石墨烯量子點(diǎn)熒光探針測(cè)定腎上腺色腙

馬紅燕,王艷妮

（延安大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院陜西省反應(yīng)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，陜西延安 716000）

石墨烯量子點(diǎn)熒光探針測(cè)定腎上腺色腙

馬紅燕*,王艷妮

（延安大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院陜西省反應(yīng)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，陜西延安 716000）

通過(guò)高溫裂解檸檬酸合成了水溶性石墨烯量子點(diǎn)（GQDs），并應(yīng)用鈍化劑PEG2000進(jìn)行修飾，提高了GQDs的量子產(chǎn)率。應(yīng)用熒光光譜、紫外-可見(jiàn)光譜、紅外光譜對(duì)其發(fā)光特性進(jìn)行了研究，測(cè)定了熒光壽命。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在PH＝7.40的Tris-HCl緩沖液中，腎上腺色腙（CBZC）對(duì)GQDs熒光強(qiáng)度有明顯的猝滅作用?；诖颂岢隽艘訥QDs為探針測(cè)定腎上腺色腙的新方法。實(shí)驗(yàn)考察了緩沖溶液用量、緩沖溶液種類、量子點(diǎn)濃度、反應(yīng)時(shí)間以及表面活性劑等多種因素對(duì)反應(yīng)體系的影響。當(dāng)量子點(diǎn)濃度為2.3×10-3mol/L時(shí)，腎上腺色腙濃度在4.0×10-7～1.2×10-5mol/L（0.995 6）范圍內(nèi)與熒光猝滅值ΔF呈良好的線性關(guān)系，方法檢出限為1.5×10-7mol/L，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.15%（n＝5，c＝4.0×10-6mol/L）。該方法對(duì)于樣品中腎上腺色腙含量測(cè)定的回收率為97.46%～101.6%。通過(guò)測(cè)定溫度對(duì)猝滅常數(shù)的影響以及紫外-可見(jiàn)吸收光譜的變化確定了二者的猝滅過(guò)程和相互作用力類型。

石墨烯量子點(diǎn)（GQDs）;熒光探針;腎上腺色腙（CBZC）;檸檬酸

1　引 言

近年來(lái)，碳納米發(fā)光材料的低毒性和強(qiáng)熒光性質(zhì)受到了越來(lái)越密切的關(guān)注[1-2]。石墨烯量子點(diǎn)作為碳量子點(diǎn)的一種，一般尺寸小于10 nm，因此比一維的石墨烯量子帶和二維的石墨烯量子片表現(xiàn)出更強(qiáng)的量子限域效應(yīng)和邊界效應(yīng)[3]，在生物、醫(yī)藥和材料等方面展現(xiàn)出更加誘人的應(yīng)用前景[4-5]。石墨烯量子點(diǎn)的合成方法研究頗多，如電化學(xué)氧化法[6]、機(jī)械剝離法、氧化石墨還原法、化學(xué)氣相沉淀法、電弧法[7]、有機(jī)合成等。目前量子點(diǎn)在金屬離子的識(shí)別和檢測(cè)領(lǐng)域研究較多，但在藥物分子分析領(lǐng)域的研究還很少。

腎上腺色腙又稱安絡(luò)血或卡巴克絡(luò)（Carbazochrome，CBZC），臨床主要用于腦、肺、腎、腸毛細(xì)管損傷出血及血小板減少癥狀[8]。目前腎上腺色腙的測(cè)定方法主要有近紅外光譜法[9]、分光光度法[10]、高效液相色譜法[11]、化學(xué)發(fā)光法[12]及熒光分析方法[13]等。

本文采用自上而下的方法高溫裂解檸檬酸合成了具有優(yōu)良熒光特性的GQDs，并對(duì)其進(jìn)行修飾，發(fā)現(xiàn)GQDs發(fā)出很強(qiáng)的藍(lán)色熒光。腎上腺色腙對(duì)GQDs熒光強(qiáng)度有明顯的猝滅作用，據(jù)此建立了一種測(cè)定腎上腺色腙的新方法，并對(duì)其作用機(jī)理進(jìn)行了研究。

2　實(shí) 驗(yàn)

2.1儀器及試劑

2.1.1儀器

F-4500型熒光分光光度計(jì)（日本日立公司）; 8453型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（美國(guó)安捷倫公司）;FLSP920瞬態(tài)穩(wěn)態(tài)熒光光譜儀（英國(guó)愛(ài)丁堡公司）;IR Prestige-21型傅里葉變換紅外光譜儀（日本Shimaozu公司）。

2.1.2試劑

濃度為1.0×10-3mol/L CBZC標(biāo)準(zhǔn)溶液;濃度為10 mg/mL的NaOH溶液;Tris-HCl緩沖液（PH＝7.40）;檸檬酸。所用試劑均為分析純，水為UP超純水。

CBZC標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:準(zhǔn)確稱取腎上腺色腙標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）0.023 6 g，用蒸餾水溶解并定容至100 mL，放置冰箱中待用。

2.2實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1GQDs的合成

在文獻(xiàn)[1]的基礎(chǔ)上，另外引入了PEG進(jìn)行修飾，采用自上而下的方法裂解檸檬酸合成GQDs。具體方法為:準(zhǔn)確稱取1.000 0 g檸檬酸和0.500 0 g PEG2000放入小燒杯中，用電熱套直接加熱，檸檬酸開(kāi)始裂解。5 min后，檸檬酸熔解為無(wú)色液體;繼續(xù)加熱，溶液由無(wú)色變?yōu)榱咙S色。將溶液轉(zhuǎn)移到30.00 mL的NaOH溶液中（10 mg/ mL），連續(xù)攪拌，反應(yīng)完全后轉(zhuǎn)移、稀釋至250 mL容量瓶中，放置在冰箱里待用。GQDs的濃度以檸檬酸的量計(jì)算。該合成方法具有簡(jiǎn)單、快速的優(yōu)點(diǎn)。

2.2.2熒光光譜圖的測(cè)定

移取3.00 mL GQDs于25 mL比色管中，加入3.00 mLTris-HCl緩沖溶液，再加入適量腎上腺色腙溶液，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。室溫下反應(yīng)20 min后，于F-4500型熒光分光光度計(jì)測(cè)定熒光光譜圖，測(cè)定體系熒光強(qiáng)度（F）和試劑空白（F0），計(jì)算ΔF和CBZC濃度之間的關(guān)系。激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)為λex/λem＝367/462 nm，狹縫寬度均為5 nm。

3　結(jié)果與討論

3.1GQDs的特性

3.1.1GQDs的熒光光譜、紫外-可見(jiàn)吸收光譜和熒光壽命

圖1為GQDs的熒光光譜和紫外-可見(jiàn)吸收譜。從圖中可看出修飾前后量子點(diǎn)的最大吸收波長(zhǎng)并無(wú)變化。在462 nm處出現(xiàn)最大熒光發(fā)射峰，與文獻(xiàn)報(bào)道的GQDs的熒光特性也相吻合;但修飾后的量子點(diǎn)熒光強(qiáng)度明顯增大，熒光量子產(chǎn)率增加，且發(fā)射峰的半峰寬較窄，說(shuō)明該量子點(diǎn)單一、均勻。

圖1　GQDs的熒光光譜和紫外-可見(jiàn)吸收光譜Fig.1　Fluorescence spectra and UV-Vis absorPtion of GQDs

我們于FLSP920瞬態(tài)穩(wěn)態(tài)熒光光譜儀上測(cè)定了該GQDs的熒光衰減曲線，擬合結(jié)果如圖2所示。根據(jù)加權(quán)平均計(jì)算法[14]，得出GQDs的熒光壽命為1.87 ns，熒光壽命較短，據(jù)推測(cè)可能是激子（電子與空穴對(duì)）的重組合發(fā)光[15]。χ2接近于1，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在可信范圍內(nèi)。

圖2　GQDs的熒光衰減曲線Fig.2　Flourescence decaY curves of GQDs

3.1.2GQDs的結(jié)構(gòu)表征

量子點(diǎn)的光致發(fā)光是其非常重要的特性之一。量子點(diǎn)具有寬而連續(xù)的激發(fā)譜，可實(shí)現(xiàn)一元激發(fā)和多元激發(fā)，為實(shí)現(xiàn)生物分子的多組分同時(shí)檢測(cè)提供了可能。目前很多實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，量子點(diǎn)的發(fā)射峰強(qiáng)度和位置與激發(fā)波長(zhǎng)有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)于F-4500型熒光分光光度計(jì)上檢測(cè)不同激發(fā)波長(zhǎng)下的GQDs熒光強(qiáng)度，所有測(cè)試均在298 K下進(jìn)行。改變激發(fā)波長(zhǎng)，發(fā)射峰位置和強(qiáng)度也隨之發(fā)生變化，如圖3所示。當(dāng)激發(fā)波長(zhǎng)由340 nm增加到400 nm時(shí)，發(fā)射波長(zhǎng)由444 nm紅移至488 nm，同時(shí)熒光強(qiáng)度先增大后減小。當(dāng)激發(fā)波長(zhǎng)為367 nm時(shí)，熒光強(qiáng)度達(dá)到最大。

圖3　GQDs在不同激發(fā)波長(zhǎng)下的熒光光譜Fig.3　Fluorescence spectra of GQDs with different excitation wavelengths

圖4為GQDs的紅外光譜圖:1 399 cm-1和1 578 cm-1處檢測(cè)到有強(qiáng)的吸收峰，分別為—COO-的對(duì)稱伸縮振動(dòng)和反對(duì)稱伸縮振動(dòng); 1 725 cm-1為—C＝O的特征吸收峰;2 914 cm-1附近有兩個(gè)強(qiáng)度很弱的雙峰，可能為C—H的對(duì)稱與反對(duì)稱伸縮振動(dòng)吸收峰;3 433 cm-1為—OH的伸縮振動(dòng)峰。根據(jù)分析得知該量子點(diǎn)含有羧基和羥基，所以有很好的親水性[16]。

圖4　GQDs的傅里葉變換紅外光譜Fig.4　FTIR spectra of GQDs

3.1.3不同酸度對(duì)量子點(diǎn)熒光強(qiáng)度的影響

溶液的酸度對(duì)量子點(diǎn)的發(fā)光強(qiáng)度有一定影響，因此，本實(shí)驗(yàn)研究了GQDs在不同酸度下的熒光強(qiáng)度及穩(wěn)定性。在酸性介質(zhì)中，其熒光強(qiáng)度小;在中性和堿性條件下，GQDs的熒光強(qiáng)度明顯增大，且不隨PH的變化而變化，表明GQDs在中性和堿性條件下熒光穩(wěn)定。

3.2腎上腺色腙的測(cè)定

3.2.1熒光光譜圖

室溫下，固定激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)，掃描體系的熒光光譜圖，結(jié)果如圖5所示。由圖可知，腎上腺色腙對(duì)GQDs有明顯的熒光猝滅作用，且GQDs的熒光強(qiáng)度隨著腎上腺色腙濃度的增加有規(guī)律地下降，說(shuō)明腎上腺色腙和量子點(diǎn)發(fā)生了相互作用。

3.2.2緩沖溶液PH、種類及用量的選擇

不同PH對(duì)體系ΔF值的影響不同。實(shí)驗(yàn)考察了不同PH對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響，結(jié)果表明，PH＝7.40時(shí)，體系的ΔF值最大。同時(shí)考察了同一PH值下Na2HPO4-NaH2PO4、Tris-HCl、B-R、檸檬酸-Na2HPO4和NaOH-KH2PO4等緩沖溶液對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響。當(dāng)緩沖溶液為Tris-HCl時(shí)，腎上腺色腙對(duì)GQDs體系的猝滅作用最強(qiáng)，其適宜用量為3.00 mL。所以本實(shí)驗(yàn)選擇3.00 mL的Tris-HCl緩沖溶液來(lái)調(diào)節(jié)體系酸度。

圖5　GQDs-CBZC體系的熒光光譜Fig.5　Fluorescence spectra of GQDs-CBZC sYstem

3.2.3GQDs濃度的選擇

量子點(diǎn)的濃度直接影響著體系的靈敏度和線性范圍。我們?cè)囼?yàn)了不同用量的量子點(diǎn)對(duì)體系熒光強(qiáng)度的影響。結(jié)果表明，當(dāng)量子點(diǎn)用量為3.00 mL時(shí)，體系的猝滅程度最大。實(shí)驗(yàn)選擇加入3.00 mL的量子點(diǎn)，其濃度為2.3×10-3mol/L。

3.2.4增敏劑對(duì)體系的影響

試驗(yàn)了一系列的金屬離子和納米粒子對(duì)腎上腺色腙猝滅量子點(diǎn)的熒光強(qiáng)度的協(xié)同作用。如Cu2＋、Ba2＋、Ca2＋、Mg2＋、Mn2＋、Zn2＋、AgNP和AuNP，結(jié)果均無(wú)明顯影響。表面活性劑對(duì)體系有強(qiáng)的增敏、增溶、增穩(wěn)作用，因此實(shí)驗(yàn)研究了十二烷基苯磺酸鈉（SDBS）、十二烷基三甲基溴化銨（DTAB）、吐溫80（Tween-80）、溴化十六烷基三甲基銨（CTMAB）、β-環(huán)糊精（β-CD）等對(duì)體系猝滅程度的影響。結(jié)果表明，上述幾種表面活性劑和β-環(huán)糊精對(duì)體系ΔF值均無(wú)增敏作用。所以，本實(shí)驗(yàn)選擇不加入任何增敏劑。

3.2.5反應(yīng)時(shí)間及試劑加入順序的影響

配制好溶液，每隔10 min測(cè)定一次熒光強(qiáng)度。結(jié)果表明，腎上腺色腙對(duì)GQDs的猝滅程度在反應(yīng)20 min后最大，且熒光強(qiáng)度在4 h內(nèi)基本穩(wěn)定。試劑加入順序?qū)w系熒光強(qiáng)度幾乎沒(méi)有影響。

3.2.6共存物質(zhì)干擾

在選定的實(shí)驗(yàn)條件下，當(dāng)腎上腺色腙濃度為4.0×10-6mol/L時(shí)，以相對(duì)誤差不超過(guò)±5%為限，1 000倍的葡萄糖、果糖、蔗糖，500倍的Ca2＋、K＋、Sr2＋、Ba2＋，100倍的Cu2＋、Al3＋、Zn2＋，5倍的Fe3＋不干擾測(cè)定。

3.2.7檢出限和線性范圍

在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，腎上腺色腙溶液在4.0×10-7～1.2×10-5mol/L濃度范圍內(nèi)與ΔF呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為ΔF＝2.5× 107c（mol/L）＋10.3，相關(guān)系數(shù)為0.995 6。對(duì)濃度為4.0×10-6mol/L的腎上腺色腙溶液平行測(cè)定5次，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.15%。根據(jù)IUPAC建議計(jì)算，方法檢出限為1.5×10-7mol/L。

3.2.8樣品分析

隨機(jī)抽取同一批號(hào)的腎上腺色腙片劑20片，準(zhǔn)確稱取其質(zhì)量，研磨，稱取適量粉末（相當(dāng)于0.023 6 g腎上腺色腙），用蒸餾水溶解并超聲5 min后定容于100 mL容量瓶中，搖勻，靜置10 min，干過(guò)濾，棄去初濾液，移取一定量后續(xù)過(guò)濾溶液，按照實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定，同時(shí)進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　樣品測(cè)定及回收率實(shí)驗(yàn)（n＝5）Tab.1 Determination results of carbazochrome in samPles and recoverY of the method（n＝5）

3.3機(jī)理討論

在熒光發(fā)射過(guò)程中，熒光試劑在不同的溶劑中通過(guò)和其他物質(zhì)的分子、離子碰撞導(dǎo)致熒光強(qiáng)度會(huì)迅速減弱以致完全失去熒光，稱為熒光猝滅。導(dǎo)致熒光猝滅的因素很多，主要包括激發(fā)態(tài)反應(yīng)、能量轉(zhuǎn)移、生成配合物和碰撞猝滅等[17]。碰撞猝滅又稱為動(dòng)態(tài)猝滅。靜態(tài)猝滅是由于生成配合物而引起的熒光猝滅。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)溫度對(duì)猝滅常數(shù)的影響和紫外-可見(jiàn)吸收光譜的變化來(lái)探討腎上腺色腙和量子點(diǎn)之間的作用機(jī)理。

3.3.1紫外-可見(jiàn)吸收光譜

靜態(tài)猝滅是猝滅劑與基態(tài)熒光分子形成無(wú)熒光或弱熒光的配合物，從而改變熒光物質(zhì)的吸收光譜。固定量子點(diǎn)和腎上腺色腙溶液的濃度，以緩沖溶液為參比，分別做GQDs、CBZC、GQDs＋CBZC的紫外-可見(jiàn)吸收光譜，如圖6所示。從圖中得知，腎上腺色腙在353 nm處有最大吸收，GQDs加入后，最大吸收波長(zhǎng)未發(fā)生變化，吸光度明顯增大。但通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)，GQDs＋CBZC體系的吸光度是GQDs和CBZC二者的吸光強(qiáng)度之和，說(shuō)明腎上腺色腙和量子點(diǎn)沒(méi)有生成配合物，由此證明腎上腺色腙對(duì)量子點(diǎn)的熒光猝滅機(jī)理可能為動(dòng)態(tài)猝滅。

圖6　GQDs、CBZC、GQDs＋CBZC的紫外-可見(jiàn)吸收光譜。Fig.6　Ultraviolet-visible absorPtion spectra of GQDs，CBZC and GQDs＋CBZC，resPectivelY.CCBZC＝4.0×10-6mol/L.

3.3.2溫度對(duì)猝滅常數(shù)的影響

動(dòng)態(tài)猝滅是猝滅劑與熒光試劑的激發(fā)態(tài)分子之間發(fā)生相互作用的過(guò)程。隨著溫度的升高，分子之間的有效碰撞增加，電子轉(zhuǎn)移過(guò)程加劇，這種變化遵守Stern-Volmer方程[18]:F0/F＝1＋Kqτ0[Q]＝ 1＋KSV[Q]。其中，F(xiàn)0和F分別為無(wú)猝滅劑和有猝滅劑時(shí)的熒光強(qiáng)度，τ0是不存在猝滅劑時(shí)的熒光分子的平均熒光壽命，KSV為Stern-Volmer猝滅常數(shù)，[Q]為猝滅劑的濃度，Kq為雙分子猝滅過(guò)程速率常數(shù)。

依據(jù)Stern-Volmer方程，對(duì)F0/F和[Q]進(jìn)行線性回歸，所得直線的斜率為KSV。如圖7所示，在293 K和313 K條件下，腎上腺色腙的[Q]和F0/F線性關(guān)系良好，說(shuō)明只存在一種猝滅方式，靜態(tài)猝滅或動(dòng)態(tài)猝滅。通過(guò)比較，隨著溫度的升高KSV逐漸增大，說(shuō)明腎上腺色腙與GQDs是以動(dòng)態(tài)猝滅的方式發(fā)生相互作用的。

圖7　腎上腺色腙對(duì)GQDs熒光猝滅的Stern-Volmer曲線Fig.7　Stern-Volmer Plot of GQDs quenched by CBZC

3.3.3結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)、熱力學(xué)參數(shù)及作用力類型

以lg[（F0-F）/F]對(duì)lg[Q]作圖，直線的斜率為結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n，截距為lgKA。由表2數(shù)據(jù)可知，量子點(diǎn)和腎上腺色腙的結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n≈1，結(jié)合常數(shù)KA均比較大，說(shuō)明二者具有較強(qiáng)的結(jié)合作用。KA也隨著溫度的升高而增大，表明腎上腺色腙對(duì)量子點(diǎn)的猝滅為動(dòng)態(tài)猝滅。

表2　腎上腺色腙和GQDs的結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)和熱力學(xué)參數(shù)Tab.2 Binding constants，number of binding sites and thermodYnamics Parameters of GQDs-CBZC

利用Vant'Hoff方程可以計(jì)算出熱力學(xué)參數(shù)焓變?chǔ)、熵變?chǔ)、吉布斯自由能ΔG:根據(jù)公式計(jì)算得出各熱力學(xué)參數(shù)，如表2所示。ΔG＜0，表明該反應(yīng)可自發(fā)進(jìn)行;而在腎上腺色腙和量子點(diǎn)結(jié)合的過(guò)程中，ΔH＞0，ΔS＞0，表明腎上腺色腙和量子點(diǎn)之間的作用力為疏水作用力，原因可能為腎上腺色腙表面的羥基和量子點(diǎn)表面的羧基發(fā)生脫水而產(chǎn)生的疏水作用力。

4　結(jié) 論

通過(guò)高溫裂解檸檬酸的方法并經(jīng)過(guò)PEG2000修飾鈍化合成了石墨烯量子點(diǎn)。通過(guò)紅外光譜、熒光壽命和紫外-可見(jiàn)吸收光譜等方法對(duì)其進(jìn)行了表征。在PH＝7.40的Tris-HCl緩沖液介質(zhì)中，腎上腺色腙對(duì)量子點(diǎn)熒光有很強(qiáng)的猝滅作用，據(jù)此建立了以石墨烯量子點(diǎn)為熒光探針定量測(cè)定腎上腺色腙的新方法。該方法快速、簡(jiǎn)單，可用于樣品中腎上腺色腙的含量測(cè)定。通過(guò)測(cè)定溫度對(duì)猝滅常數(shù)的影響和吸收光譜的變化探討了二者的猝滅機(jī)理。結(jié)果表明:腎上腺色腙與石墨烯量子點(diǎn)之間是以動(dòng)態(tài)猝滅的方式發(fā)生相互作用，二者之間為疏水作用力。該方法為研究量子點(diǎn)和藥物間的相互作用提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，同時(shí)為測(cè)定腎上腺色腙提供了新方法。

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馬紅燕（1966-），女，陜西延安人，教授，碩士生導(dǎo)師，2014年于陜西師范大學(xué)獲得碩士學(xué)位，主要從事光譜分析方面的研究。

E-mail:MahY6614@163.com

王艷妮（1990-），女，陜西咸陽(yáng)人，碩士研究生，2013年于延安大學(xué)獲得學(xué)士學(xué)位，主要從事分子光譜分析方面的研究。

E-mail:396262792@qq.com

Detection of Carbazochrome by Graphene Quantum Dot Fluorescence Probe

MA Hong-Yan*，WANG Yan-ni

（College of Chemistry ɑnd Chemicɑl Engineering，Shɑɑnxi Key Lɑborɑtory of Chemicɑl Reɑction Engineering，Yɑn'ɑn Uniυersity，Yɑn'ɑn 716000，Chinɑ）

，E-mɑil:Mɑhy6614@163.com

Water-soluble graPhene quantum dots（GQDs）were sYnthesized by the PYrolYsis of citric acid.Its fluorescent quantum Yield was remarklY increased by PEG2000 modified.The luminescence characteristics of GQDs were studied by fluorescence sPectroscoPY，ultraviolet-visible sPectroscoPY，infrared sPectroscoPY as well as the fluorescence lifetime.A novel method for quantitative determination of trace carbazochrome（CBZC）was develoPed based on the fluorescence quenching of GQDs in PH 7.40 Tris-HCl buffer solution.A wide range of reaction Parameters，such as concentration of GQDs，reaction time，surfactant，sorts and amount of buffer was examined.The screening results show that the ΔF was linearlY related with the carbazochrome concentration from 4.0×10-7to 1.2×10-5mol/L（0.995 6）with the detection limit of 1.5×10-7mol/L.The relative standard deviation is 0.15%（n＝5，c＝4.0×10-6mol/L），when the concentration of GQDs is 2.3×10-3mol/L.The method has been used for the determination of carbazochrome in samPles with the recoveries of 97.46%-101.6%.The interaction mechanism and main sorts of binding force between GQDs and carbazochrome were investigated by the temperature effect on the quenching constants and UV-visible absorPtion sPectrometrY.

graPhene quantum dots（GQDs）;fluorescence Probe;carbazochrome（CBZC）;citric acid

O657.3

A DOI:10.3788/fgxb20163702.0230

1000-7032（2016）02-0230-07

2015-09-18;

2015-12-08

陜西省自然科學(xué)基礎(chǔ)研究計(jì)劃（2014JM2056）;延安大學(xué)研究生科研創(chuàng)新項(xiàng)目資助