肺腺癌中叉頭框M1與基質(zhì)金屬蛋白酶-2、-9的表達(dá)及意義

肖旭陽(yáng)　王曉東

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院胸心外科，遼寧　錦州　121000)

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肺腺癌中叉頭框M1與基質(zhì)金屬蛋白酶-2、-9的表達(dá)及意義

肖旭陽(yáng)王曉東

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院胸心外科，遼寧錦州121000)

目的應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)肺腺癌中叉頭框(FOX)M1和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表達(dá)，分析其意義。方法58例行肺腺癌根治手術(shù)患者的術(shù)后標(biāo)本作為觀察組，36例正常肺組織作為對(duì)照組。采用免疫組化SP法檢測(cè)兩組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的表達(dá)。結(jié)果FOXM1、MMP-2和MMP-9在兩組中的表達(dá)差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的陽(yáng)性率與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和淋巴血管浸潤(rùn)密切相關(guān)，F(xiàn)OXM1的陽(yáng)性率與腫瘤的大小密切相關(guān)，MMP-2和MMP-9的陽(yáng)性率與腫瘤的大小無(wú)關(guān)，F(xiàn)OXM1、MMP-2和MMP-9的陽(yáng)性率均與患者的性別和年齡無(wú)關(guān)。線性相關(guān)分析顯示觀察組中FOXM1和MMP-2、FOXM1和MMP-9的表達(dá)具有正相關(guān)性。結(jié)論肺腺癌中FOXM1、MMP-2和MMP-9高表達(dá)對(duì)促進(jìn)腫瘤的形成和遷移有重要作用。

肺腺癌；叉頭框(FOX)M1；基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2；MMP-9；免疫組化

肺腺癌臨床常見(jiàn)，可單發(fā)或多發(fā)，大小不一，常見(jiàn)于周?chē)头伟＝鼇?lái)研究顯示其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)〔1〕。叉頭框(FOX)M1是FOX轉(zhuǎn)錄因子家族的一員，在腫瘤中的表達(dá)常升高，并參與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展〔2,3〕。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2、-9是MMPs家族的重要成員，二者均為明膠酶〔4〕。腫瘤進(jìn)展時(shí)MMP-2和MMP-9的分泌增多，基底膜溶解破壞，細(xì)胞外基質(zhì)減少或消失，使腫瘤細(xì)胞易于離開(kāi)原發(fā)灶形成轉(zhuǎn)移〔5〕。本文針對(duì)肺腺癌術(shù)后組織中FOXM1、MMP-2和MMP-9的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，分析臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料2012年1月至2014年12月我院行肺腺癌手術(shù)的病例，均經(jīng)術(shù)后病理學(xué)證實(shí)，并符合IASLC/ATS/ERS國(guó)際多學(xué)科分類(lèi)中的標(biāo)準(zhǔn)，共58例，年齡37～83歲，平均(62.1±9.5)歲。距腫物邊緣>3 cm的正常肺組織36例作為對(duì)照組，年齡39～80歲，平均(59.7±9.0)歲。兩組一般臨床資料無(wú)明顯差異。

1.2FOXM1、MMP-2和MMP-9的檢測(cè)方法兩組均行FOXM1、MMP-2和MMP-9蛋白的免疫組化檢測(cè)，應(yīng)用SP法，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色，樣本由同一主管技師操作，按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，減少誤差。

1.3FOXM1、MMP-2和MMP-9的判斷標(biāo)準(zhǔn)FOXM1、MMP-2和MMP-9著色部位位于細(xì)胞質(zhì)，以染成棕黃色為陽(yáng)性細(xì)胞。選擇腫瘤性上皮細(xì)胞或腺上皮細(xì)胞集中且染色較為明顯的區(qū)域進(jìn)行觀察，計(jì)數(shù)3個(gè)高倍視野，計(jì)算陽(yáng)性率，取平均值。以<10%定為陰性，以≥10%定為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)或線性相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.1兩組中FOXM1、MMP-2和MMP-9陽(yáng)性率的比較兩組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的陽(yáng)性率差別顯著。見(jiàn)表1。

表1　兩組FOXM1、MMP-2和MMP-9陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

2.2觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9在不同臨床特征中的比較觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的陽(yáng)性率與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和淋巴血管浸潤(rùn)密切相關(guān)，F(xiàn)OXM1的陽(yáng)性率與腫瘤的大小密切相關(guān)，MMP-2和MMP-9的陽(yáng)性率與腫瘤的大小無(wú)關(guān)，F(xiàn)OXM1、MMP-2和MMP-9的陽(yáng)性率均與患者的性別和年齡無(wú)關(guān)。見(jiàn)表2。

2.3觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9的相關(guān)性FOXM1和MMP-2(r=0.46,P=0.023 4)、FOXM1和MMP-9(r=0.45,P=0.028 6)表達(dá)具有正相關(guān)性。

表2　觀察組中FOXM1、MMP-2和MMP-9陽(yáng)性表達(dá)在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

3　討　論

流行病學(xué)顯示肺腺癌在較多地區(qū)的發(fā)病率已超過(guò)鱗癌，成為最常見(jiàn)的肺癌組織學(xué)亞型。腫瘤具有腺樣分化或有黏液產(chǎn)生，表現(xiàn)為腺泡樣、乳頭樣、附壁生長(zhǎng)樣，部分表現(xiàn)為具有黏液形成的實(shí)性巢，或以上述形式形成混合結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)。病變形成中體內(nèi)基因可以表現(xiàn)異常，尤其是與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因異常表達(dá)時(shí)，引起腫瘤的侵襲性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移〔6〕。FOXM1基因定位于12p13.3，有10個(gè)外顯子，翼螺旋狀的DNA結(jié)合域位于第三外顯子上，與小鼠的同源性為69%〔7,8〕。研究顯示FOXM1是一個(gè)典型的增生相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子，通過(guò)對(duì)多種基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，實(shí)現(xiàn)G1/S轉(zhuǎn)換、G2/M轉(zhuǎn)換，推動(dòng)有絲分裂的進(jìn)行，同時(shí)調(diào)節(jié)DNA修復(fù)、染色質(zhì)組裝、蛋白質(zhì)的合成等過(guò)程〔9,10〕。研究認(rèn)為FOXM1對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的重建起重要作用〔11〕，尤其是對(duì)MMPs和組織蛋白酶的作用等。細(xì)胞外基質(zhì)與腫瘤細(xì)胞之間的關(guān)系與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，腫瘤浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移都要發(fā)生基底膜降解，基底膜是上皮與深層基質(zhì)之間的一道屏障，主要是由Ⅳ型膠原形成的上皮細(xì)胞支架〔12,13〕。MMPs是一組結(jié)構(gòu)上具有極大同源性、能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的內(nèi)肽酶的總和，因含有金屬離子(鋅、鈣)而得名〔14〕。MMP-2和MMP-9作為家族中明膠酶的重要成員，對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的降解能力強(qiáng)〔15〕。研究認(rèn)為當(dāng)腫瘤細(xì)胞增殖時(shí)，MMP-2和MMP-9以酶原形式分泌，不僅能夠在細(xì)胞表面活化其他促轉(zhuǎn)移的細(xì)胞因子，而且其還具有廣泛的底物特異性，對(duì)轉(zhuǎn)移的影響增強(qiáng)〔16,17〕。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示FOXM1、MMP-2和MMP-9高表達(dá)均為腫瘤惡性轉(zhuǎn)化的客觀證據(jù)。FOXM1高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)，使腫瘤體積增大，這種作用可能與FOXM1具有高增殖作用相關(guān)〔18〕。也有研究認(rèn)為FOXM1的作用可能更趨于多元性，如對(duì)腫瘤血管生成因子的正向調(diào)節(jié)作用，使腫瘤的生長(zhǎng)能力增強(qiáng)〔19〕。也有研究認(rèn)為FOXM1可以對(duì)S期激酶相關(guān)蛋白(SKP)2蛋白進(jìn)行調(diào)節(jié)，并導(dǎo)致P27蛋白泛素化增加，繼而引起細(xì)胞增生活性的改變等〔18〕。本文提示FOXM1、MMP-2和MMP-9三種蛋白高表達(dá)使腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)，淋巴血管浸潤(rùn)能力增強(qiáng)，腫瘤的生物學(xué)呈明顯的進(jìn)展?fàn)顟B(tài)。FOXM1對(duì)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的作用可能與促進(jìn)MMP-2和MMP-9高表達(dá)相關(guān)，此時(shí)腫瘤細(xì)胞中MMP-2和MMP-9的分泌增加，對(duì)基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)的降解作用增強(qiáng)，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的屏障消失或作用下降，使腫瘤細(xì)胞易于離開(kāi)原發(fā)灶而播散。也有觀點(diǎn)認(rèn)為MMP-2和MMP-9可能參與腫瘤相關(guān)蛋白的水解級(jí)聯(lián)反應(yīng)，或激活其他癌基因和轉(zhuǎn)移相關(guān)基因，共同促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移〔20〕。

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〔2015-01-23修回〕

(編輯苑云杰)

王曉東(1960-)，男，碩士，主任醫(yī)師，主要從事胸部腫瘤診治研究。

肖旭陽(yáng)(1979-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事胸部腫瘤診治研究。

R734

A

1005-9202(2016)18-4511-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.053