化學(xué)藥物雜質(zhì)研究中色譜質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用分析

于海坤　孫大偉　孫園園

摘 要：近年來，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，色譜質(zhì)譜技術(shù)得以進步，且被廣泛應(yīng)用于化學(xué)藥物雜質(zhì)研究中，促使化學(xué)藥物研究朝著新的方向發(fā)展。鑒于此，通過具體實驗，探究了色譜質(zhì)譜技術(shù)在化學(xué)藥物雜質(zhì)研究中的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：化學(xué)藥物；雜質(zhì)；色譜質(zhì)譜技術(shù)；鹽酸環(huán)噴托酯滴眼液

中圖分類號：R917；O657.63 文獻標識碼：A DOI：10.15913/j.cnki.kjycx.2016.18.146

1 確定鹽酸環(huán)噴托酯滴眼液中氧化雜質(zhì)結(jié)構(gòu)

1.1 材料與試劑

實驗材料與試劑為鹽酸環(huán)噴托酯滴眼液、甲酸、乙腈、超純?nèi)ルx子水（18.2 MΩ）。

1.2 色譜條件

儀器：液相色譜、Agilent 1290 Infinity UHPLC、質(zhì)譜、Agilent 6538 UHD and Accurate-Mass Q-TOF/MS。

色譜柱：Waters HSS T3（1.7 μm，100 mm×2.1 mm）。

流動相：A-0.1%甲酸溶液，B-乙腈。

梯度：time（min）∶Flow（mL/min）∶Solve Ratio B（%）分別為0∶0.4∶5、1∶0.4∶5、7∶0.4∶23、12∶0.4∶23、16∶0.4∶70、18∶0.4∶95.其中，0.4 mL/min為流速，40 ℃為柱溫，2 μL為進樣量。

1.3 質(zhì)譜條件

Gas Temp 350 ℃，Gas Flow 11 L/min，Nebulizer 45 psi，VCap 4 000 V，F(xiàn)ragmentor 120 V，Skimmerl 60 V，OctopoleRFPeak 750 V，Reference Masses 121.050 9 m/z、922.009 8 m/z。

1.4 制備供試品

堅持精密操作原則，取10 mL鹽酸環(huán)噴托酯滴眼液，放置于10 mL量瓶內(nèi)，添加1 mL質(zhì)量分數(shù)為30%的過氧化氫溶液，于室溫條件下放置5 d，在稀釋20倍條件下等待分析。

1.5 結(jié)果

以質(zhì)譜信息為依據(jù)，分析其元素。結(jié)果顯示，在RT=8.048 min的色譜峰下，環(huán)噴脫酯為主要成分；在RT=8.677 min的色譜峰下，待分析雜質(zhì)，將其命名為雜質(zhì)E.表1和表2分別為環(huán)噴托酯和雜質(zhì)E高分辨質(zhì)譜表及匹配結(jié)果。

通過元素組成分析，C17H25NO3表示的是環(huán)噴托酯，C17H25NO4表示的是雜質(zhì)E.相比于環(huán)噴脫酯，雜質(zhì)E多一個氧原子，應(yīng)屬于氧化產(chǎn)物，但無法正確判定其位置。

2 鑒定三羥芐基芐絲肼中雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)

2.1 材料與試劑

材料與試劑為三羥芐基芐絲肼、甲酸、乙腈、超純?nèi)ルx子水（18.2 MΩ）。

2.2 色譜條件

儀器：液相色譜、Agilent 1290 Infinity UHPLC、質(zhì)譜、Agilent 6538 UHD and Accurate-Mass Q-TOF/MS。

色譜柱：Waters HSS T3（1.7 μm，100 mm×2.1 mm）。

流動相：A-0.1%甲酸溶液，B-乙腈。

梯度：time（min）∶Flow（ml/min）∶Solve Ratio B（%）分別為0∶0.4∶2、1∶0.4∶2、5∶0.4∶10、8∶0.4∶10、12∶0.4∶16、13∶0.4∶16、15∶0.4∶40.其中，0.4 mL/min為流速，40 ℃為柱溫，1 μL為進樣量。

2.3 質(zhì)譜條件

Gas Temp 350 ℃，Gas Flow 11 L/min，Nebulizer 45 psi，VCap 4 000 V，F(xiàn)ragmentor 120 V，Skimmerl 60 V，OctopoleRFPeak 750 V，Reference Masses 121.050 9 m/z、922.009 8 m/z。

2.4 制備供試品

堅持精密操作原則，取10 mL三羥芐基芐絲肼放置于10 mL量瓶中。待甲醇定容后，于20倍稀釋后等待分析。

2.5 結(jié)果

以質(zhì)譜信息為依據(jù)，分析其元素。結(jié)果顯示，于RT=5.065的色譜峰下，三羥芐絲肼為主要成分；RT=0.772 min、1.091 min、5.482 min和6.316 min下的色譜峰為待測雜質(zhì)，分別將其命名為雜質(zhì)1、雜質(zhì)2、雜質(zhì)3和雜質(zhì)4.基于高分辨質(zhì)譜表和匹配結(jié)果分析，C17H21N3O8表示三羥芐基芐絲肼，雜質(zhì)1與雜質(zhì)2均表示C10H15N3O5，C18H23N3O8表示的是雜質(zhì)3，C24H27N3O11表示的是雜質(zhì)4.

3 結(jié)論

本文通過色譜質(zhì)譜技術(shù)對鹽酸環(huán)噴托酯滴眼液和三羥芐基芐絲肼進行了分析，探究了其主要成分與雜質(zhì)。結(jié)果顯示，對于鹽酸環(huán)噴托酯滴眼液，經(jīng)由氧化破壞，產(chǎn)生一定的保留時間，且出現(xiàn)雜質(zhì)E，且相比于環(huán)噴脫酯，多了一個氧原子；對于三羥芐基芐絲肼，除了三羥芐絲肼外，還涉及4種雜質(zhì)?？傊?，針對較為簡單的化學(xué)藥物，通過色譜質(zhì)譜技術(shù)可初步鑒別其雜質(zhì)，具有操作簡單的特點，應(yīng)用價值高。

參考文獻

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〔編輯：劉曉芳〕