流化床包衣法制備銀耳多糖腸溶微粒

李紅月，肖旭朗，王海洋，張洪賀，徐多多，王明星，高其品，高　陽

(長春中醫藥大學 吉林省中藥大分子重點實驗室，長春 130117)

?

流化床包衣法制備銀耳多糖腸溶微粒

李紅月，肖旭朗，王海洋，張洪賀，徐多多，王明星，高其品，高陽*

(長春中醫藥大學 吉林省中藥大分子重點實驗室，長春 130117)

目的考察并優化流化床包衣法制備銀耳多糖腸溶微粒(ETPP)工藝條件。方法以Eudragit L30-D55水分散體為包衣材料，檸檬酸三乙酯為增塑劑，滑石粉為抗黏劑，同時考察包衣后微粒的累計釋放度，制備直徑小于190 μm腸溶微粒。結果載藥量為40.62%，包封率為79.29%，酸中累計釋放度小于10%，堿液中累計釋放度大于75%,制備的微粒其平均粒徑在115～190 μm之間，圓整度、堆密度、總收率均較理想。結論應用流化床包衣法制備ETPP，其工藝簡便，穩定可行，適合小鼠藥物藥理學和毒理學研究的需要和大工業生產。

銀耳多糖；銀耳多糖腸溶微粒；流化床包衣法

銀耳(Tremella fuciform Berk)是真菌類植物，其主要化學成分為多糖類化合物，具有提高機體免疫力等作用。但是該多糖口服不被吸收，基本無活性;靜脈給藥雖具有良好的作用，但其結構十分復雜，純化困難，難以進行靜脈給藥的新藥研發[1]。因此，如何提高其生物利用度，是該類藥物研發面臨的瓶頸問題。提高糖類藥物的生物利用度，首先要克服胃酸對其水解所造成的破壞。對藥物以腸溶材料保護是常用的方法。但是該方法制備的制劑因粒徑大(>40目)[2-6]，難以對小動物口服給藥，造成實驗難以進行。因此，研究制備粒徑小的腸溶微粒(球)，為藥效學、藥代動力學研究提供可行的樣品，是提高糖類藥物生物利用度研究面臨的首要問題。筆者以銀耳多糖為樣品,采用擠出滾圓制粒機制備銀耳多糖微粒[7]和流化床包衣機將微粒包衣，最終制備了粒徑小、分布均勻、包衣效果好、載藥量較高的ETPP。

1　儀器與試藥

Mini流化床制粒包衣機(深圳信宜特科技)；空氣壓縮機(上海捷豹壓縮機制造有限公司)；紫外分光光度計(上海菁華科技儀器有限公司)；標準分樣篩(北京海地清科技術服務儀器責任有限公司)；電子天平(福州華志科學儀器有限公司);恒溫磁力攪拌器(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司);檸檬酸三乙酯(東京化成工業株式會社)；恒溫恒濕振蕩器(太倉市試驗設備廠)；銀耳多糖微粒(本實驗室自制)；腸溶包衣液(Eudragit L30-D55上海昌為醫藥輔料科技有限公司),銀耳多糖微粒(平均粒徑115～190 μm之間，本實驗室自制)。

2　方法與結果

2.1微粒流化床包衣工藝研究

2.1.1銀耳多糖微粒制備對銀耳多糖微粒處方和工藝進行考察，確定其制備工藝為：載藥量為65%，稀釋劑為65%乙醇溶液，MCC為主要輔料，擠出速度為50 r/min，滾圓速度為1 500 r/min，滾圓時間為10 min，制備的微粒其平均粒徑在115～190 μm之間，以上制備的銀耳微粒進行下一步包衣[8]。

2.1.2微粒包衣工藝及處方1)微粒包衣工藝：選用流化床包衣機進行包衣[9-14]，以Eudragit L30D-55水分散體為腸溶包衣材料[15]，包衣厚度以含藥微丸增重計。取銀耳多糖微粒置于包衣機內包衣。包衣工藝條件為噴液流速為2.5 mL/min，噴氣壓力為0.2 MPa，流化溫度為33 ℃，鼓風流量為100 L/min，進風溫度為50.5 ℃，物料溫度為33.5 ℃。2)微粒包衣處方：依據銀耳多糖性質和查閱相關文獻[16]，選擇包衣液的基本處方為：Eudragit L30D-55、檸檬酸三乙酯、滑石粉、氫氧化鈉水溶液和蒸餾水。包衣液配制方法如下：Eudragit L30D-55和滑石粉分別過100目藥篩，然后將Eudragit L30D-55、檸檬酸三乙酯、氫氧化鈉水溶液和蒸餾水混勻，包衣過程中根據微粒引起靜電程度，選擇加入定量的滑石粉。制備腸溶微粒置40 ℃烘箱中老化24 h。

2.1.3包衣微粒的體外釋放度實驗1)銀耳多糖檢測波長的確定： 稱取適量銀耳多糖凍干粉、MCC和L30D-55分別用摸擬腸液溶解，于190～800 nm內進行紫外掃描。在波長276 nm處銀耳多糖有最大吸收，MCC和L30D-55無干擾，故選擇檢測波長為276 nm。2)模擬胃液和模擬腸液釋放試驗：按紫外分光光度法《中國藥典》：1部附錄IVA(2010)，在276 nm波長處測定吸光度，計算出腸溶微粒釋放度。模擬胃液作溶液的為釋放度Ⅰ，模擬腸液作溶液的為釋放度Ⅱ。

2.1.4銀耳多糖腸溶微粒釋放度考察1)標準曲線繪制 ：①模擬腸液標準曲線為:Y=7.001 4X+0.003 8 ，r=0.999 6，在0～0.1 mg/mL濃度范圍內線性良好；②同法，模擬腸液標準曲線為：Y=8.248 6X+0.009 6，r=0.996 6，在0～0.1 mg/mL濃度范圍內線性良好。2)包衣增重考察：基于本實驗室中藥微粒包衣經驗，本實驗分別考察40%、50%和60%包衣增重，依據 微粒包衣處方分別包衣，以0.1 mol/L鹽酸溶液和0.2 mol/L NaH2PO4溶液為溶劑，考察不同的ETPP酸中累計釋放度Ⅰ%、緩沖液中累計釋放度Ⅱ%。結果顯示，ETPP增重為40%、50%時,酸中累計釋放度大于10%，而60%包衣增重的ETPP酸中累計釋放度小于10%，同時堿中累計釋放度大于75%，符合藥典對腸溶制劑要求。故包衣增重為60%。結果顯示，ETPP增重為40%、50%時,酸中累計釋放度大于10%，而60%包衣增重的ETPP酸中累計釋放度小于10%，同時堿中累計釋放度大于75%，符合藥典對腸溶制劑要求。故包衣增重為60%。

2.1.5釋放度驗證試驗將制備80-120目銀耳多糖微粒，以包衣增重60%的L30D-55包衣材料流化床底噴包衣(包衣液流速3.0 r/min)，3批平行制備ETPP(批號分別為20141211、20141212、20141213)。制得的3批ETPP進行粉體學性質和體外釋放度性能評價，結果見表1。

表1　ETPP工藝和處方驗證試驗結果

由表1可見，流化床包衣法制備的微粒圓整度適宜，堆密度大，休止角合格，可用于釋放度的測定。

依據包衣最佳工藝，制備3批產品，分別測定其釋放度，酸中釋放度平均值為9.04%，堿中釋放度平均值為77.65%，同時計算3批樣品平均包封率，其包封率為79.29%，證明包衣工藝合理。

3　小結

本課題使用底噴式流化床包衣，制得ETPP質量更穩定，衣膜更均勻，釋放更均勻。流化床包衣后也可以掩蓋藥物的不良味道和減少藥物刺激性。

流化床包衣法制備ETPP圓整度、粒徑和均勻度均較好，可較好滿足以小動物進行的藥效學和藥代動力學研究要求，同時制備工藝簡單易行，在將來的新劑型研究中也有良好的應用前景。

[1]包全英,周震,平其能.鹽酸緩釋微丸的制備及釋放度研究[J].中國藥科大學學報,2008,39(2):127-131.

[2]朱澄云,車鑫,董麗娜,等.鹽酸普萘洛爾微球的制備及性能考察[J].中國藥劑學雜志,2013,11(2)：11-25.

[3]羅曉健,張國松,黃鋒榮,等.流化床制備芪仙湯微丸的工藝研究[J].中國中藥雜志,2009,34(6)：690-693.

[4]朱莉,沈嵐,馮怡,等.擠出滾圓-流化床法制備麥冬皂苷腸溶微丸[J].中成藥,2012,33(2):349-352.

[5]馮怡,沈嵐,徐德生,等.麥冬皂苷讓融微球的載藥量和包封率研究[J].中成藥,2004,26(8):611-613.

[6]趙國巍,廖正根,陳緒龍,等.噴霧干燥法制備三七皂苷緩釋微球[J].華西藥學雜志,2010,25(6):676-678.

[7]李紅月,張洪賀,王海洋,等.低溫擠出滾圓法制備銀耳多糖微粒[J].長春中醫藥大學學報,2016,32(1):34-36.

[8]瞿慧,楊秀珍.流化床制粒法制備淀粉類空白丸芯的工藝研究[J].現代中藥研究與實踐,2013,27(5):46.

[9]李葆林,王嬌.流化床包衣技術在藥物制劑中的應用現狀[J].河北醫科大學學報,2015,36(9):1114-1116.

[10]方瑜,向柏,潘振華,等.流化床包衣法制備甘草酸二銨結腸定位微囊[J].中國醫院藥學雜志,2012,32(3):197-200.

[11]董佳麗,黃震.泮托拉唑鈉腸溶微丸膠囊的制備[J].上海醫藥,2014,35(21):74-77.

[12]周欣,張晶,王娟,等.奧美拉唑腸溶微丸膠囊的制備[J].解放軍藥學學報,2012,28(1):32.

[13]廖恒鋒,張翰銘,李夢楚,等.擠出滾圓-流化床包衣法制備雷貝拉唑鈉腸溶微丸[J].中國藥房,2016,27(4):514-517.

[14]陳麗華,徐德生.流化床包衣法制備芍藥總苷緩釋微丸的研究[J].中草藥,2009,40(3):379.

[15]白靖,王靜.藥用丙烯酸樹脂在制劑中的應用進展[J]中國藥房,2011,22(17):1613-1616.

[16]王愛明,楊磊,張曉嶺,等.pH依賴型阿莫西林多重脈沖微丸的制備[J].醫藥導報,2013,32(3):387-389.

Preparation of enteric soluble microparticles of polysaccharide Tremella fuciform by fluid-bed coating method

LI Hongyue,XIAO Xulang,WANG Haiyang,ZHANG Honghe,XU Duoduo,WANG Mingxing,GAO Qipin,GAO Yang*

(Chinese Medicine Macromolecules Laboratory of Jilin Province,Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China

ObjectiveTo review and optimize the process conditions of Enteric soluble microparticles of the polysaccharide from Tremella fuciform Berk(Tremella polysaccharide) by fluid-bed coating method.MethodsWith Eudragit L30 - D55 as coating material,triethyl citrate as plasticizer,talcum powder as the antisticking agent,the release of the inspection after the coating particles respectively in degrees,preparation of diameter of less than 190 μm particles.Results40.62% drug loading.The encapsulation efficiency is 79.29%,and the cumulative release of acid is less than 10%,the cumulative release of lye is greater than 75%.Preparation of particles of the average particle size is between 115 μm to 190 μm,its roundness,bulk density,in vitro release and total yield are ideal.ConclusionThe methods of fluidized bed coating to prepare the enteric soluble microparticles of polysaccharides are simple,stable and feasible,and the methods are suitable for preparing the sample for the functional research of enteric administration with mouse and for industrial production.

Tremella polysaccharide;Tremella polysaccharide enteric particles;fluid-bed coating method

10.13463/j.cnki.cczyy.2016.05.014

吉林省重點科技攻關項目(20140204026YY)。

李紅月(1990-)，女，碩士研究生，主要從事糖類化合物構效關系。

高陽，電話-13644410003，電子信箱-756287045@qq.com

R284.1

A

2095-6258(2016)05-0919-03

2016-03-07)