雞α-干擾素對羅曼雛雞免疫功能的影響

廖秀華　福建省建陽區麻沙鎮三農服務中心　354200

雞α-干擾素對羅曼雛雞免疫功能的影響

廖秀華福建省建陽區麻沙鎮三農服務中心354200

為研究雞α-干擾素對羅曼雛雞免疫功能的影響，將60羽健康1日齡羅曼雛雞隨機分為2組，即對照組、試驗組。試驗組雞于1日齡胸肌注射雞-α干擾素，0.5 mL/羽；對照組雞同期每羽注射生理鹽水0.5 mL。試驗開始后，于第4 d、8 d、12 d、16 d、20 d對雞進行翅下靜脈采血，并于20日齡剖殺摘取免疫器官。研究表明，雞注射α-干擾素后，其外周血液ANAE+T淋巴細胞百分率和雞脾相對濕重顯著高于對照組，雞α-干擾素在一定范圍內可提高雛雞免疫功能。

干擾素雞免疫功能

干擾素（Interferon，IFN）是1957年英國和瑞士科學家在利用雞胚絨毛尿囊膜研究流感干擾現象時發現的一種細胞因子［1］，并根據其可干擾病毒的復制而命名，其對病毒性疾病、惡性腫瘤以及增強機體免疫調節能力有明顯效果。20世紀80年代，隨著基因工程技術的發展，人的干擾素（α、β和γ）已被成功克隆和表達，并廣泛應用于醫學臨床［2-4］。與哺乳動物相似，雞的干擾素也有α、β和γ三種類型。1994年，sekellick等首次成功克隆和表達了雞IFN-α（ChIFN-α）基因，并進行了結構分析［5］。目前已知ChIFN-α是無內含子的多拷貝基因，它與ChIFN-β有共同的受體，但抗病毒活性ChIFN-α比ChIFN-β強20倍［6-7］。

1　材料和方法

1.1試驗動物1日齡羅曼雛雞60羽。

1.2試驗方法試驗雞適應性飼養至3日齡后，隨機分為2組：A組（對照組）和B組（試驗組），每組30羽。其中，A組胸肌注射生理鹽水，B組胸肌注射干擾素；每組注射劑量均為0.5 mL/羽。于試驗后第4 d、8 d、12 d、16 d和20 d，各組隨機抽取雞6羽，采血檢測雞外周血液ANAE+T淋巴細胞百分率。于第20 d結束試驗，逐羽稱活重，計算脾和法氏囊相對重量。

1.3外周血液ANAE+T淋巴細胞計數方法每組雞翅靜脈采血、涂片，采用mueller非特異性酸性α-醋酸荼酯酶染色鏡檢，油鏡下計數200個T淋巴細胞，并計算ANAE+T淋巴細胞百分率。

1.4脾與法氏囊相對重量計算方法逐羽稱活重，剖殺后取脾和法氏囊并分別稱其濕重，按下列公式計算脾和法氏囊相對重量。脾（或法氏囊）相對重量（‰）=脾（或法氏囊）濕重/試驗雞重×1000。

2　結果

2.1雛雞外周血液ANAE+T淋巴細胞百分率結果B組外周血液ANAE+T淋巴細胞百分率明顯上升；B組外周血液ANAE+T淋巴細胞百分率于第8 d、12 d、16 d和20 d顯著高于A組（P＜0.05），見表1。

表1　各組不同時期血液ANAE+T淋巴細胞百分率（X±SD）

2.2雛雞脾和法氏囊的相對濕重結果B組雞脾的相對濕重顯著高于A組（P＜0.05），B組雞法氏囊的相對濕重較A組高，但差異不顯著，見表2。

表2　試驗雞脾和法氏囊的相對濕重（X±SD）

淋巴細胞增殖能力是評價機體細胞免疫功能的一個重要指標，其增殖能力的高低直接反映機體的細胞免疫水平［8］。有研究報道［9］，注射雞α-干擾素能明顯刺激機體外周血淋巴細胞的活性功能。本試驗結果表明，試驗組雞除4日齡T淋巴細胞百分比與對照組差異不顯著，其他日齡均差異顯著，與目前主流研究結果相一致。

胸腺是機體的免疫器官，能儲存分泌免疫細胞和免疫分子等；法氏囊是禽的中樞免疫器官，能誘導B細胞分化和成熟；脾臟的白髓部分參與免疫功能，是免疫應答的主要場所［8］。因而，法氏囊指數、脾臟指數和胸腺指數反映了機體三個主要免疫器官的生長發育程度，是從免疫器官發育的角度評價機體免疫狀態的指標［10］。試驗結果表明，注射雞α-干擾素組與空白組比對，試驗組雞脾相對濕重差異顯著，而法氏囊相對濕重略有提升，但差異不顯著，這與常凱等［9］研究結果相似。該結果可能意味著，干擾素對肉雞機體免疫器官的影響主要體現在胸腺上，具體需設計試驗進一步驗證。

4　小結

羅曼雛雞注射ChIFN-α，可改善其免疫功能，提高抗病能力。

［1］Isaacs A，Lindenmann J.Virus Interference I：The Interferon［J］.Proc R Soc B，1957，147：258-273.

［2］吳志光，夏春.雞Ⅱ型干擾素存在亞型［J］.動物醫學進展，2001（1）：50-54.

［3］吳志光，夏春，汪明，等.QIAexpress系統高效表達雞γ-干擾素cDNA的研究［J］.中國農業大學學報，2002，7（3）：89-93.

［4］戴建華，秦愛建，許金俊，等.雞γ干擾素基因的克隆及其在原核和真核系統中的表達［J］.中國預防獸醫學報，2003，25（4）：249-253.

［5］Sekellick M J，Ferrandino A F，Hopkins D A，et al.Chicken Interferon Gene：Cloning，Expression，and Analysis［J］.Journal of Interferon Research，1994，14（2）：71-79.

［6］Sick C，Schultz U，Staeheli P.A family of genes coding for two serologically distinct chicken interferons.［J］.Journal of Biological Chemistry，1996，271（13）：7635-7639.

［7］李鳳華，林云圣，崔麗，等.家禽基因工程干擾素生物學作用及其在禽病防治中的應用［J］.山東家禽，2004（7）：43-45.

［8］楊漢春.獸醫免疫學［M］.3版.北京：中國農業出版社，2003.［9］常凱，馬鳳龍，單虎.重組雞α-干擾素對雞免疫功能的影響［J］.中國農學通報，2009，25（14）：15-17.

［10］夏春，吳丹，阮小飛.禽類基因工程重組干擾素研究進展［J］.動物醫學進展，2003，24（4）：39-41.

Effect of interferon-α on immune function of chicken

Liao Xiuhua
（Three-rural service center of Masha town，Jianyang district，Fujian 354200）

The objective of this experiment was to study the effects of recombinant chicken interferon-α on proliferation of peripheral blood lymphocytes，the immune organ index and cytokine levels of broilers.60 one-day-age healthy AA broilers were divided into two groups randomly which were control group and test groupⅠ.The test groups were injected with interferon 0.5 mL at 1 days age.At the same time，the control group was injected with 0.5 mL PBS only.Results showed that∶the percentage of T ANAE+lymphocytes in peripheral blood and the relative wet weight of chicken spleen were significantly higher than that of normal saline group after the injection of interferon.These results indicated that chicken injection of interferon in a certain range can improve the chicken immune functions.

Interferon-α Chicken Immunity

A

1003-4331（2016）05-0021-02