630-201611014

TS251.1

A

1002-6630（2016）11-0079-05

王凱, 葉可萍, 白紅武, 等. 冷卻豬肉中單增李斯特菌的定量暴露評(píng)估[J]. 食品科學(xué), 2016, 37(11): 79-83. DOI:10.7506/ spkx1002-6630-201611014. http://www.spkx.net.cn

WANG Kai, YE Keping, BAI Hongwu, et al. Quantitative exposure assessment of Listeria monocytogenes in chilled pork[J]. Food Science, 2016, 37(11): 79-83. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201611014. http://www.spkx.net.cn

2015-07-28

國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目（31401558）；中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目（KJQN201548）；國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（生豬）產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)（CARS-36-11）；“十二五”農(nóng)村領(lǐng)域國家科技計(jì)劃項(xiàng)目（2013BAD19B09）

王凱（1990—），男，碩士研究生，研究方向?yàn)槿馄焚|(zhì)量安全控制。E-mail：2013108015@njau.edu.cn

*通信作者：周光宏（1960—），男，教授，博士，研究方向?yàn)槿馄芳庸ぜ百|(zhì)量控制。E-mail：guanghong.zhou@hotmail.com