飼料中添加黃腐酸對鯽魚生長及消化酶活性的影響

烏蘭，齊景偉，羅旭光，安曉萍

（內蒙古農業大學動物科學學院，內蒙古呼和浩特010018）

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飼料中添加黃腐酸對鯽魚生長及消化酶活性的影響

烏蘭，齊景偉，羅旭光，安曉萍

（內蒙古農業大學動物科學學院，內蒙古呼和浩特010018）

為研究飼料中添加黃腐酸對鯽魚生長及消化酶活性的影響，本試驗選取60尾40 g左右的鯽魚進行飼養試驗，分為對照組和試驗組，每組3個重復，每個重復10尾魚。試驗組在基礎飼料中添加0.30%的黃腐酸，對照組飼喂基礎飼料。試驗期為30 d。結果表明：試驗組平均增重率較對照組提高30.96%（P＜0.05）；試驗組肝胰臟蛋白酶活性、淀粉酶活性和腸道淀粉酶活性分別較對照組顯著提高31.69%、40.00%和20.00%（P＜0.05），腸道蛋白酶活性和肝胰臟、腸道脂肪酶活性分別較對照組提高8.81%、8.07%和7.14%（P＞0.05）。由此可見，在基礎飼料中添加適量的黃腐酸可以促進鯽魚的生長，顯著增加魚體肝胰臟蛋白酶、淀粉酶和腸道淀粉酶的活性。

鯽魚；飼料；黃腐酸；生長；消化酶

腐植酸是一類從泥炭、褐煤或風化煤中提取的高分子化合物（趙繼芬，2004）。黃腐酸是腐植酸中分子量最小、溶解度最高、生物活性最強和吸收效果最佳的部分（姚東偉，2003），具有提高動物生長性能，改善肉品質和增強免疫功能的作用（白會新等，2013；常啟發等，2013）。此外，黃腐酸還具有凈化水質的作用（薛德林等，2009）。目前，黃腐酸對水產動物消化酶活性的研究鮮有報道。本試驗以煤炭中提取的黃腐酸為試驗材料，通過在鯽魚基礎飼料中添加適量的黃腐酸，研究其對鯽魚生長和消化酶活性的影響，旨在深入探討黃腐酸對水產動物的影響及作用機制。

1　材料和方法

1.1黃腐酸及基礎飼料黃腐酸由內蒙古永業農豐生物科技有限責任公司提供，提取自風化煤和褐煤，黃腐酸含量為12.05%。試驗基礎飼料是根據鯽魚飼養標準人工配制而成的顆粒飼料，基礎飼料組成及營養水平見表1。

1.2試驗設計及飼養管理鯽魚馴養結束后，挑選體質健壯、體重40 g左右的鯽魚60尾，隨機分放在6個55 cm×50 cm×60 cm的室內循環水玻璃水族箱中。試驗分對照組和試驗組，每組3個重復，每個重復10尾魚。對照組飼喂鯽魚基礎飼料，試驗組在基礎飼料中添加0.30%的黃腐酸。試驗周期為30 d。試驗前，試驗魚用基礎飼料馴食7 d。每天定時投飼（9∶00、17∶00），24 h連續充氣，定時測定水溫、溶氧量、pH，日投飼量為魚體重的2%～3%，并根據魚的實際情況及時調整投飼量。每3 d換水1次，每次換水1/3。試驗期間，水溫為23～26℃，溶氧量＞5.0 mg/L，pH為7.0～7.6。

表1　基礎日糧組成及營養水平%

1.3測定指標及方法

1.3.1生長性能指標測定試驗開始及試驗結束的前1 d停止投飼，讓魚饑餓1 d后用電子天平稱取魚體重，精確到0.01 g，計算平均增重率。計算公式為：

平均增重率/%=（試驗末平均魚體重-試驗初平均魚體重）/試驗初平均魚體重×100。

1.3.2消化酶活性測定

1.3.2.1樣品采集試驗結束的次日，分別從每個水族箱取出6尾魚，斷脊處死取樣，在冰盤上解剖。取出魚的肝胰臟和全腸，剔除脂肪組織，用濾紙輕輕吸干水分，置于-20℃冰箱中冷凍備用。每個水族箱的樣品集中放在一起。

1.3.2.2粗酶液的制備將腸道和肝胰臟解凍之后，分別稱取1 g組織，剪碎后，按W∶V=1∶10加入4℃0.9%的生理鹽水，在冰浴下用電動勻漿器勻漿，勻漿液在3000 r/min、4℃離心30 min，取上清液于4℃保存，24 h內測定酶活性。

1.3.2.3酶活性的測定方法和定義蛋白酶活性的測定：參照《生化技術導論》蛋白酶的測定方法，即福林-酚法，并略作改進。蛋白酶活性的定義為：在37℃、pH 7.5的條件下，1 g組織中的蛋白酶1 min水解酪蛋白產生1 μg酪氨酸的量定為一個酶活力單位（U）。

淀粉酶和脂肪酶活性的測定：采用南京建成生物工程研究所研制的淀粉酶試劑盒（碘-淀粉比色法）和脂肪酶試劑盒，具體測定方法和步驟參照說明書。淀粉酶活性（AMS）定義：每1 mg組織蛋白在37℃下與底物作用30 min，水解10 mg淀粉定義為1個淀粉酶活力單位（U）。脂肪酶活性（LPS）定義：每1 g組織蛋白在37℃下，在本反應體系中與底物反應1 min，每消耗1 μmol底物定義為1個脂肪酶活力單位（U）。

1.4數據統計分析試驗數據用Excel做初步整理后，采用SPSS 17.0軟件包對數據進行方差分析。數據以“平均值±標準差”表示，差異顯著用P＜0.05表示。

2　結果

2.1黃腐酸對鯽魚平均增重率的影響由表2可知，與對照組相比，添加0.30%黃腐酸的試驗組，其平均增重率提高30.96%（P＜0.05）。

表2　黃腐酸對鯽魚平均增重率的影響

2.2黃腐酸對鯽魚消化酶活性的影響由表3可知，與對照組相比，添加0.30%黃腐酸的試驗組，魚的肝胰臟和腸道蛋白酶活性分別提高了31.69%（P＜0.05）和8.81%（P＞0.05）；淀粉酶活性分別提高40.00%和20.00%（P＜0.05）；脂肪酶活性分別提高8.07%和7.14%（P＞0.05）。

表3　黃腐酸對鯽魚消化酶活性的影響

3　討論

3.1黃腐酸對鯽魚生長的影響有研究顯示，黃腐酸是一種安全的促生長添加劑，在豬日糧中添加0.50%的黃腐酸可提高豬的平均日增重，降低料重比（常啟發等，2013）。在1～21日齡肉仔雞的日糧中添加0.024%～0.240%的黃腐酸，可增加肉仔雞的平均日增重并降低料重比（王晶等，2013）。本試驗結果表明，在基礎飼料中添加0.30%的黃腐酸可顯著提高鯽魚的平均增重率。這一結果與張志功等（1999）報道的一致，從而進一步證實了在魚飼料中添加黃腐酸可以加快其生長速度。

3.2黃腐酸對鯽魚消化酶活性的影響消化酶是消化腺和消化系統所分泌的起消化作用的酶類，具有酶的所有特征，能將大分子的營養物質催化成小分子，從而有利于營養物質吸收。有研究顯示，消化酶活性是反映魚類消化機能的重要指標，魚類消化酶活性的高低決定其對營養物質的消化分解和吸收利用，增強魚體的消化酶活性能提高魚對飼料的消化吸收率和魚生長速度（彭小玉和沈明浩，2010；李愛杰，1996）。本試驗結果顯示，在基礎飼料中添加0.30%的黃腐酸可顯著提高鯽魚的肝胰臟蛋白酶活性、肝胰臟和腸道淀粉酶活性，鯽魚腸道蛋白酶活性、肝胰臟和腸道脂肪酶活性也有小幅提高。本試驗所用黃腐酸本身不能分泌蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶，但卻能增強這些消化酶的活性，其原因可能是黃腐酸進入魚的消化道后，能刺激肝胰臟和腸道分泌消化酶，或使消化道已有消化酶的活性增強。此外，黃腐酸具有保護動物胃腸黏膜的功效，投喂含有黃腐酸的飼料可以保護魚類消化道中分泌消化酶的黏膜細胞，從而促進消化酶的分泌（閆論，2004）。

4　小結

本試驗研究表明，在體重40 g左右的鯽魚基礎飼料中添加0.30%的黃腐酸，可以促進鯽魚的生長，顯著增加魚體肝胰臟蛋白酶、淀粉酶和腸道淀粉酶的活性。

［1］白會新，常啟發，石寶明，等.黃腐酸對生長育肥豬生長性能、胴體性狀和肉品質的影響［J］.動物營養學報，2013，25（1）：133～139.

［2］常啟發，白會新，石寶明，等.黃腐酸對生長豬生長性能、血清生化指標、血常規參數和免疫功能的影響［J］.動物營養學報，2013，25（8）：1836～1842.

［3］李愛杰.水產動物營養與飼料學［M］.北京：中國農業出版社，1996.5～6.

［4］彭小玉，沈明浩.蒲公英水提物對鯽魚生長、魚體成分、消化酶和免疫系統的影響［J］.中國畜牧獸醫，2010，37（5）：13～17.

［5］王晶，張海軍，武書庚，等.飼糧中添加黃腐酸對肉仔雞生產性能和血液生化指標的影響［J］.動物營養學報，2013，25（1）：140～147.

［6］薛德林，胡江春，王國安，等.海洋膠紅酵母、光合細菌、生化黃腐酸在海參育苗和養成中的應用效果［J］.腐植酸，2009，4：19～24.

［7］閆論.腐植酸及其廣泛應用［J］.新疆農業科學，2004，41（S1）：130～132.

［8］姚東偉.黃腐酸對番茄生長產量及光合特性的影響：［碩士學位論文］［D］.晉中：山西農業大學，2003.

［9］張志功，徐學軍，劉權.生化黃腐酸添加劑飼喂羅非魚的效果［J］.內陸水產，1999，3：13.

［10］趙繼芬.黃腐酸從風化煤中溶出時的吸附平衡及溶解性研究：［碩士學位論文］［D］.太原：太原理工大學，2004.

［11］中山大學生物系生化微生物教研室.生化技術導論［M］.北京：人民教育出版社，1978.52～58.

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The effect of dietary fulvic acid on growth and digestive enzyme activities of Carassius auratus was investigated.Sixty Crucian carp（body weight was 40 g）were randomly divided into 2 treatment groups with 3 replicates of 10 each for 30d.The control group was fed the basal diet，and the experimental group was fed the basal diet supplemented with 0.30% fulvic acid.The results showed that compared with the control group，the average weight gain of the experimental group increased by 30.96%（P＜0.05）；the activities of proteinase and amylase in hepatopancreas and the activities of amylase in intestine of the experimental group increased by 31.69%，40.00%and 20.00%（P＜0.05），respectively，the activities of proteinase in intestine and lipase in hepatopancreas and intestine of the experimental group also increased by 8.81%，8.07%and 7.14%，but the difference was not significant（P＞0.05）.The results suggested that dietary fulvic acid could promote the growth of Crucian carp，and significantly improve the activities of proteinase and amylase in hepatopancreas and the activities of amylase in intestine.

crucian carp；feed；fulvic acid；growth；digestive enzyme

S963

A

1004-3314（2016）01-0032-03

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20160110

內蒙古自然基金項目（2012MS0325）