淺談醫(yī)學院校生物化學的實驗準備工作

梁斌 謝琦 李康智 梁成欽 周先麗

摘要：生物化學實驗課是培養(yǎng)醫(yī)學生的重要課程之一，其中實驗準備工作是否充分，不僅影響了實驗結果，而且直接影響了生物化學這門課程的教學質量。因此，本文以生物化學課程的實驗準備為例，從多方面探索了如何做好實驗準備工作。

關鍵詞：實驗準備;生物化學;醫(yī)學院校

中圖分類號：G642.0 ? ? 文獻標志碼：A ? ? 文章編號：1674-9324（2016）36-0277-02

隨著生命科學領域的快速發(fā)展，生物化學這門學科已經滲透醫(yī)學的各個領域，生物化學課程已經成為醫(yī)學院校的基礎必修課[1]。生物化學實驗教學可以培養(yǎng)學生敏銳細致的觀察能力、動手能力和分析能力，是培養(yǎng)高素質應用型醫(yī)學人才的重要途徑[2]。實驗準備是實驗教學的重要環(huán)節(jié)，同時也是實驗教學順利進行的前提條件，實驗準備工作的好壞直接影響到實驗教學的質量。由于生物化學是本校的基礎必修課，臨床醫(yī)學、藥學、檢驗學、預防醫(yī)學、口腔醫(yī)學、生物技術、護理學等專業(yè)均有涉及，因學生多，課時多，內容雜，實驗準備工作尤其煩瑣，實驗技術人員任務更加繁重。作者在本校從事了多年的生物化學實驗準備工作，下面從幾個方面對醫(yī)學院校生物化學的實驗準備工作進行具體的闡述。

一、實驗室的規(guī)范管理

實驗室是實驗教學的場所，實驗室的管理是否完善直接影響到實驗教學的效果，因此必須加強管理使實驗室規(guī)范化。我院生物化學實驗室主要有常規(guī)教學實驗室與開放性實驗室，如何加強管理使實驗室規(guī)范化呢？常規(guī)教學實驗室主要根據授課計劃內容配套全部設施，包括上課所需要的冰箱、通風櫥、紫外分光光度計、高速離心機、低速離心機、水浴鍋、電泳儀以及PCR儀等。除此之外，還有實驗基本的耗材例如試管架、玻璃試管、玻璃滴管、離心管、洗耳球、移液管、玻璃棒、EP管架等。開放性實驗室則相當于一個小型研究場所，除了配置常規(guī)的基本設施外，還需配套一些比較昂貴的儀器、常規(guī)使用的試劑與耗材，以及實驗準備過程中需要用到的儀器例如電子天平、微波爐等。除了上述用品外，每個實驗室都需要及時補充試管刷、洗衣粉、掃帚、拖把、抹布等日雜耗材。為了實驗課能順利進行，實驗技術人員上課前要檢查清點，下課后要清理收拾并且監(jiān)督學生做好衛(wèi)生工作，日常工作中要查漏補缺，尤其要注意水電安全問題。實驗室管理工作盡管煩瑣，也必須引起重視，應加強管理使其規(guī)范化。下面舉例說明實驗室管理不規(guī)范的后果。假如上課需要使用水浴鍋，而課前檢查時未發(fā)現水浴鍋沒有水，那么上課過程中就會出現水浴鍋干燒事件。常規(guī)教學實驗室由于實驗技術人員的努力極少可能出現這樣的事件，而開放性實驗室主要是學生課后使用，就更加要加強管理使實驗室規(guī)范化，例如入室前培訓、入室登記、實驗結束后需經嚴查才能離場。

二、實驗儀器管理

生物化學實驗涉及到的大部分儀器如上所述，現在詳細講述如何規(guī)范管理儀器。（1）所有的儀器都要做好使用登記，具體包括使用時間、使用前與使用后儀器的狀況、使用人姓名等;（2）部分開放性實驗需要用到的儀器，例如高壓滅菌鍋，不允許學生單獨操作，必須在教師的指導下進行操作;（3）學生上課過程中經常使用到的儀器，例如紫外分光光度計、水浴鍋、離心機等必須按照實驗室儀器操作步驟進行，帶教教師要檢查與監(jiān)督;（4）儀器非人為損壞需要及時報修處理，不能影響后面的課程，人為損壞則需要賠償損失;（5）實驗技術人員要經常檢查儀器的使用情況，尤其是開學與期末這兩個時間段，開學后要檢查所有儀器是否完好并且做好使用前處理，期末后要及時整理好儀器，例如水浴鍋的清洗與排水，儀器電源是否都已關閉并且拔掉電源線等。

三、低值易耗品的請購與管理

生物化學實驗課課時多，損耗大，因此每個學期都必須進行實驗試劑與耗材的請購。低值易耗品的請購是每個學期末提前為下一學期做準備的。低值易耗品請購計劃要嚴格把握請購量，既不能浪費也不能漏買。要做好低值易耗品請購工作，需要做到以下幾點：（1）對下學期的實驗內容熟悉，具體到每個實驗內容，例如血糖測定實驗需要哪些試劑與耗材;（2）對下學期做這個實驗內容的學生人數有個大概的數量估計;（3）在不浪費的前提下多做一些預備，以防意外;（4）對庫房存貨做到心中有數，本學期剩余的試劑與耗材數量要清楚，預計下學期還需要請購多少比較合適等。

低值易耗品的請購需要經驗，而管理方面則需要用心，主要需要做好出入庫記錄工作。對于耗材管理而言，要分門別類放置并且貼好標簽，還要熟悉耗材的具體位置。而試劑的管理需要更加謹慎，例如酸堿腐蝕性試劑、有毒有害試劑、易燃易爆試劑等。要做好試劑管理工作，主要遵循如下幾點原則：（1）試劑庫房專人專管，責任到人，劇毒試劑要保險柜存放，兩人以上保管;（2）試劑庫房要遠離明火、干燥通風;（3）普通試劑與毒麻試劑分開放置;（4）易揮發(fā)試劑如乙醚、鹽酸等放置于通風柜;（5）固液試劑分開放置;（6）酸堿試劑分開放置;（7）特殊試劑需要冰凍保存的放于專門冰箱保存;（8）容易見光分解的試劑要避光保存;（9）統一編號所有試劑柜，在門上貼好標簽例;（10）做電子版試劑匯總表，試劑出入庫都需要在登記本登記后再在電子表匯總。

四、試劑的配制與分裝

生物化學實驗內容比較多，涉及到的試劑種類繁多，不同性質的試劑配制需要考慮許多因素：（1）根據實驗試劑單位的要求，選擇的稱量與測量儀器與耗材不同，精確度要求比較高的選擇帶四位小數點的電子天平與合適的容量瓶，其他可以選擇一位小數點的電子天平與合適量程的量筒即可;（2）根據需要配制的試劑的性質選擇合適溶劑;（3）易揮發(fā)試劑的配制需要到通風櫥操作，例如涉及到濃鹽酸、乙醚、濃氨水等溶液的配置;（4）易燃易爆或者危害性比較大的試劑必須小心操作，例如濃硫酸的稀釋順序;（5）根據試劑酸堿性的問題需要考慮存放試劑的瓶子的性質，例如玻璃試劑瓶或者塑料試劑瓶;（6）見光易分解或者變性的試劑需要避光保存，分裝時使用棕色瓶;（7）用于配制試劑的耗材例如燒杯、量筒、玻璃棒等需要清洗干凈，以免污染試劑;（8）每次試劑的配制時都需要做好原始記錄以便復查。

除了以上因素外，生物化學的大部分實驗試劑由于需要分裝使用，以及部分學生操作失誤等原因，配制試劑時一般需要按照實際需求量的1.5～2倍來配制，以免試劑量不夠影響實驗教學效果或者造成不必要的浪費。例如雙縮脲法測定蛋白質的實驗中，每一組學生需要雙縮脲試劑的量為30mL，一個本科班有60人即分為30個組，那么我們實際需要配制的試劑至少應該為30mL/組×30組×1.5=1350mL。而試劑分裝問題也與試劑本身性質與使用量相關。上述的例子中的雙縮脲試劑應該配套實驗室分裝為8套，用200mL的棕色瓶分裝。另外，由于一些實驗試劑的配制需要動物的組織或者雞蛋等，例如蛋白質的沉淀與變性實驗中的卵清蛋白試劑需要新鮮雞蛋，酮體的生成與鑒定實驗需要新鮮的瘦豬肉與豬肝等，因此實驗技術員需要根據授課內容提前寫好動物計劃請購表。技術員要根據實驗內容的要求，提前做好一個學期的動物計劃總表，并且在相應的實驗課前一周寫一份具體的動物計劃交到教務處。

五、預實驗的重要性

所謂預實驗是指在進行實驗教學或者科學研究時，經常需要在正式實驗前先做一次實驗，簡稱預實驗[3]。由于每次實驗都會因為時間、溫度、試劑批號、濃度與儀器等的改變而出現不同的實驗結果，所以每一次實驗之前都要認真地做好預實驗[4]。預實驗的進行不僅僅是實驗技術人員的事情，而應該是實驗技術人員與授課教師共同進行。如果預實驗結果正常，那么說明這批試劑可以用于學生實驗教學，如果預實驗結果不理想，那么實驗技術人員與授課教師要共同分析具體原因，一直到做出理想的結果為止。為了保證能有足夠的時間解決預實驗出現的問題，預實驗需要安排在正式上課前一周進行比較合適。

六、實驗的更新

隨著科技的發(fā)展，很多實驗向著更加簡便、安全的方向發(fā)展。實驗技術人員要緊跟科學技術發(fā)展，不斷提高自身專業(yè)知識，通過不斷的實驗嘗試使實驗更簡單、更安全、結果更明顯。例如，PCR實驗中凝膠的觀察，以前都是用EB顯色，而EB是致癌物，對人體有害。通過學習與實踐，我們發(fā)現用核酸染料GeneFinder可以代替EB，而且相對EB安全許多，100mL凝膠加入1μL的核酸染料即可得到比較理想的圖像。另外，酮體的生成與鑒定實驗，以往都是用小鼠作為材料，但是經過我們的實驗發(fā)現采用新鮮的瘦豬肉與豬肝作為材料，實驗結果更加明顯，而且實驗過程更加簡便等。

綜上所述，生物化學實驗是培養(yǎng)學生動手能力和創(chuàng)新意識的重要基礎課程，做好生物化學實驗準備工作意義重大。因此，實驗技術人員要在思想上高度重視實驗準備工作，努力提高業(yè)務水平，才能適應不斷發(fā)展的教育事業(yè)，勝任實驗教學的工作，進一步提高教學質量。

參考文獻：

[1]楊艷，劉晨光.如何改革生物化學的研究型教學[J].生命的化學，2015，35（2）：294-297.

[2]石瑩，段巧玲，張玉心，等.加強實驗室管理，提高生物化學實驗教學質量[J].基礎醫(yī)學教育，2011，13（10）：922-924.

[3]王冰，李春梅，馬曉凱，等.預實驗在實驗準備中的作用[J].衛(wèi)生職業(yè)教育，2008，（18）：26.

[4]蘇麗，汪曉鶯，賁志云.預實驗在免疫學實驗準備工作中的重要性[J].科技信息，2010，（32）：129.