納豆芽孢菌劑消除小天鵝轉群應激的研究

陳 斌，劉立賢，張占俠，陳 葉，劉偉娟，李勇軍，車俊國

(石家莊市動物園管理處，河北石家莊 050200)

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納豆芽孢菌劑消除小天鵝轉群應激的研究

陳 斌，劉立賢，張占俠，陳 葉，劉偉娟，李勇軍，車俊國

(石家莊市動物園管理處，河北石家莊 050200)

[目的]在小天鵝放養初期飼喂納豆芽孢菌劑，研究納豆芽孢菌劑消除小天鵝轉群應激的臨床效果。[方法]在轉群小天鵝精飼料中加入納豆芽孢菌劑，納豆芽孢菌劑為精料量的10%，觀察小天鵝的精神狀態、體態行動、喙的顏色、羽毛色澤及成活率等。[結果]飼喂納豆芽孢菌劑16 d后，小天鵝的體質、糞便、采食量等指標顯著改善，圈養及外放后未見死亡。[結論]納豆芽孢菌劑能起到改善小天鵝轉群應激反應和降低死亡率的作用。

納豆芽孢菌劑；小天鵝；轉群應激

在動物園游禽的培育中，籠養幼禽長大到成年放養的這一轉群過渡階段，由于環境轉換、飼料改換等因素會誘發游禽產生嚴重的應激反應[1]，出現消化不良、腹瀉、感染等癥狀，導致游禽體質下降，甚至出現死亡[2]。據調查，小天鵝的死亡率在30%以上，最高時達100%。游禽應激反應的各種癥狀，除了細菌性感染癥狀外，還存在著腸道消化環境紊亂、飼料消化率低、病原菌感染、營養不良、腸道菌群紊亂等現象[3]。筆者采用添加納豆芽孢菌劑飼喂小天鵝的方法，消除轉群應激對機體的危害。

1　材料與方法

1.1試驗時間與試驗地點2015年3月18日至4月4日，在石家莊市動物園天鵝湖湖心島進行試驗。

1.2試驗動物小天鵝隸屬雁形目(Anseriformes)鴨科(Anatidae)天鵝屬(Cygnus),共7只，約1歲，已斷翅。試驗前共8只小天鵝，為2014年引進，至試驗時約1歲，引進后斷翅，在籠舍內越冬，未出現死亡。3月3日8只小天鵝轉入天鵝湖湖心島，露天圈養，3月12日(試驗前)有1只小天鵝因發病死亡，參與試驗的小天鵝為7只。

1.3方法

1.3.1精飼料配方。精飼料配方組成如下：玉米面61.81%、魚粉 5.15%、酵母粉 3.30%、磷酸氫鈣 7.00%、豆粕7.42%、麩皮 14.42%、多維 0.08%、鹽 0.31%、痢菌凈 0.51%。

1.3.2納豆芽孢菌劑。納豆芽孢菌劑是枯草屬納豆芽孢桿菌以非菌數生長方式深層發酵后的全部活性發酵產物。在發酵過程中，主要以納豆芽孢桿菌含量作為目標有效成分的檢測指標[4]。納豆芽孢菌劑中對養殖動物可以起到一定生理功效的成分主要包括γ-多聚谷氨酸、納豆激酶、小肽分子和納豆芽孢桿菌活菌[5]。納豆芽孢桿菌的成分組成如下：γ-多聚谷氨酸25 mg/g、納豆激酶2 000 CFU/g、小肽類30 mg/g、納豆芽孢桿菌活菌數3×108個/g。

1.3.3飼料及飼喂管理。飲用清潔水，精飼料的飼喂量約400 g/只，青綠飼料自由采食，自由飲水。從3月18日開始，對7只參試小天鵝投喂納豆芽孢菌劑，混合精飼料投喂，投喂量為精料量的10%。

1.3.4觀測指標。觀察試驗期間小天鵝體質、糞便、采食量等臨床變化。最后，對死亡小天鵝進行剖檢。

2　結果與分析

2.1體質的變化健康的小天鵝活潑好動、體況良好，不易捕捉、反抗有力，喙基部為亮黃色。試驗前小天鵝不活潑，人接近時不能做出明顯反應，及時逃跑；少有鳴叫，叫聲細弱；縮頭委身，羽毛凌亂；容易捕捉，反抗無力；喙基部為淺黃色，其中3只近乎白色。試驗后，小天鵝體質改善情況。試驗第12天(3月30日)，小天鵝體質明顯改善。精神活潑，人接近時能迅速逃跑；鳴叫洪亮，挺胸抬頭，毛色油亮，喙的基部黃色亮麗，原來2只喙基部為白色的小天鵝，喙基部也開始變成淡黃色。試驗第12天，由于飼養需要，進行1次轉籠。捕捉時發現小天鵝反抗激烈，力量很大，不易捕捉。試驗后動物體質明顯增強。

2.2糞便的變化試驗前，飼養場地所見糞便均為水樣和稀粥樣，呈灰白色或綠色，8只小天鵝均出現不同程度的消化不良及腹瀉癥狀。試驗后，糞便情況明顯改善。試驗第10天(3月28日)后所有糞便成型，顏色為黃色，場地內完全不見綠色和灰色稀便。這說明試驗后小天鵝的消化功能得到明顯改善。

2.3采食量的變化試驗第6天(3月24日)以前，沒有出現飼料剩余或剩余飼料很少。試驗第6～12天(3月24日至30日)發現飼料逐漸出現剩余，剩余量越來越多，第12天剩余飼料占飼料量的20%。3月30日至4月4日，小天鵝臨床上未出現明顯變化，飼料剩余量無變化。

2.4外放情況試驗第16天(4月4日)小天鵝標記后外放天鵝湖，至6月28日未出現死亡。

2.5剖檢結果3月12日(試驗前)死亡小天鵝的情況，雌性，體重2 kg，死前排綠色水便，喙基部白色；腹腔積液，腸道腫脹蒼白(圖1A)；肝臟腫大，彌漫性出血，有干酪樣壞死灶(圖1B)。

注：A.腹腔和腸道病變；B.肝臟病變。Note: A.Abdominal cavity and intestinal lesions;B.Hepatic pathological changes.圖1　死亡小天鵝的剖檢結果Fig.1　Autopsy results of dead little swan

3　討論與結論

(1)從飼喂納豆制劑前后小天鵝的行為、體態、毛色、喙基部色澤等來看，試驗期間動物體質明顯增強。以前，外放前圈養階段動物體質會有所下降。小天鵝體質迅速改善，這是蛋白質沉積迅速改善的現象。蛋白質沉積的改善，與納豆芽孢菌劑中的小肽類成分有關。賀光祖等[6]研究表明小肽可以不經消化直接被腸上皮細胞吸收，加速機體對蛋白營養的利用，非常有利于營養不良動物補充蛋白質，用以修復受損組織，提高機體免疫。幼齡禽類在轉群中因應激導致體質下降時，小肽就成為幼禽的優質蛋白營養源，有利于迅速恢復體質。納豆激酶也起著不可忽視的作用。納豆芽孢桿菌在深層發酵大豆蛋白時，產生專門針對大豆中小分子量蛋白的消化酶。對于幼齡動物而言，大豆蛋白中小分子量的“大豆球蛋白”和“β-伴大豆球蛋白”是導致幼齡動物腸道產生過敏反應的直接原因，也是即將進入放養階段幼禽產生消化不良的原因之一[7]。納豆激酶能夠針對這種小分子量的球蛋白進行水解，減少了腸道過敏反應[8]，有助于腸胃正常消化吸收，也增強了蛋白質的沉積。

(2)投喂納豆芽孢菌劑后，小天鵝首先表現出糞便狀況迅速改善。野生鳥類不同于家禽，對疾病和應激更加耐受，一旦表現出不良狀態，往往器官病變較家禽更為嚴重，甚至是不可逆的，所以投喂納豆制劑后，糞便的改善速度慢于家禽。通過剖檢結果可以看出，死亡小天鵝的腸道蒼白，肝臟腫大，說明動物在飼養中消化系統受損嚴重，外在表現最明顯的就是糞便異常。投喂納豆制劑，糞便迅速改善，可認為是消化系統功能的快速恢復。這有利于營養的吸收，抵御腸道致病菌的侵害。根據納豆芽孢菌劑的功效成分作用機理分析，糞便狀況出現迅速改善與γ-多聚谷氨酸的生理功效有關。γ-多聚谷氨酸具有與消化道粘膜上皮黏液凝膠層(糖蛋白)類似生理功能，可以在腸壁分泌黏液凝膠層不足的情況下，起到補充和替代作用，因此也將其稱為人工黏蛋白。腹瀉的小天鵝消化道粘膜上皮，因為免疫反應、腸腺分泌功能降低、食物機械磨損，均存在小腸絨毛萎縮以及黏液凝膠層不足的現象，γ-多聚谷氨酸迅速覆蓋受損小腸絨毛并黏附其表面，避免食物、胃酸和消化酶的直接接觸性刺激，使因這些刺激而收縮緊張腸道舒緩，進而促使正常部位的小腸絨毛恢復吸收功能，因此減少了水分排泄而使糞便改善；γ-多聚谷氨酸的覆蓋也減少了致病菌如沙門氏菌、大腸桿菌等侵入粘膜上皮細胞，使得病原性的腹瀉因此減輕。此外，由于飼料中含有抗菌藥物痢菌凈，因此可以判定活菌成分與這種改善的關系不大。

(3) 飼料出現剩余現象的原因主要包括以下方面：一方面，改善消化系統功能會增強消化吸收能力，使得動物所需營養未變的情況下，飼料攝入量減少；另一方面，由于納豆芽孢菌劑添加量較大，也可能制劑本身提供一部分營養，代替了原來飼料供給。這種狀況明顯出現在飼喂10 d后，應該是消化系統功能改善的一個過程。

綜上所述，納豆芽孢菌劑針對幼禽在轉群應激中出現的各種不良情況，如腸道消化環境紊亂、飼料消化率低、病原菌感染、營養不良、腸道菌群紊亂等，另外，納豆芽孢菌劑的主要功效成分均為發酵產物，不受抗菌藥物的影響，在實際應用中可以不考慮飼料中抗菌藥物的影響。

因此，納豆芽孢菌劑能起到消除幼禽轉群應激的作用。

在小天鵝外放前圈養這段時間內投喂納豆芽孢菌劑，能在短時間內明顯提高體質，改善消化吸收能力，減少應激造成的不良反應。

[1]王興金.動物園人工湖鳥類管理探討[J].野生動物，2012,33(5):294-296.

[2]王萬華,王志永,李勇軍.動物園動物的應激及其管理[J].野生動物，2009，30(6):318-320.

[3]張強,趙鵬鵬,金學林,等.圈養珍稀野生動物應激性疾病及防治[J].動物醫學進展，2011,32(2):129-133.

[4]董小英，唐勝球.納豆芽孢桿菌的制備及其對番鴨生產性能的影響[J].廣東農業科學，2011(22):129-131.

[5]耿春銀,張敏，孫健,等.納豆菌微生態制劑替代抗生素用于斷奶仔豬飼料的研究[J].中國飼料,2010(15):24-27．

[6]賀光祖,譚碧娥,肖昊，等.腸道小肽吸收利用機制及其營養功能[J].動物營養學報,2015,27(4):1047-1054.

[7]劉海軍,李永明,徐子偉,等.大豆蛋白過敏對仔豬生長和血液生化指標的影響[J].浙江農業科學,2012(4):576-578.

[8]程守強,梁鳳來,王仁靜,等.納豆激酶的研究進展[J].微生物學雜志，2005,25(3):69-73.

Study on Eliminating Groupshift Stress Effect of Bacillus subtilis natto to Cygnus columbianus

CHEN Bin,LIU Li-xian,ZHANG Zhan-xia et al

(Shijiazhuang Zoo Management Office,Shijiazhuang,Hebei 050200)

[Objective]The aim was to study eliminating groupshift stress effect of Bacillus subtilis natto to Cygnus columbianus by adding Bacillus subtilis natto in feed in the initial stocking.[Method]In the initial stocking,adding Bacillus subtilis natto in feed with amount of concentrated feed 10%,the mental state,body weight,body condition action,beak color,plumage and survival rate of Cygnus columbianus was observed.[Result]After feeding Bacillus subtilis natto 16 days,body constitution,feces,feed intake and other clinical indicators of Cygnus columbianus were significantly improved,and was no death in captivity and outside.[Conclution]Bacillus subtilis natto can eliminate groupshift stress effect to Cygnus columbianus and reduce mortality.

Bacillus subtilis natto;Cygnus columbianus;Groupshift stress

石家莊市科學技術研究與發展計劃項目(161500182A)。

陳斌(1980- )，男，河北保定人，獸醫師，碩士，從事野生動物疾病預防與治療。

2016-07-14

S 864.5

A

0517-6611(2016)25-122-02