濟南市部分規模化豬場豬瘟抗體監測結果與分析

汪 洋　孔祥華　王士榮　曹振山　王 敏

（山東省動物疫病預防與控制中心　山東 濟南250022）

濟南市部分規模化豬場豬瘟抗體監測結果與分析

汪 洋孔祥華王士榮曹振山王 敏

（山東省動物疫病預防與控制中心山東 濟南250022）

為了解濟南市豬瘟免疫效果，本研究抽檢了濟南市的12個規模化豬場的血清樣品370份，采用ELISA方法對其進行豬瘟抗體檢測，其中283份免疫合格，免疫合格率為74.49%，檢測結果表明濟南市規模化豬場豬瘟免疫效果良好，可以起到免疫預防的作用。

豬瘟（Classical swine fever， CSF）是一種急性、熱性高度接觸性傳染病，主要危害豬和野豬，主要引起高燒、微血管變性、全身出血、壞死、梗塞［1］；病原為豬瘟病毒（Classical swine fever virus， CSFV），死亡率高，給養豬業造成極大的經濟損失［2］，是我國影響養豬業健康的重大動物疫病之一，農業部列為一類動物疫病，世界動物衛生組織（OIE）將其確定為A類傳染病，我國采取強制免疫的措施預防該病。（1）豬瘟最早的記載是1830年在美國的俄亥俄州，但1822年的法國出現過類似豬瘟的報道，直到1903年才確定了豬瘟的病原體是一種病毒［3］。我國于1935年的調查中有該病的發生。豬瘟感染后主要引起母豬流產、死胎、新生仔豬死亡以及其他疫苗的免疫失敗。（2）豬通過口鼻途徑感染病毒，可以引起嚴重的白細胞減少好免疫抑制，造成廣泛的血栓和上皮損傷，表現為器官嚴重的出血、淤血，根據病毒毒力的不同以及被感染豬年齡、品種的不同，疫病可變現為溫和性豬瘟和典型豬瘟等多種形式，豬感染病毒后表現為高熱、免疫力低下、免疫抑制、繼發感染其他病原體，因而造成高死亡率或或混合感染的發生，病毒可以通過母豬胎盤或公豬的精液中造成垂直感染，而引起仔豬的流產、死胎等。（3）豬瘟病毒是黃病毒科、瘟病毒屬成員之一，與牛病毒性腹瀉、綿羊邊界病毒同屬，抗原之間存在交叉保護作用［4］。豬瘟病毒主要有三個基因群，其中基因1群和基因2群有3個亞群，基因3群有4個基因亞群，分別為1.1、1.2、1.3、2.1、2.2、2.3、3.1、3.2、3.3、3.4［4］。我國豬瘟主要流行毒株多為2個基因群，4個基因亞群，即2.1、2.2、2.3和1.1基因亞群，而基因型2是我國豬瘟的優勢基因群，2.1、2.2是我國主要流行的毒株［5］。豬瘟病毒是單股正鏈RNA病毒，長度約12.3kb，病毒粒子呈球形，直徑約40-50nm，外層為脂蛋白的囊膜，內部為20面體對稱的核衣殼。豬瘟病毒對環境的抵抗力不強，不耐熱，56℃60min 即可滅活，60℃30min即可使病毒失去傳染性，乙醚、氯仿等脂溶劑可很快使病毒滅活，豬瘟病毒粒子在-70℃可存活數年而不喪失其感染性，在凍肉中可存活2個月以上。豬瘟病毒由5'-非編碼區、一個開放閱讀框和3'-非編碼區構成，編碼的蛋白依次為Npro、C、Erns、E1、E2、P7、NS2-3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B編碼區，除C、Erns、E1、E2為結構蛋白外，其余均為非結構蛋白［6］。（4）豬瘟的診斷技術包括病原學診斷和血清學診斷，病原學診斷包括病毒分離、熒光抗體檢測、免疫過氧化物酶單層試驗、酶聯免疫吸附試驗、以及聚合酶鏈式反應等；血清學檢測方法包括中和試驗、酶聯免疫吸附試驗等。1956年我國由中國獸藥監察所方世杰等自主研發豬瘟兔化弱毒疫苗（C株、HCLV），因其具有免疫力強，保護率高而且持久，遺傳穩定，無殘余毒力等優點，成為國際上公認的免疫效果最好的豬瘟弱毒疫苗，國際上很多國家采用該疫苗進行了豬瘟的凈化，但在我國，豬瘟仍是養豬業面臨的重大為題，主要表現為：流行呈散發，發病年齡偏小，發病表現溫和、持續性感染，垂直傳播嚴重，免疫抑制以及混合感染嚴重病情復雜，嚴重限制了我國養豬業的健康發展，造成巨大的經濟損失。

1　材料和方法：

1.1材料

1.1.1試劑豬瘟抗體ELISA檢測試劑盒，由IDEXX提供。1.1.2血清樣品2015年1-12月份抽檢濟南市12個規模化豬場豬瘟疫苗免疫的血清樣品370份。

1.1.3主要儀器設備酶標儀（美國thermo MK3），洗板機

（405Touch微孔板洗板機）、移液器（法國吉爾森）。

1.2檢測方法

按照操作說明書進行，阻斷率≥40%判定為免疫合格。

2　結果

2.1豬瘟抗體檢測結果

2.1.1不同豬場豬瘟免疫抗體檢測結果從抽檢的12個養殖場的監測結果來看，采集的12個豬場中，豬場的免疫效果參差不齊，群體免疫合格率從33.33%到100%不等，其中8個豬場的免疫抗體合格率在70%以上（農業部群體免疫合格標準），12個豬場共采集了370份血清樣品，其中283份免疫合格，免疫合格率為74.49%。

2.1.2不同類型疫苗豬瘟免疫效果抽檢的12個養殖場中，4個豬場采用的豬瘟脾淋苗，8個豬場采用的豬瘟細胞苗，從檢測結果來看，兩種疫苗的抗體滴度不同，存在著一定的差異，脾淋苗稍好于細胞苗（見表2）。

表1　不同場點豬瘟免疫抗體檢測結果

表2　不同疫苗類型豬瘟免疫抗體檢測結果

3　討論

（1）共抽檢了12個小規模養豬場，12個豬場都進行了豬瘟免疫，說明養殖場對于豬瘟重視程度，也從側面說明了豬瘟對養殖業的重要性。（2）抽檢的370份樣品，豬瘟樣品免疫合格率為74.49%，抽檢的樣品大部分為育肥豬，豬瘟抗體免疫效果尚算理想，稍高于農業部要求的70%的群體免疫合格率。（3）抽檢的12個規模化豬場，8個豬場的豬瘟免疫合格率達到70%以上，還有4個豬場的免疫合格率不足70%，一旦周邊豬場發生豬瘟疫情或者豬瘟病毒在該豬群存在，該豬場的豬瘟免疫現狀將不能保護豬群的健康，因此，這4個豬場需要進一步加強豬瘟的防疫。（4）從豬瘟不同的疫苗類型來看，豬瘟脾淋苗的免疫效果稍好于豬瘟細胞苗。

［1］ 王賽賽. 2012年豬瘟E2基因分子流行病學調查及重組病毒構建［D］.福建.福建農林大學. 2013.

［2］ 殷震， 劉晶華. 動物病毒學第2版［M］. 北京∶ 科學出版社， 1997∶652-664.

［3］ 蔡寶祥. 家畜傳染病學［M］. 北京∶ 中國農業出版社， 1999， 147-151.

［4］ Paton DJ. Classical swine fever virus∶ A ring testto evalutate RT-PCR detection methods. Vet Microbiol 73∶ 159-174.

［5］ Tu C， Lu Z， Phylogenetic comparison of classical swine fever virus in China［J］. Virus Genes， 19∶ 189-195.

［6］ Hanson RP. Origin of hog cholera［J］. J Am Vet Med Assoc1957，131（5）∶ 211-218.

［7］ 王琴， 寧宜寶.豬瘟免疫失敗主要原因的解析［J］. 中國獸醫雜志. 2005（41）6∶ 61-63.

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