糖皮質激素對鼻息肉組織中巨噬細胞移動抑制因子水平的影響

宋　鍇， 龔正鵬

(貴州醫科大學附院 耳鼻喉科， 貴州 貴陽　550004)

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糖皮質激素對鼻息肉組織中巨噬細胞移動抑制因子水平的影響

宋鍇， 龔正鵬

(貴州醫科大學附院 耳鼻喉科， 貴州 貴陽550004)

目的： 探討糖皮質激素對鼻息肉組織巨噬細胞移動抑制因子(MIF)表達的影響。方法： 慢性鼻竇炎伴鼻息肉患者27例，未用激素治療前取息肉組織為A組，經糖皮質激素治療3～5 d后再取息肉組織為B組，另取行鼻中隔矯正術患者的中隔正常鼻黏膜作為對照組(C組，20例)，采用免疫組織化學法觀察MIF在鼻黏膜的分布及MIF陽性率。結果： MIF陽性細胞分布于上皮層、固有層以及腺上皮層，A、B組MIF陽性率分別為85.18%和81.48%，A組略高于B組，但兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)；C組MIF陽性率為25%，低于 A、B組，差異具有統計學意義(P<0.05)。結論： MIF在鼻息肉組織中呈高表達，這可能與鼻息肉的發生發展有關；短期局部運用糖皮質激素對MIF水平影響不明顯。

鼻息肉； 巨噬細胞游走抑制因子； 糖皮質激素類； 免疫組織化學

[Abstract]Objective: To investigate the effect of glucocorticoid on the expression of macrophage migration inhibitory factor (MIF) in nasal polyps. Methods: 27 cases of patients with nasal polyps were collected. Before hormone therapy the nasal polyps tissue were taken out from 27 cases as a group A(27 cases) while 3 to 5 days after glucocorticoid treatment the nasal polyp tissue were taken out as group B(27 cases). Normal septum nasal mucosa of 20 patients undergoing correction of nasal septum were taken out as group C(20 cases). The distribution of MIF in nasal mucosa and the positive rates of MIF were observed by immunohistochemical method. Results: Immunohistochemical staining showed that MIF positive cells were distributed in the epithelium, lamina propria and glandular epithelium. The rates of positive cell of MIF in group A and group B were 85.18% and 81.48%, respectively. The rates of positive cell of MIF in group A were slightly higher than group B, but the differences were statistically insignificant(P>0.05). The positive rates of MIF in group C was 25%, lower than those of both group A and group B, and the differences were statistically significant(P<0.05). Conclusions: MIF is highly expressed in nasal polyps, which may be related to the occurrence and development of nasal polyps. In short term, local use of glucocorticoids on the level of MIF is not obvious.

[Key words]nosal polyps; macrophage migration inhibitory factor; glucocorticoid; immunohistochemistry

鼻息肉是發生在鼻腔及鼻竇黏膜的慢性炎癥，主要病理學特征是以嗜酸性粒細胞為主的多種炎性細胞浸潤、組織水腫、上皮細胞增生、血管擴張及腺體增生。巨噬細胞移動抑制因子(MIF)是調節免疫功能的關鍵細胞因子，在許多免疫系統疾病及炎癥性疾病如哮喘、感染性休克、風濕性關節炎、肺炎、肺癌及胰腺炎等疾病時表達都增高[1]。現在已經證實多種細胞因子參與了鼻息肉發生和發展，并可以為糖皮質激素所調節，但與其它細胞因子不同,糖皮質激素可雙向調節MIF的表達。本實驗對鼻息肉中MIF的表達及糖皮質激素對MIF表達的影響進行研究，為探討鼻息肉的發病機理及糖皮質激素治療機制提供一定的理論參考。

1　材料與方法

1.1臨床資料

選擇2010年8月～2012年10月住院的慢性鼻竇炎伴鼻息肉患者27 例(側)，男16 例，女11 例，22～63 歲，平均44 歲；按照2008年慢性鼻竇炎診斷和治療指南[2]，所有患者均診斷為慢性鼻竇炎伴鼻息肉，均無其他呼吸道的疾病，未用過類固醇藥物及抗組胺藥物。慢性鼻竇炎伴息肉患者于手術前取鼻息肉組織，為A組；然后所有患者給予糠酸莫米松劑噴鼻(50 μg/噴，1次/d，2噴/鼻，共200 μg/d)，治療3～5 d后手術，手術中切取鼻息肉組織為B組。對照組(C組)20例，來自鼻中隔矯正術中所取得少許 鼻中隔黏膜，男16例，女4例，19～38歲，平均26歲，均無過敏性鼻炎、哮喘等呼吸系統疾病史。

1.2實驗方法及結果判定

采用鏈酶卵白素生物過氧化物酶復合物(SABC)免疫組織化學法檢測所有標本中的MIF的表達，實驗以肺癌組織作為陽性對照、以磷酸鹽緩沖溶液(PBS)代替一抗作為陰性對照，在光學顯微鏡下細胞胞漿內出現棕黃色或棕褐色染色為MIF陽性。每個標本隨機選取10個高倍視野(400倍)，計數每個高倍視野中500個細胞中MIF陽性細胞數，計算陽性率[3]。結果判定：陽性率<10%為陰性(-)，10%～24%為弱陽性(+)，25%～49%為陽性(++)，>50%為強陽性(+++)。

1.3統計學方法

采用SPSS 11.5統計軟件進行統計分析，采用χ2完全隨機設計進行兩樣本率的比較，P<0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1MIF分布

對照組鼻黏膜固有層腺體周圍可見少量散在的棕黃色細胞，主要為胞漿著色，部分細胞核也可見著色；A組(激素治療前)鼻息肉黏膜組織上皮細胞、炎性細胞及腺上皮細胞胞漿和部分胞核內呈棕黃色著色。B組(激素治療后)與A級比較MIF在腺上皮細胞、炎性細胞中表達降低。見圖1。

A組(治療前)　　　　　　　 　　B組(治療后)　　　　　　　　C組(對照)圖1　MIF在各組鼻黏膜組織中的表達Fig.1　The positive cells of MIF in each group(SABC,×400)

2.2MIF陽性率

A、B組MIF陽性率分別為85.18%和81.48%，A組略高于B組，但兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)；C組MIF陽性率為25%，低于 A、B組，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

3　討論

本研究通過免疫組織化學的方法分別檢測鼻息肉組織和鼻中隔黏膜組織中MIF的表達發現，鼻息肉組織中MIF呈高表達，主要表達于鼻息肉組織的黏膜上皮細胞、炎性細胞及腺上皮細胞胞漿和部分胞核內，陽性細胞表達率明顯高于對照組。MIF是一種多功能細胞因子，主要由T 細胞和單核-巨噬細胞產生，少數為B細胞產生，與巨噬細胞活化有關，可以直接或間接促進一系列炎癥分子的產生[4]。鼻息肉是多因素作用下的慢性炎癥性疾病，有研究表明巨噬細胞在鼻息肉發生過程中發揮重要作用[5]。激活的巨噬細胞作為抗原遞呈細胞發生免疫應答，通過釋放各種細胞因子，使炎性細胞聚集于局部，構成炎性細胞網絡，促進鼻息肉形成。我們在鼻息肉組織中檢測出MIF的高表達，提示MIF可能參與了鼻息肉的發病過程。

表1　各組鼻黏膜組織中MIF表達陽性率

(1)與對照組比較，P<0.05；(2)與B組比較，P>0.05

本研究所選取的患者均給予局部糖皮質激素治療3～5 d，經糖皮質激素治療后鼻息肉組織的MIF陽性表達率略低于未經糖皮質激素治療組，激素治療組陽性細胞主要分布在鼻息肉黏膜組織上皮中，但差異不具有統計學意義。說明短期局部使用糖皮質激素對MIF表達的影響不顯著。糖皮質激素是目前治療鼻息肉較有效的藥物之一，具有強大的抗炎、抗免疫作用，通過與糖皮質激素受體結合發揮作用；其一方面直接作用于炎癥細胞，抑制其產生和分化、促進其凋亡；另一方面，通過對細胞因子、黏附分子和炎癥介質的抑制，減少炎細胞浸潤、減輕細胞毒性作用，抑制鼻息肉的產生[6-7]。糖皮質激素可雙向調節MIF的表達，藥理劑量的糖皮質激素對MIF有抑制作用，地塞米松可抑制人肺上皮細胞A549分泌MIF蛋白，而低濃度的糖皮質激素可誘導MIF的合成與釋放[8]。有研究表明，激素不敏感潰瘍性結腸炎患者腸黏膜固有層單個核細胞(lamina propria mononuclear cells，LPMC)上MIF mRNA明顯較激素敏感者和對照者增加，加入GC后，激素敏感者LPMC產生IL-8明顯減少，而激素不敏感者則不減少，加入抗MIF可改善這一狀況，提示MIF的存在降低了患者對糖皮質激素的敏感性[9]。故認為對 MIF的深入研究，將有助于對鼻息肉的發生和發展機制的了解提供有效途徑，并可能對局部糖皮質激素治療鼻息肉的時間選擇及效果評價有著積極的意義。

[1]Flaster H,Bernhagen J,Calandra T,et al.The macrophage migration inhibitory fator-glucocorticoid dyad: regulation of inflammation and immunity[J].Mol Endocrinol, 2007(6):1267-1280.

[2]中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志編委會，中華醫學會耳鼻咽喉頭頸外科分會鼻科學組.慢性鼻-鼻竇炎診斷和治療指南[J].中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志, 2009(1):6-7.

[3]于睿莉，孫樹巖，安立峰,等.鼻內鏡術后中鼻道黏膜變化及其臨床意義[J].中國耳鼻咽喉顱底外科雜志， 2005(5)：339.

[4]Bloom BR，Bennet B．Mechanism of a reaction in vitro associated with delayed-type hypersensitivity[J]．Science， 1996(153)：80-82

[5]Ishiguro Y, Ohkawara T, Sakuraba H, et al. Macrophage migration inhibitory factor has a proinflammatory activity viathe p38 pathway in glucocorticoid - resistant ulcerative colitis[J].Clin Immunol, 2006(3):335-341.

[6]朱乘婧，陳瑋倫．糖皮質激素治療鼻息肉作用機制研究進展[J].同濟大學學報， 2006(9):75-78．

[7]任秀敏，楊彥忠，段乃超,等.局部應用糖皮質激素對鼻息肉組織中蛋白激酶C和Bcl-2及Bax蛋白表達的影響.[J]. Clin Otorhinolaryngol Head Neck Surg(China), 2010(24):17.

[8]Bacher M, Metz CN, Calandra T,et al. An essential regulatory role for macrophage migration inhibitory factor in T-cell activation. Proc Natl Acad Sci USA, 1996(93): 7849-7854.

[9]Alourfi Z, Donn RP, Stevens A, et al. Glucocorticoids suppress macrophage migration inhibitory factor (MIF) expression in a cell - type - specificmanner[J]. Mol Endocrinol, 2005(2):583-595.

(2016-01-31收稿，2016-07-01修回)

中文編輯： 周凌； 英文編輯： 劉華

Influence of Glucocorticoid for Macrophage Migration Inhibitory Factor Levels in Nasal Polyps

SONG Kai， GONG Zhengpeng

(DepartmentofOtorhinolaryngology,theAffiliatedHospitalofGuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China)

R765.25

A

1000-2707(2016)08-0960-03

10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.08.023

網絡出版時間：2016-08-23網絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160823.1343.044.html