高載藥量的恩曲他濱替諾福韋片處方優(yōu)化研究

馬宜明，賈德武，湯潔，羅倩雯，肖雷

(安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院藥劑科，安徽 合肥　230022)

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高載藥量的恩曲他濱替諾福韋片處方優(yōu)化研究

馬宜明，賈德武，湯潔，羅倩雯，肖雷

(安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院藥劑科，安徽 合肥230022)

目的研究一種高載藥量的恩曲他濱替諾福韋復方片處方，優(yōu)化其處方配伍方案。 方法在對國外上市制劑的處方工藝進行分析的基礎上，進行穩(wěn)定劑、填充劑、崩解劑、黏合劑的篩選和最終處方的放大驗證，確定合理可行的處方工藝。結果以處方解析確定的高風險因素為考察指標，確定了高載藥量的恩曲他濱替諾福韋片的處方：每片含恩曲他濱200 mg，富馬酸替諾福韋二吡呋酯300 mg，預膠化淀粉60 mg，微晶纖維素100 mg，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉30 mg，硬脂酸鎂5 mg，95%乙醇為黏合劑。自制片與對照片質(zhì)量比對結果一致。結論篩選的恩曲他濱替諾福韋復方片處方工藝合理可行，產(chǎn)品重現(xiàn)性和穩(wěn)定性好。

恩曲他濱；替諾福韋;藥物調(diào)劑

恩曲他濱(FTC)和富馬酸替諾福韋二吡呋酯(TDF)均為核苷酸類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTIs)。其中，TDF于2001年經(jīng)美國FDA批準用于治療人類免疫缺陷病毒(HIV)感染。由于治療效果確切，適用性好，劑量合適，是多個治療指南推薦使用的一線抗HIV藥物。FTC于2003年經(jīng)美國FDA批準上市，作用機制類似于拉米夫定,較拉米夫定抗病毒活性更好、安全性更高[1-4]。

HIV患者需要長期服用多種藥物，由于主觀和客觀的原因，患者常常會在服藥時間、劑量和療程等方面出現(xiàn)不能按醫(yī)囑服藥的情況，這種服藥順應性下降導致療效和安全性下降的研究報告已很多見。因此，世界衛(wèi)生組織(WHO)和美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)等多個艾滋病抗病毒治療指南均推薦使用復方制劑，減少服藥次數(shù)、提高患者的順應性[5]。

恩曲他濱替諾福韋片是高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒聯(lián)合治療(HAART)的一線方案藥物，由Gilead公司在美國批準上市，商品名為“Truvada”，尚未國產(chǎn)化。在對“Truvada”的調(diào)研中發(fā)現(xiàn)，由于該復方藥物劑量較高(每片含F(xiàn)TC 200 mg和TDF 300 mg)，“Truvada”片重達到1 g，對于部分患者，特別是國內(nèi)患者存在難以吞服的問題。為增加患者的服藥順應性，本研究以Gilead公司的“Truvada”為對照品，在保證質(zhì)量一致的基礎上，改善片重，研發(fā)一種高載藥量的片劑處方，并預期實現(xiàn)產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)。

1　儀器與材料

DP30A單沖壓片機(北京國藥龍立科技有限公司)；YD-35片劑硬度儀(天津市天大天發(fā)科技有限公司)；RCZ-8M溶出試驗儀(天大天發(fā)科技有限公司)；ZB-2智能崩解儀(天大天發(fā)科技有限公司)。

恩曲他濱(安徽貝克聯(lián)合制藥有限公司，批號1410001，有效期2017年8月)；富馬酸替諾福韋二吡呋酯(安徽貝克聯(lián)合制藥有限公司，批號1406001，有效期2016年5月)；微晶纖維素(安徽山河藥用輔料股份有限公司)；乳糖(DMV International)；預膠化淀粉(安徽山河藥用輔料股份有限公司)；交聯(lián)羧甲基纖維素鈉(FMC Biopolymer)；硬脂酸鎂(安徽山河藥用輔料股份有限公司)；薄膜包衣預混劑(上海卡樂康包衣技術有限公司)；95%乙醇(安徽安特食品股份有限公司)；純化水(自制)；“Truvada”(美國吉利德公司，批號L117705D，有效期2016年9月)。

2　方法與結果

2.1檢測方法

2.1.1溶出度取待測樣品，照溶出度測定法(中國藥典2010年版二部附錄X C第二法)，以0.1 mol·L-1鹽酸溶液900 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r·min-1，依法操作，在檢測點時間，取溶液10 mL，用0.45 μm的濾膜濾過，精密量取續(xù)濾液2 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，高效液相法檢測FTC、TDF的溶出量。

2.1.2含量及有關物質(zhì)采用高效液相法檢測FTC、TDF的含量和有關物質(zhì)。

2.2對照品處方解析和自制品風險因素分析根據(jù)FDA對“Truvada”的審評資料，“Truvada”采用的輔料為乳糖、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)、預膠化淀粉和硬脂酸鎂，包衣材料為歐巴代包衣粉。處方解析：乳糖和微晶纖維素為填充劑，主要用于改善原料的可壓性并有助于片劑的崩解；預膠化淀粉對容易水解的藥物有保護作用，因為其本身可以優(yōu)先吸附水分，從而減少原料與水分的接觸，降低水解的發(fā)生，由于TDF對高濕不穩(wěn)定，容易水解成單酯，因此使用預膠化淀粉作為穩(wěn)定劑，同時預膠化淀粉還具有一定的填充和崩解作用；CMC-Na為崩解劑；硬脂酸鎂為潤滑劑。考察“Truvada”的性狀、硬度、崩解時間、溶出和有關物質(zhì)等各項質(zhì)量指標，結果見表1。

通過對“Truvada”各指標的綜合分析，確定目標產(chǎn)品開發(fā)中的風險因素：替諾福韋單酯是“Truvada”的主要有關物質(zhì)，TDF遇濕熱極易降解為替諾福韋單酯，在工藝制備過程中易發(fā)生降解，應將替諾福韋單酯做為高風險因素重點考察。目標產(chǎn)品為高載藥量片劑，在保證與對照品質(zhì)量一致的前提下需盡量減少輔料用量。減少輔料用量特別是填充劑用量，可出現(xiàn)顆粒的流動性、可壓性等較差的問題，顆粒性質(zhì)應作為高風險因素重點考察。按生物藥劑學分類，F(xiàn)TC屬于Ⅰ類藥物，TDF屬于Ⅲ類藥物，在水中均有較高溶解性，“Truvada” 溶出檢測結果表明其15 min釋放可達90%以上。以15 min溶出大于85%為考察指標[6]，即可說明產(chǎn)品溶出行為一致，因此溶出可作為低風險因素。根據(jù)分析結果，以高風險因素作為重點考察指標，進行處方的設計優(yōu)化。

表1　“Truvada”質(zhì)量指標測定結果

2.3穩(wěn)定劑用量篩選以高風險因素替諾福韋單酯做為考察指標，考察預膠化淀粉對TDF的穩(wěn)定效果。按處方1～4制備含有不同量預膠化淀粉的素片，置于40 ℃/75%RH恒溫恒濕箱中加速10 d，高效液相法檢測0 d和10 d時素片的有關物質(zhì)，著重比較替諾福韋單酯的增幅，結果見表2。可見，未加入預膠化淀粉的處方(處方1)與其他各處方相比，替諾福韋單酯增幅最大，說明預膠化淀粉對本品確實有較好的穩(wěn)定作用；處方3的預膠化淀粉用量，對片劑的穩(wěn)定效果達到峰值，繼續(xù)增加用量至處方4，替諾福韋單酯的增幅無顯著變化，因此最終選擇處方3的預膠化淀粉用量。

2.4填充劑用量篩選遵循在保證產(chǎn)品質(zhì)量的前提下盡量提高載藥量的原則，以高風險因素顆粒性質(zhì)(包括休止角、壓片外觀)和素片質(zhì)量(包括硬度、脆碎度和崩解時間)做為考察指標，進行填充劑用量的篩選，結果見表3。可見，由于載藥量高，各處方顆粒流動性相對較差，但壓片過程順利，無裂片、黏沖等現(xiàn)象，可壓性較好，且片重差異較小，認為顆粒流動性在可接受范圍內(nèi)。加入乳糖的處方(處方6、處方7)脆碎度增大，且造成崩解時間的延長，綜合考慮認為單用微晶纖維素作為填充劑更為適合。比較不同微晶纖維素用量處方(處方5和處方8)，各項指標差異無統(tǒng)計學意義，因此最終選擇處方8的微晶纖維素用量。

表2　穩(wěn)定劑用量篩選試驗結果

表3　填充劑用量篩選試驗結果

2.5崩解劑用量篩選崩解劑的用量主要影響片劑的溶出速率，以15 min溶出為指標，考察崩解劑用量對溶出的影響，結果見表4。當崩解劑CMC-Na達到處方10用量時，15 min溶出量大于90%，與對照組相近，繼續(xù)增加用量至處方11，溶出量無顯著增加，因此最終選擇處方10的崩解劑用量。

表4　崩解劑用量篩選試驗結果

2.6黏合劑篩選在處方研發(fā)過程中發(fā)現(xiàn)，黏合劑中含水量的多少對產(chǎn)品的穩(wěn)定性有較大影響，按處方12～14制備不同黏合劑的素片，置于40 ℃/75%RH恒溫恒濕箱中加速10 d，高效液相法檢測0 d和10 d時素片的有關物質(zhì)，比較替諾福韋單酯的增幅，結果見表5。不同含水量的處方在0 d時替諾福韋單酯量差異無統(tǒng)計學意義，但加速放置后，含水量高的處方替諾福韋單酯大幅增加，提示本品在制粒過程中應嚴格控制水分。根據(jù)試驗結果，最終選擇95%乙醇作為黏合劑使用。

表5　黏合劑篩選試驗結果

表6　產(chǎn)品驗證結果

2.7產(chǎn)品驗證根據(jù)以上試驗結果確定的處方：每片含恩曲他濱200 mg，富馬酸替諾福韋二吡呋酯300 mg，預膠化淀粉60 mg，微晶纖維素100 mg，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉30 mg，硬脂酸鎂5 mg，95%乙醇為黏合劑。該處方按常規(guī)濕法制粒方法操作，經(jīng)過篩、混合、制粒、干燥、整粒、總混、壓片、包衣等工序，進行實驗室規(guī)模的放大，連續(xù)生產(chǎn)3批，每批2 500片。考察產(chǎn)品的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，結果見表6。可見，本品與對照片“Truvada”性狀、含量、溶出、主要雜質(zhì)水平和加速穩(wěn)定性等方面的檢測結果相近，表明本品與對照品質(zhì)量相近。

3　討論

恩曲他濱替諾福韋片是抗逆轉(zhuǎn)錄病毒的一線用藥，國內(nèi)需求量大，但尚未實現(xiàn)產(chǎn)品的國產(chǎn)化。進口的原研片片型過大，不符合國內(nèi)患者的服藥習慣，造成國內(nèi)患者服藥順應性低下。結合這一實際情況，開發(fā)了高載藥量的恩曲他濱替諾福韋片，在與原研片保證質(zhì)量一致的基礎上，片重僅為原研片的70%，提高了國內(nèi)患者的服藥順應性。研發(fā)結果證明，本品處方合理、工藝穩(wěn)定，預期可進行進一步放大，實現(xiàn)產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)。

[1]王芳菲,耿勝燕,何梅孜,等.恩曲他濱與替諾福韋的專利保護現(xiàn)狀與市場應用前景分析[J].中國藥物應用與監(jiān)測,2014,11(5):318-321.

[2]吳立超,趙中夫,馮旭姣,等.關于恩曲他濱與拉米夫定治療乙肝初治病人療效研究[J].世界最新醫(yī)學信息文摘,2016,16(7):80-81.

[3]周艷.替諾福韋酯聯(lián)合拉米夫定治療艾滋病合并乙型肝炎病毒感染的效果觀察[J].河南醫(yī)學研究,2016,25(4):746-747.

[4]丁天然,盧洪洲.替諾福韋抗病毒感染最新研究進展[J].世界臨床藥物,2014,35(8):453-457.

[5]沈銀忠,盧洪洲.2011版艾滋病抗病毒治療指南解讀[J].世界臨床藥物,2012,33(3)：183-187.

[6]牛劍釗,林蘭,張啟明,等.美國和日本溶出曲線相似性判定方法介紹[J].中國藥物評價，2013,30(2):67-69.

Prescription development of high drug loading of emtricitabine tenofovir tablets

MA Yiming,JIA Dewu,TANG Jie,et al

(DepartmentofPharmacy,FirstAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity,Hefei,Anhui230022,China)

ObjectiveTo explore the formula of a high drug loading of emtricitabine tenofovir compound tablets,and to optimize its compatibility prescription program.MethodsBased on the analysis of the formulation and process of foreign drug,some pharmaceutical accessories were screened including stabilizers,fillers,disintegrants and binders,and the verification of the final amplification prescription was carried out in order to determine the reasonable and feasible prescription process.ResultsSome high-risk factors identified by prescription analysis were used as indexes,and then the prescription of high drug loading of emtricitabine tenofovir tablets was obtained,which was 200 mg emtricitabine,300 mg tenofovir disoproxil fumarate,60 mg pre-gelatinized starch,100 mg microcrystalline cellulose,30 mg cross-linked sodium carboxymethyl cellulose,5 mg magnesium stearate,and 95% ethanol as a binder in each tablet.The compared results between the tablets prepared by above-mentioned prescription and the reference sample were consistent.ConclusionsThe screened prescription process of emtricitabine tenofovir compound tablets was reasonable and feasible with high reproducibility and stability.

Emtricitabine；Tenofovir；Drug compounding

10.3969/j.issn.1009-6469.2016.08.015

2016-04-06，

2016-06-01)