乳腺浸潤性導管癌中NM23、基質金屬蛋白酶-2和-14的表達及意義

李　歡　王世全　焦　健

(錦州市婦嬰醫院乳腺科，遼寧　錦州　121000)

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乳腺浸潤性導管癌中NM23、基質金屬蛋白酶-2和-14的表達及意義

李歡王世全焦健

(錦州市婦嬰醫院乳腺科，遼寧錦州121000)

目的檢測乳腺浸潤性導管癌術后組織中腫瘤轉移抑制基因NM23-H1(NM23)、基質金屬蛋白酶(MMP)-2和MMP-14的表達，分析其在不同臨床病理特征中的意義。方法65例乳腺浸潤性導管癌作為觀察組，40例乳腺原位癌作為對照組，40例正常乳腺組織作為正常對照組。三組術后均常規石蠟包埋組織，并應用免疫組化SP法檢測組織中NM23、MMP-2和MMP-14的表達。結果三組中NM23、MMP-2和MMP-14的陽性率差別有統計學意義，觀察組中NM23、MMP-2和MMP-14表達的陽性率與Ki67的表達、脈管侵犯和淋巴結轉移密切相關，MMP-2和MMP-14表達的陽性率與胸壁侵犯有關。相關性分析顯示觀察組中NM23和MMP-2、MMP-14的表達具有負相關性。結論乳腺浸潤性導管癌中NM23低表達、MMP-2和MMP-14高表達對促進腫瘤的形成和進展過程有重要意義，NM23與MMP-2、MMP-14可能具有一定的協同作用。

乳腺；浸潤性導管癌；NM23；基質金屬蛋白酶(MMP)-2；MMP-14

浸潤性導管癌是乳腺腫瘤中最常見的類型，其病因學涉及飲食、生育和激素失衡等，近來人們將其發生和進展與基因和蛋白表達失衡聯系在一起〔1，2〕。腫瘤轉移抑制基因NM23-H1(NM23)是腫瘤轉移抑制基因，其發生突變、缺失或表達異常可引起下游蛋白的異常表達，參與腫瘤的浸潤和轉移過程〔3〕。基質金屬蛋白(MMPs)家族是細胞外基質的重要調節蛋白，其高表達時可以使腫瘤細胞外基底膜溶解，使腫瘤轉移的通道被打開，細胞易于遷移〔4，5〕。本研究檢測乳腺浸潤性導管癌中NM23、MMP-2和-14的表達，關注其相關性及臨床病理學意義。

1　材料和方法

1.1臨床資料我院2013年1月至2014年12月行乳腺癌改良根治術的患者作為觀察組，術后留取蠟塊組織，共65例，年齡41～76歲，平均(62.4±6.5)歲。納入均符合WHO中的診斷標準，并經兩位病理學主治醫師閱片確診。40例乳腺原位癌作為對照組，年齡38～71歲，平均(59.4±6.7)歲。40例正常乳腺組織作為正常對照組，年齡38～72歲，平均(56.9±6.8)歲。三組常規資料無明顯差別，具有可比性。

1.2NM23、MMP-2和MMP-14表達的檢測采用免疫組化SP法檢測，應用二氨基聯苯胺(DAB)染色，嚴格按說明書進行操作，做好質量控制。

1.3NM23、MMP-2和MMP-14結果的判斷方法NM23、MMP-2和MMP-14均以細胞質中呈現棕黃色為陽性細胞，選擇5個高倍視野(×400倍)，取平均值作為陽性率，<10%為陰性，≥10%為陽性。

1.4統計學方法應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗或線性相關分析。

2　結　果

2.1三組中NM23、MMP-2和MMP-14陽性率的比較正常對照組、對照組、正常對照組NM23、MMP-2和MMP-14陽性率的表達呈趨勢性改變。見表1。

表1　三組NM23、MMP-2和MMP-14陽性表達比較〔n(%)〕

2.2NM23、MMP-2和MMP-14在觀察組不同臨床特征中的表達觀察組中NM23、MMP-2和MMP-14表達的陽性率與Ki67的表達、脈管侵犯和淋巴結轉移密切相關，MMP-2和MMP-14表達的陽性率與胸壁侵犯有關。見表2。

表2　NM23、MMP-2和MMP-14陽性表達在觀察組不同臨床特征中的表達〔n(%)〕

2.3觀察組中NM23、MMP-2和MMP-14表達的相關性NM23和MMP-2(r=-0.45，P=0.031 0)、MMP-14(r=-0.47，P=0.024 6)呈負相關性。

3　討　論

乳腺浸潤性導管癌在乳腺癌中占據很大比例，腫瘤體積變化較大，病變可呈不規則星芒狀或結節狀，腫瘤邊緣常不明顯，質地常較硬。切開時有明顯的砂礫感，呈灰白色或伴有黃色條紋〔6〕。組織學上腫瘤細胞呈索狀、簇狀和小梁狀排列，部分病例腺管狀分化明顯。部分病例腫瘤細胞松散，彌漫性分布。彌漫性的病變和黏附性差的腫瘤更易于出現轉移。NM23基因定位于人17p21-22，全長8.5 kb，有5個外顯子與4個內含子，具有核苷二磷酸激酶活性、組氨酸蛋白激酶活性和絲氨酸自身磷酸化作用〔7〕。NM23參與腫瘤的侵襲轉移涉及細胞外基質蛋白酶、細胞表面黏附分子及血管生成的相關作用〔8〕。也有學者認為NM23可以調控WNT通路的作用，主要是對β-catenin的調節作用，引起細胞增殖活性的改變〔9〕。近來也有研究認為NM23可以調節MMPs的表達，并參與腫瘤相關蛋白的水解級聯反應，引起腫瘤細胞的侵襲性增加〔10〕。MMP-14在發揮作用時可以激活家族中的其他成員，主要是活化MMP-2和MMP-9，另外MMP-14 還可以降解細胞外基質的纖維支架〔11〕，增強局部組織的纖維蛋白溶解作用，加速內皮細胞的遷移和血管內皮增殖及新生，促進腫瘤細胞的蔓延〔12〕。MMP-14在腫瘤中的作用方式可能更趨于多元化，也使腫瘤細胞具有高度的侵襲性〔13，14〕。

本實驗結果提示NM23是抑制腫瘤形成的蛋白，而MMP-2和MMP-14具有促進腫瘤形成的作用。三種蛋白異常表達參與腫瘤的增殖、脈管播散和淋巴道轉移，此種狀態也提示腫瘤處于進展期。MMP-2和MMP-14高表達參與腫瘤的直接蔓延。Biggs等〔15〕研究發現，NM23對微管蛋白組裝具有一定的調節功能，進而調節抑制潛能。當其表達下調后，NM23對微管結構的影響能力下降，轉移的潛能增高。此種作用的機制與NM23具有核苷二磷酸激酶活性有密切關系。核苷二磷酸激酶可以將微管蛋白上的二磷酸鳥苷(GDP)轉化為三磷酸鳥苷(GTP)，如果GDP不能正常轉化形成GTP，微管末端的tubulin與GDP可以有效地結合，使微管處于解聚狀態。如果微管不能聚合，細胞也不能形成正常的形態而發生遷移，進而出現腫瘤細胞的播散和轉移。本文結果提示NM23均與MMP-2、MMP-14具的協同負向作用，也間接提示NM23在低表達時可以直接或間接引起細胞外基質蛋白酶的升高，對細胞外基質和基底膜屏障形成明顯的破壞，腫瘤易于離開原發部位，突破基底膜形成轉移〔16，17〕。但是NM23與MMP-2、MMP-14協同作用的關系有待闡明。

1丁洪基，李愛英，李新功，等.乳腺腫瘤中c-erbB-2和nm23蛋白的表達及臨床意義〔J〕.腫瘤防治研究，2000；27(6)：444-6.

2申培紅，陳奎生，李珊珊，等.乳癌組織中nm23、MMP-2、TIMP-2蛋白的表達〔J〕.鄭州大學學報(醫學版)，2007；42(2)：356-8.

3許桂祥，安鑫，杜驍，等.膽囊癌組織中MMP-9和nm23-H1的表達與浸潤轉移的關系〔J〕.中國現代醫生，2009；47(32)：9-11.

4Faber A，Sauter A，Hoedt S，etal.Alteration of MMP-2 and-14 expression by imatinib in HPV-positive and-negative squamous cell carcinoma〔J〕.Oncol Rep，2012；28(1)：172-8.

5Hernandez-Perez M，El-hajahmad M，Massaro J，etal.Expression of gelatinases (MMP-2，MMP-9) and gelatinase activator (MMP-14) in actinic keratosis and in in situ and invasive squamous cell carcinoma〔J〕.Am J Dermatopathol，2012；34(7)：723-8.

6李遠東，李宇芳，杜日昌，等.乳腺浸潤性導管癌中MMP-2和nm23的表達〔J〕.中外醫學研究，2011；9(22)：5-7.

7龔道軍，謝志微.肝細胞癌組織中MMP-9，CD44V6與nm23-H1表達的相關性及意義〔J〕.肝膽胰外科雜志，2006；18(6)：352-4.

8曹歌，沈志祥，黃杰安，等.結直腸癌中CD44V6、MMP-2、nm23-H1表達與臨床病理的相關性研究〔J〕.腫瘤防治研究，2002；29(1)：53-5.

9葉蘇娟，朱文.Nm23-H1調控腫瘤侵襲轉移分子機制研究進展〔J〕.生命科學，2009；21(1)：107-11.

10郭漢斌，陳秀玲，薄愛華，等.膀胱癌中MMP-2與nm23的表達及其臨床意義〔J〕.現代腫瘤醫學，2004；12(2)：95-6.

11涂燕君，陳軍，劉昌盛，等.侵襲性垂體腺瘤MRI表達與MMP-9、MMP-14、VEGF表達的相關性研究〔J〕.武漢大學學報(醫學版)，2010；31(5)：671-5.

12Roebuck MM，Helliwell TR，Chaudhry IH，etal.Matrix metalloproteinase expression is related to angiogenesis and histologic grade in spindle cell soft tissue neoplasms of the extremities〔J〕.Am J Clin Pathol，2005；123(3)：405-14.

13Mohammad MA，Zeeneldin AA，Abd Elmageed ZY，etal.Clinical relevance of cyclooxygenase-2 and matrix metalloproteinases (MMP-2 and MT1-MMP) in human breast cancer tissue〔J〕.Mol Cell Biochem，2012；366(1-2)：269-75.

14周良，馬海，楊紅春.結腸腺癌中MMP-14和VEGF的表達及意義〔J〕.海南醫學院學報，2011；17(4)：465-6.

15Biggs J，Hersperger E，Steeg PS，etal.A Drosophila gene that is homologous to a mammalian gene associated with tumor metastasis codes for a nucleoside diphosphate kinase〔J〕.Cell，1990；63(5)：933-40.

16Yan T，Lin Z，Jiang J，etal.MMP14 regulates cell migration and invasion through epithelial-mesenchymal transition in nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Am J Transl Res，2015；7(5)：950-8.

17Munkert A，Helmchen U，Kemper MJ，etal.Characterization of the transcriptional regulation of the human MT1-MMP gene and association of risk reduction for focal-segmental glomerulosclerosis with two functional promoter SNPs〔J〕.Nephrol Dial Transplant，2009；24(3)：735-42.

〔2015-01-23修回〕

(編輯杜娟)

李歡(1981-)，女，碩士，主治醫師，主要從事乳腺疾病研究。

R737.9

A

1005-9202(2016)17-4232-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.17.047