黃河三角洲2種菊科植物提取物及其復配的抑菌活性

姜翠鳳， 王書平， 趙 永， 王淑娟， 董 杰， 宿 斌

(濱州學院生命科學系，山東濱州 256603)

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黃河三角洲2種菊科植物提取物及其復配的抑菌活性

姜翠鳳， 王書平*， 趙 永， 王淑娟， 董 杰， 宿 斌

(濱州學院生命科學系，山東濱州 256603)

[目的]明確2種菊科植物的抑菌活性。[方法]以干苦菜、黃花蒿作為供試材料，大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌作為供試細菌，采用濾紙片法通過抑菌圈的大小研究干苦菜、黃花蒿及其復配提取液的抑菌活性。[結果]在供試濃度為0.1 g/mL時，2種植物的提取液及2種植物的復配混合液對枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌均有抑菌作用，并且每1種植物提取液對至少1種菌的抑菌率大于70%，其中黃花蒿提取液對金黃色葡萄球菌的抑菌率大于80%，苦菜提取液對大腸桿菌的抑菌率大于85%，苦菜與黃花蒿提取液的復配混合液對大腸桿菌的抑菌率約為100%。[結論]苦菜、黃花蒿有較好的抑菌活性，可進一步研究開發。

苦菜；黃花蒿；復配；抑菌效果

隨著人類生活水平的提高，人們對周邊食物的健康問題日益關注，植物農藥也逐漸成為被關注的焦點。中國藥學專家屠呦呦通過從青蒿中提取的青蒿素真正意義上造福人類。楊順義[1]對14種植物的提取液進行了初步分析[1]。劉利本等[2]對蒲公英的抑菌作用進行了初步比較。近幾年的生物仿制藥逐步踏入高峰，趙自葉[3]對半胱氨酸蛋白酶IdeS進行了提高抗體結構的分辨能力研究。目前，關于苦菜、黃花蒿活性成分的研究已有報道[4]。筆者采用濾紙片法研究了干苦菜、黃花蒿對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌3種細菌的抑菌活性，旨在為植物源農藥研究提供理論依據。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1供試植物。苦菜、黃花蒿：將采取的植物于烘箱內烘干，將所采取的植物粉碎，粉碎后采用水浴煮沸法獲得提取液，粉碎后密封保存備用。

1.1.2供試菌種。大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌菌種均由濱州學院生命科學系保藏。

1.2方法

1.2.1提取方法。

1.2.1.1苦菜(黃花蒿)水煮提取液的制備。稱取干苦菜黃花蒿100 g于研缽中研磨至粉末狀，去部分根，加入200 mL蒸餾水，浸泡過夜，微波低火煮沸20～30 min，濾紙過濾，重復2次，合并濾液，濃縮至100 mL，干苦菜(黃花蒿)含量終濃度為1 g/mL。過濾除菌， 4 ℃保存備用。

1.2.1.2干苦菜(黃花蒿)醇提提取液的制備。稱取干苦菜(黃花蒿)100 g于研缽中研磨至粉末狀，去部分根，用80%乙醇200 mL浸泡過夜，微波低火煮沸20～30 min，濾紙過濾，重復2次，合并濾液，濃縮至100 mL，干苦菜(黃花蒿)含量終濃度為1 g/mL。過濾除菌，4 ℃保存備用。

1.2.1.3復配溶液的制備。將抑菌效果較好的水提苦菜提取液和醇提黃花蒿提取液混合，獲取復配溶液。

1.2.2最小抑菌濃度的檢測。采用二倍稀釋法。取帶塞的試管，每種提取藥液1列，每列11個試管，除第1個試管外其他試管加入2 mL無菌蒸餾水，第1的24管中藥液加入4 mL，混勻后，吸取2 mL混合液加入第2管中，混勻后，再吸取2 mL混合液加入到第3管中，依次二倍稀釋至第9管，第10管棄去2 mL；第10管作為生長對照，37 ℃培養24～36 h，以無細菌生長的最低濃度為最小抑菌濃度(MIC) 。

1.2.3抑菌圈測定試驗。采用6 mm濾紙片法進行抑菌試驗。配制普通瓊脂培養基，121 ℃、0.1 kPa條件下滅菌20 min，待其冷卻至80 ℃以下后，倒80個平板，每個濃度的1種提取方法的平板為4份，每份培養基上呈三角狀放6 mm濾紙片若干，用移液槍移取每個濃度的藥液提取液2 mL置上，37 ℃培養24 h左右，觀察其結果，測定抑菌圈的大小，重復2～3次。

2　結果與分析

2.1最小抑菌濃度的測定結果由圖1可知，苦菜、黃花蒿提取液對大腸桿菌、枯草桿菌、金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度均在10%以下，黃花蒿對大腸桿菌的抑菌效果較小，達2.5%，而干苦菜的最小抑菌濃度則為3.9%；干苦菜對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度較大，達7.8%。說明黃花蒿與干苦菜對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌均有較強的抑菌作用。

2.2抑菌濃度的測定結果[5]由表1可知，苦菜與黃花蒿的提取液對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌均有抑菌作用。苦菜水提取液對大腸桿菌的作用較強烈，抑菌圈直徑達9.498 mm，黃花蒿醇提液對金黃色葡萄球菌的抑菌作用較強，抑菌圈直徑達10.833 mm，而黃花蒿和苦菜復配混合液的抑菌作用更強，抑菌圈平均直約10 mm。

圖1　2種菊科植物的MICFig.1　MIC of two Compositae plants

3　結論

苦菜、黃花蒿的提取液對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均有抑菌效果，并且抑菌率在70%以上。苦菜的水提取液比醇取提液的抑菌作用較強，黃花蒿的醇提液比水提液的抑菌作用較強，但是苦菜和黃花蒿的復配混合液抑菌效果較苦菜、黃花蒿提取液分別抑菌作用更強。該試驗結果為今后關于苦菜、黃花蒿的研究奠定了基礎。

表1　苦菜不同加工方法制備藥液的抑菌效果

[1] 楊順義.蒼耳、狼毒等植物提取物抑菌活性的初步研究[D].蘭州：甘肅農業大學，2003.

[2] 劉利本,平家奇,高海飛,等.蒲公英不同部位提取物體外抑菌作用的比較[J].延邊大學農學學報,2010(1):65-68.

[3] 趙自葉.半胱氨酸蛋白酶IdeS的原核表達、純化、活性鑒定及應用[D].聊城：聊城大學，2014.

[4] 吳靜.黃花蒿的抑菌活性及有效成分的初步分離研究[D].重慶：西南大學，2008.

[5] 史冬燕.菏澤地區2種菊科植物的抑菌作用研究[J].安徽農業科學，2009,37(17):7986-7987.

The Antibacterial Activity of 2 Compositae Extracts and Compound in the Yellow River Delta

JIANG Cui-feng, WANG Shu-ping*, ZHAO Yong et al

(Department of Life Science, Binzhou University, Binzhou, Shandong 256603)

[Objective] The aim was to determine the antibacterial activity of 2 Compositae plants.[Method] With maror, annua as test materials,Escherichiacoli,BacillussubtilisandStaphylococcusaureusas tested bacterias, using filter paper method, the antibacterial activity of maror and annua and their composite liquids were analyzed by observing the size of inhibition zone.[Result] The results showed that: when the concentration was 0.1 g/mL, the intermixtures and composite liquids of both plants inhabited three bacterias above, and the inhibitory rate of each plant’s concentration was more than 70% at least, the rate of annua inhibitingStaphylococcusaureuswas more than 80%, the rate of maror inhibitingEscherichiacoliwas more than 85%, the compound liquid of maror, annua can inhabitEscherichiacolithoroughly, which means the inhibitory rate was 100%.[Conclusion] Maror and annua have good antibacterial activity, which can be further studied and developed.

Maror; Annua; Compound formulation; Bacteriostat

國家級大學生創新項目(201510449033)；濱州學院校內青年基金項目(BZXYL1307)。

姜翠鳳(1995- )，女，山東壽光人，本科生，專業：生物技術。*通訊作者，碩士，從事微生物學研究。

2016-07-01

S 482

A

0517-6611(2016)24-121-02