肝細胞癌中轉化生長因子β激酶1、核因子-κB和P53的表達

朱玉峰　祁　明　于曉東　尹遜天

(遼寧醫學院附屬第一醫院普外微創肝膽病區，遼寧　錦州　121000)

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肝細胞癌中轉化生長因子β激酶1、核因子-κB和P53的表達

朱玉峰祁明1于曉東尹遜天

(遼寧醫學院附屬第一醫院普外微創肝膽病區，遼寧錦州121000)

目的檢測肝細胞癌中轉化生長因子β激酶(TAK)1、核因子(NF)-κB和突變型P53基因(P53)的表達，分析其臨床意義。方法58例肝細胞癌術后存留的蠟塊組織作為觀察組，30例距腫物邊緣大于3 cm的正常肝組織術后存留的蠟塊組織作為對照組。應用免疫組化SP法檢測二組中TAK1、NF-κB和P53的表達。結果二組中TAK1、NF-κB和P53的陽性率差別有統計學意義。觀察組中TAK1、NF-κB和P53的陽性率均與腫瘤的分化程度、腫瘤最大徑、脈管內癌栓密切相關。相關分析顯示觀察組中TAK1和NF-κB的表達呈正相關性。結論肝細胞癌中TAK1、NF-κB和P53高表達對腫瘤的發生和進展均有重要作用。TAK1和NF-κB可能具有正向協同作用。

肝細胞癌；轉化生長因子β激酶(TAK)1；核因子(NF)-κB；P53；免疫組化

肝細胞癌是起源于肝細胞的惡性腫瘤，病變形成過程中可以出現蛋白的表達異常〔1〕。轉化生長因子β激酶(TAK)1是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，又名MAP3K7，屬于絲裂原活化蛋白激酶(MAPKs)中的一種，其在腫瘤中介導的信號轉導通路主要是應激反應、炎癥免疫反應，TAK1在腫瘤中常高表達〔2，3〕。核因子(NF)-κB是一種多向性、多功能的核轉錄因子，可以調控細胞凋亡和增殖過程，在上皮細胞癌變過程中發揮重要作用〔4，5〕。突變型P53基因(P53)高表達是腫瘤進展的重要因素〔6〕。本實驗檢測肝細胞癌中TAK1、NF-κB和P53的表達，關注其臨床意義。

1　材料和方法

1.1臨床資料我院行手術治療的肝細胞癌患者作為觀察組，共58例，均留取術后蠟塊組織，年齡47～75歲，平均62.3歲，其中男30例，女28例。均經術后病理醫師閱片確診。30例距腫物邊緣大于3 cm的正常肝組織術后存留的蠟塊組織作為對照組，年齡48～72歲，平均61.7歲，其中男15例，女15例。二組一般資料無明顯差別。

1.2TAK1、NF-κB和P53的檢測方法免疫組化檢測應用SP法，均由主管技師完成，按說明書操作，做好質控。

1.3TAK1、NF-κB和P53的判定方法TAK1和NF-κB以細胞質中出現棕黃色顆粒為陽性，P53以細胞核中呈現棕黃色為陽性，低倍鏡下選擇上皮細胞集中的區域，于400倍下進行計數，共選擇5個高倍視野的細胞，計算陽性率，并取平均值，以<10%定為陰性，以≥10%定為陽性。

1.4統計學方法應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗或線性相關分析。

2　結　果

2.1二組中TAK1、NF-κB和P53陽性率的比較二組中TAK1、NF-κB和P53的陽性率差別均有統計學意義。見表1。

表1　二組中TAK1、NF-κB和P53陽性率的比較〔n(%)〕

2.2觀察組中TAK1、NF-κB和P53陽性率在不同臨床特征中的比較觀察組中TAK1、NF-κB和P53的陽性率均與腫瘤的分化程度、最大徑和脈管內癌栓密切相關。見表2。

表2　觀察組中TAK1、NF-κB和P53陽性率在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2.3觀察組中TAK1、NF-κB和P53的相關性TAK1和NF-κB(r=0.46，P<0.05)具有正相關性。其他指標之間未見明顯相關性(P>0.05)。

3　討　論

肝細胞癌患者既往或現在有不同原因的慢性肝病史，發生腫瘤的臨床危險因素主要是肝硬化〔7，8〕。腫瘤的大小與大體特征與肝硬化有關，有肝硬化的腫瘤可表現為膨脹性生長，伴有纖維包膜和腫瘤內分隔；而無肝硬化的腫瘤趨向于呈巨塊型和無包膜。不同程度的浸潤性生長、門靜脈瘤栓和肝內轉移在進展期腫瘤很常見，并呈現不同的肉眼形態。腫瘤的另一個特征是侵犯血管，尤其是門靜脈。肝內轉移多是由于腫瘤通過門靜脈分支擴散所致。組織病理學顯示病變由類似肝細胞的腫瘤細胞組成，間質由襯覆單層內皮細胞的血竇樣腔隙組成，與正常的肝組織血竇內皮細胞不同，其內皮細胞免疫組化CD34和F8因子陽性。超微結構觀察顯示在內皮細胞和腫瘤細胞小梁間有基底膜樣結構，這種腔隙似毛細血管，此種特征也稱為毛細血管化。腫瘤的病變結構表現為小梁狀、假腺樣和腺泡型、實性型和硬化型，病變的形成和進展中均可見相關蛋白的表達失調〔9〕。本實驗提示TAK1、NF-κB和P53高表達是肝細胞癌形成的重要促進因素。TAK1近年來研究較多，被認為與腫瘤的形成有關〔10，11〕。生理狀態下MAPKs主要調控細胞生長、分化、凋亡、促進細胞發育和維持組織內環境穩定，病理狀態下則參與腫瘤性病變，尤其是炎性相關腫瘤的發生發展〔12〕。近來研究顯示TAK1的表達可能與NF-κB有一定的協同作用〔13，14〕。NF-κB是近年來發現的一種轉錄因子，其表達與腫瘤的浸潤、黏附、轉移行為密切相關〔15，16〕。有學者認為NF-κB引起腫瘤細胞浸潤、黏附、轉移的原因是由于NF-κB激活后導致許多黏附分子、血管生成因子及基質金屬蛋白酶釋放，同時促進腫瘤性的增殖反應引起的〔17，18〕，其作用具有多元性。P53分為野生型和突變型，野生型P53主要通過細胞周期阻滯、DNA修復和凋亡等機制維持正常細胞的生長，進而抑制細胞的惡性增殖〔19〕。而突變型P53則喪失了其抑癌作用，促使細胞進入增殖周期，使細胞分化能力下降，凋亡受到抑制，形成永生化，進而形成腫瘤〔20，21〕。本文提示TAK1、NF-κB和P53的三種蛋白參與腫瘤的分化過程，三者高表達使腫瘤的分化發生障礙，腫瘤細胞趨于幼稚。三種蛋白高表達時腫瘤生長加速，腫瘤的體積增大，浸潤能力增強。三種蛋白高表達時參與腫瘤細胞的脈管浸潤，腫瘤易于遷移及播散。TAK1和NF-κB具有正向協同作用。其協同作用機制有學者認為TAK1去磷酸化負向調控腫瘤壞死因子和白細胞介素1，進而誘導NF-κB的激活而形成腫瘤〔22，23〕。但是其具體機制有待更多實驗證實。

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〔2015-01-22修回〕

(編輯杜娟)

朱玉峰(1985-)，男，碩士，主治醫師，主要從事普外微創肝膽疾病研究。

R735

A

1005-9202(2016)17-4246-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.17.054

1遼寧醫學院附屬第一醫院超聲科