顯齒蛇葡萄的化學成分及藥理作用研究進展

劉慧穎， 崔秀明， 劉迪秋， 楊 野，王承瀟， 楊曉艷， 曲 媛*

(1.昆明理工大學生命科學與技術學院，云南昆明 650500；2.昆明市道地藥材可持續發展利用重點實驗室，云南昆明 650500)

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顯齒蛇葡萄的化學成分及藥理作用研究進展

劉慧穎1,2， 崔秀明1,2， 劉迪秋1,2， 楊 野1,2，王承瀟1,2， 楊曉艷1,2， 曲 媛1,2*

(1.昆明理工大學生命科學與技術學院，云南昆明 650500；2.昆明市道地藥材可持續發展利用重點實驗室，云南昆明 650500)

顯齒蛇葡萄為藥食兩用植物，具有疏風解毒、祛瘀消腫、止血止痛功效，對顯齒蛇葡萄的化學成分(黃酮類、酚類、甾體類、多糖類、揮發油類等)、藥理作用及其機制(抗氧化、抑菌、抗炎鎮痛、抗癌、抗病毒等)進行綜述，以期為其臨床應用及全面開發利用提供依據。

顯齒蛇葡萄；化學成分；藥理作用

顯齒蛇葡萄Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz) W.T.Wang是葡萄科蛇葡萄屬的一種野生藤本植物，主要分布于廣東、廣西、云南、貴州、湖南、湖北、江西、福建等地[1]。由顯齒蛇葡萄的嫩葉經過殺青、揉捻、烘干而成的類茶飲料稱為藤茶。藤茶為藥食兩用植物，其加工產品有藤茶餅、袋泡茶、速溶茶、含片以及果凍等[2-4]。藤茶性微溫，有疏風解毒、祛瘀消腫、止血止痛等功效。國內外學者在生藥學、化學成分、藥理作用、臨床應用等方面對顯齒蛇葡萄進行了大量研究，特別是從中發現了許多新的生物活性，并闡明了其作用機理。筆者對顯齒蛇葡萄的化學成分及藥理作用進行了綜述，為其綜合開發利用奠定基礎。

1　化學成分

1.1黃酮類化合物顯齒蛇葡萄中黃酮類化合物的含量高達45%(圖1)，主要有二氫楊梅素、(2R，3S) -5，7，3′，4′，5′-五羥基二氫黃酮醇、楊梅素、楊梅素-3-O-L-鼠李糖苷、楊梅素-3′-O-β-D-吡喃木糖苷、楊梅素-3-O-β-D-半乳糖苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、山柰酚、紫云英苷、阿福豆素、芹菜素、二氫山柰酚、5，7，3′，4′，5′-五羥基二氫黃酮、橙皮素、旗松素[5-6]。

1.2酚類目前，顯齒蛇葡萄中酚類化合物有沒食子酸、沒食子酸乙酯、沒食子酸甲酯、兒茶素、表兒茶素等[6]。

1.3氨基酸類及微量元素顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中總氨基酸含量高達2.53 g/l00 g，包含17種氨基酸，8種人體所必需的氨基酸，其中包括γ-氨基丁酸、蛋氨酸等特殊氨基酸。同時，研究發現顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中包含多種微量元素。其中，對人體健康與疾病防治有重要影響的無機元素如Fe、Cu、Mn、Zn、Se等在顯齒蛇葡萄中均有較高含量[7]。

1.4多糖熊皓平等[8]分析不同季節顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中水浸出物、水溶性糖和氨基酸總量發現，顯齒蛇葡萄春、夏幼嫩莖葉的水浸出物含量最高，水溶性糖含量約為 10%，氨基酸含量約為5%。羅祖友等[9]從顯齒蛇葡萄中分離得到2種蛋白質的復合多糖AGP-3、AGP-4，經過鑒定兩者均為分子量相對均一的蛋白多糖。

1.5甾體及萜類化合物從該植物中分離得到的甾體主要有豆甾醇(stigmasterol)、齊墩果酸(oleanplic acid)、β-谷甾醇(β-sitosterol)等[10-12]。袁阿興等[13]研究發現顯齒蛇葡萄中萜類化合物主要為龍涎香醇。

1.6揮發油類成分顯齒蛇葡萄葉中香氣成分主要有α-萜品醇、β-環梓檬醛、芳樟醇、壬酸、癸酸、橙花醇、香葉基丙酮、β-紫羅蘭酮、2，4-二叔丁基苯酚、橙花叔醇、柏木腦、鄰苯二甲酸異丁基辛基酯、金合歡基丙酮、氯二苯甲酮等；莖中香氣成分為香葉醇、水楊酸甲酯、壬酸、癸酸、香葉基丙酮、6,10,14-三甲基-2-十五烷酮、柏木腦、β-畢橙茄醇、鄰苯二甲酸二異丁酯。這些特征香氣成分是造成顯齒蛇葡萄制品具有特殊“青味”的成分[14]。

2　藥理作用及其機制

2.1抗氧化作用Wang等[15]研究發現黃酮類和酚類是顯齒蛇葡萄莖提取物中主要負責DPPH自由基清除活動的物質。梁琍等[16]研究梵凈山野生藤茶中二氫楊梅素的體外抗氧化作用發現，在試驗濃度范圍內，藤茶中二氫楊梅素清除 DPPH·的能力高于蘆丁，二氫楊梅素濃度達 50 mg/L 時，其清除率高于Vc；隨著二氫楊梅素濃度的增加，其清除·OH 的能力逐步提高。Zheng等[17]研究發酵藤茶(顯齒蛇葡萄)中主要總黃酮類化合物的成分和其抗氧化作用發現，大鼠給予100 mg/kg的二氫楊梅素后,在4 h時大鼠血清對DPPH還原水平達到最高，在4 h后開始下降；與二氫楊梅素相比，總黃酮類化合物顯示出同樣的時間依賴，但抗氧化活性更高。Kou等[18]分析顯齒蛇葡萄中蛇葡萄素對H2O2誘導的PC12細胞中的細胞凋亡的神經保護作用表明，蛇葡萄素可通過激活ERK和Akt的信號途徑來強化細胞的抗氧化防御，同時誘導HO-1的表達，從而保護PC12細胞中H2O2誘導的細胞凋亡。肖浩等[19]研究發現藤茶多酚是一種較好的天然抗氧化劑，在相同濃度的情況下，藤茶多酚對·OH和O2-·的清除能力比Vc強。同時，藤茶多糖在一定濃度范圍內也具有顯著的體外抗活性氧能力[20]。

圖1　顯齒蛇葡萄中黃酮類化合物的結構式Fig.1　Structural formula flavonoids compounds in A.grossedentata

2.2抑菌作用顯齒蛇葡萄的提取物對常見呼吸道致病菌如葡萄球菌、肺炎球菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌等均有抑制效果。研究發現，顯齒蛇葡萄總黃酮直接作用于金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌時有明顯的抑菌作用,特別對臨床分離金黃色葡萄球菌作用更強；顯齒蛇葡萄總黃酮局部用藥時,藥物濃度達抑菌濃度以上，對某些細菌的抑菌作用優于華素片(西地碘)[21]。顯齒蛇葡萄總黃酮還具有一定的體內抑菌作用[21]。廣西藤茶提取物APS 對金葡菌、MRSA 的TdR、UR合成均有明顯的抑制作用，但對綠膿桿菌的TdR、UR的合成無明顯的抑制作用[22]。熊大勝等[23]通過體外抑菌試驗表明，顯齒蛇葡萄嫩莖葉提取物對金黃葡萄球菌、枯草桿菌均有很強的抑制作用，對黑曲霉、黃曲霉、青霉、交鏈霉均有不同程度的抑制效果。

2.3抗炎、鎮痛張亞兵[24]研究發現蛇葡萄素能減輕三硝基苯磺酸/乙醇誘導的大鼠試驗性結腸炎，其作用機制與蛇葡萄素下調結腸NF-kB p65表達、Th1促炎性細胞因子TNF-α、IL-1β和上調Th2抑炎性細胞因子IL-10有關。Hou等[25]分析發現顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素通過抑制NF-kB的激活以及p38和JNK的磷酸化來發揮其局部抗炎作用；二氫楊梅素既能抑制LPS處理的小鼠體內促炎性細胞因子水平，如TNF-α、IL-1β和IL-6，也能增加抗炎細胞因子IL-10水平；二氫楊梅素能減少巨噬細胞中一氧化氮合酶(iNOS)、TNF-α和環氧合酶-2(COX-2)的蛋白表達量；二氫楊梅素抑制了經LPS刺激的巨噬細胞NF-kappa B(NF-κB)和IκBα的磷酸化以及p38和JNK的磷酸化。鐘正賢等[26]用小鼠耳廓腫脹和小鼠扭體試驗研究顯齒蛇葡萄提取物的消炎鎮痛作用，結果表明其明顯抑制小鼠耳廓腫脹，減少小鼠扭體次數，具有抗炎、鎮痛作用。林建峰等[27]證實顯齒蛇葡萄水提取液對小鼠醋酸性扭體反應和熱水反應有一定的鎮痛作用,能提高小鼠的痛閾水平。

2.4抗癌作用Jeon等[28]采用體外細胞毒性抑制試驗，發現二氫楊梅素對人體常見致癌細胞， 如肺癌 H1299 細胞、白血病 HL-60、K562細胞均有較強的抑制作用。姚欣等[29]通過采用流式 Annexin V/PI雙染法檢測細胞凋亡率，研究顯齒蛇葡萄提取物對人前列腺癌 LNcap 細胞凋亡的作用，結果表明，藤茶提取物可顯著誘導 LNcap 細胞凋亡，在加入提取物24 h后，腫瘤細胞的凋亡率顯著上升，且呈量效關系。楊秀芬等[30]分析發現蛇葡萄素與苯并芘合用，可明顯誘導CYP1A 1、CYP1A 2基因和谷胱甘肽-S轉移酶基因GST-m 1、GST-pi的表達，表明兩者合用可以加速苯并芘代謝形成非致癌物而解毒和加速排泄。Zhou等[31]研究顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素對高轉移性人乳腺癌MDA-MB-231細胞的細胞侵襲作用及其機制發現，二氫楊梅素能夠抑制MDA-MB-231細胞的增殖、明膠酶活性和MMP-2/-9蛋白質表達水平，并抑制MMP-2/-9 mRNA的表達水平；二氫楊梅素抑制MDA-MB-231細胞的侵襲來對抗癌細胞，侵襲的抑制可能與MMP-2/-9蛋白表達水平的下降有關。Zhao等[32]研究發現顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素(DHM)潛在的抗腫瘤活性與p38 MAPK和AMPKα/ GSK-3β/ Sox2信號通路有關，且一些患者化療后出現較低的p-AMPK表達量，表明DHM可以成為治療骨肉瘤的候選藥。Zeng等[33]評估顯齒蛇葡萄中DHM在細胞增殖、細胞周期分布和人類黑色素瘤SK-MEL-28細胞系中細胞凋亡的作用發現，DHM可作為一個抑制黑色素瘤細胞增長的新型有效的候選藥物。此外，Xia等[34]研究發現二氫楊梅素誘導的自噬抑制了HepG2細胞的細胞增殖，其機制參與抑制mTOR的激活和調節相關的上游信號通路。

2.5降血脂、降血糖顯齒蛇葡萄具有明顯的降血脂作用，陳玉瓊等[35]研究恩施高硒藤茶水提取物(ESTC)發現，ESTC對大鼠TC、TG有明顯的降低作用，對HDL-C有明顯的升高作用，說明 ESTC 對試驗大鼠有輔助降血脂作用；人體臨床試驗表明，試驗組服用ESTC 30 d后，受試組血清膽固醇、甘油三酯明顯下降，與試用前及對照組比較，差異極顯著，說明ESTC對人體也具有輔助降血脂的功能。梁柱第等[36]研究發現藤茶雙氫楊梅素對動脈粥樣硬化具有一定的防治作用，其作用機制是通過改善動脈粥樣硬化大鼠炎癥因子水平，抑制sPLA2-II AmRNA 的表達。黃先菊等[37]研究蛇葡萄素對2型糖尿病大鼠的降糖作用發現，高、低劑量蛇葡萄素均能降低2型糖尿病大鼠的血糖水平。由于骨骼肌胰島素抵抗(SMIR)在2型糖尿病的發病機理中起著重要的作用，Shi等[38]研究二氫楊梅素對SMIR的影響及其機制表明，二氫楊梅素可通過由AMPK信號通路的激活誘導的自噬來改善SMIR，從而給2型糖尿病的治療帶來新思路。Jiang等[39]研究二氫楊梅素對甲基乙二醛誘導的PC12細胞中氧化應激和葡萄糖轉運活性影響及其相關機制發現，二氫楊梅素能夠抑制PC12細胞中氧化應激，平衡葡萄糖代謝；二氫楊梅素降低GLUT4的轉運功能障礙，提高Glo-1和 p-AMPKα的表達量；二氫楊梅素能夠保護PC12細胞抵抗甲基乙二醛誘導的細胞凋亡和糖代謝紊亂，成為一種新型治療糖尿病患者腦病的候選試劑。

2.6保肝作用Murakamia等[40]研究大鼠的D-氨基半乳糖誘導的肝損傷發現，顯齒蛇葡萄莖和葉中保肝作用的主要成分是二氫楊梅素，含有1%的50%乙醇提取物和0.1%二氫楊梅素的食物顯著地抑制了LDH、ALT、AST、α-維生素E水平和半乳糖胺引起的GSG/ GSSH的增加。徐靜娟等[41]采用《保健食品檢驗與評價技術規范》提供的方法，研究從顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素的生物功效，發現二氫楊梅素能夠有效地預防乙醇性肝損傷；二氫楊梅素毒性很小，對小鼠灌胃30 d 后能有效地阻止乙醇導致的肝臟GSH耗竭和MDA升高，能降低TG含量，減輕肝細胞脂肪變性。Chen等[42]研究二氫楊梅素對非酒精性脂肪肝病人的葡萄糖和脂質代謝，炎癥介質以及幾個生物指標的影響，并進行了雙盲臨床試驗，結果表明，二氫楊梅素的補充可改善非酒精性脂肪肝疾病患者的糖脂代謝以及各種生化參數，其治療效果可能歸因于其可改善胰島素抵抗，降低腫瘤壞死因子-α、細胞角蛋白-18和成纖維細胞生長因子-21的血清水平。

2.7增強免疫閻莉等[43]報道顯齒蛇葡萄總黃酮通過提高正常小鼠單核巨噬細胞的吞噬功能，促進血清溶血素和補體C3的生成，增加總補體活性，能夠增強正常小鼠的免疫功能。曾春暉等[44]分析發現廣西藤茶提取物APS可以明顯提高小鼠的脾臟指數，增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的功能，增強淋巴細胞的增殖反應，增加溶血素抗體水平和2，4-二硝基氯苯誘導的小鼠耳腫脹，使小鼠免疫增強。此外，藤茶多糖也具有增強荷瘤小鼠免疫能力的作用[45]。

2.8抗病毒閻莉等[46]研究藤茶中APS的體內抗鴨乙肝病毒作用表明，APS對感染鴨血清DHBV-DNA水平均有顯著的抑制作用，且停藥3 d未見明顯的反跳現象，說明APS有抑制乙肝病毒的作用。此外，藤茶還能防止敏感細胞感染艾滋病病毒(HIV-1)，顯著降低HIV-1P24抗原的表達，干擾HIV-1SF33吸附到MT-4細胞[47]。

2.9其他作用方會龍等[48]研究顯齒蛇葡萄提取物對血吸蟲病肝纖維化的治療作用表明，其提取物可改善血吸蟲病肝臟形態及肝纖維化小鼠肝組織結構,減輕肝纖維化程度，對血吸蟲病肝纖維化有明顯的治療作用。陳立峰等[49]研究顯齒蛇葡萄總黃酮抗口腔黏膜潰瘍的作用發現，顯齒蛇葡萄總黃酮能使表皮葡萄球菌性、乙酸性口腔黏膜潰瘍模型的潰瘍直徑明顯縮小，炎癥指數降低，表明顯齒蛇葡萄總黃酮有減輕口腔黏膜潰瘍炎癥、促進潰瘍愈合的作用。Meng等[50]對新生大鼠心肌細胞用二氫楊梅素預處理(0～320 μmol/L)，隨后用Ang II(100 nmol/L)刺激24 h，通過細胞表面分析來評價肥大的程度，結果表明，二氫楊梅素對Ang II誘導的心肌細胞肥大有抗氧化活性衰減作用，且其衰減與以NO依賴方式的抗氧化活性有關。高輝等[51]研究二氫楊梅素對運動耐力的影響發現，二氫楊梅素具有抗疲勞作用，這一作用可能與其抑制組織的過氧化水平有關。潘人琦等[52]證實醉酒小鼠給予二氫楊梅素后，顯著縮短了醒酒時間，說明二氫楊梅素具有一定的防醉解酒作用。

3　小結與展望

顯齒蛇葡萄含有黃酮類、酚類、甾體類、多糖類、揮發油類等多種化學成分，其中二氫楊梅素為主要的功效成分，且含量高。藥理作用廣泛，包括抗氧化、抑菌、抗炎鎮痛、抗癌、抗病毒、降血脂、降血糖、保肝以及增強免疫等作用。在我國顯齒蛇葡萄資源豐富，但絕大部分資源主要用于制備粗加工茶飲料產品，其開發利用度不高。目前，顯齒蛇葡萄還沒有被列入國家藥典，但這些藥理作用為顯齒蛇葡萄的臨床應用以及新產品的開發奠定了基礎。顯齒蛇葡萄作為一種藥食兩用的植物，資源豐富，具有很好的開發前景。

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Research Progress of Chemical Constituents and Pharmacological Effects ofAmpelopsisgrossedentata(Hand-Mazz) W.T.Wang

LIU Hui-ying1,2, CUI Xiu-ming1,2, LIU Di-qiu1,2, QU Yuan1,2*et al

(1.Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming, Yunnan 650500; 2.Kunming Key Laboratory of Sustainable Development and Utilization of Famous-region Drug, Kunming, Yunnan 650500)

Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz) W.T.Wang is a kind of plant resource used both as medicine and food, and it has the effects of dispelling wind to detoxification, eliminating stasis to resolve swelling, and hemostasis and analgesia.In this research, the chemical composition (flavonoids, phenols, steroids, polysaccharides, and volatile oils), pharmacological effects and mechanism (antioxidant, bacteriostasis, anti-inflammation, analgesia, anti-cancer, antivirus and so on) ofA.grossedentatawere reviewed, in order to provide the basis for its clinical application and the comprehensive exploitation and utilization.

Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz) W.T.Wang; Chemical constituents; Pharmacological effects

云南省科技計劃項目(2013RE001); 昆明理工大學自然科學研究基金資助項目(KKSY201326022)。

劉慧穎(1992- )，女，山東菏澤人，碩士研究生，研究方向：中藥質量控制。*通訊作者，講師，博士，碩士生導師，從事中藥質量控制研究。

2016-08-05

R 284

A

0517-6611(2016)27-0135-04