黔產羊耳菊藥材中的重金屬殘留分析*

熊荻菲菲， 熊　珂， 伍　萍， 鞏仔鵬,2， 陳思穎,2， 蘭燕宇， 王愛民***

(1.貴州醫(yī)科大學 貴州省藥物制劑重點實驗室， 貴州 貴陽　550004； 2.貴州醫(yī)科大學 藥學院， 貴州 貴陽　550004； 3.貴州醫(yī)科大學 民族藥與中藥開發(fā)應用教育部工程研究中心， 貴州 貴陽　550004)

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·基礎研究·

黔產羊耳菊藥材中的重金屬殘留分析*

熊荻菲菲1**， 熊珂1， 伍萍1， 鞏仔鵬1,2， 陳思穎1,2， 蘭燕宇2,3， 王愛民2,3***

(1.貴州醫(yī)科大學 貴州省藥物制劑重點實驗室， 貴州 貴陽550004； 2.貴州醫(yī)科大學 藥學院， 貴州 貴陽550004； 3.貴州醫(yī)科大學 民族藥與中藥開發(fā)應用教育部工程研究中心， 貴州 貴陽550004)

目的： 測定10批黔產羊耳菊藥材中的重金屬汞、砷、鉛、鎘及銅的含量，評價黔產羊耳菊藥材的質量及安全性。方法： 10批不同產地(黔產)羊耳菊藥材，采用石墨爐原子吸收光譜法測定藥材中鉛、鎘、銅的含量，原子熒光光度法測定藥材中砷、汞的含量，以《藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準》對10批藥材中重金屬含量進行評價。結果： 被測定的10批黔產羊耳菊藥材中鉛、銅、砷的含量均未超出限定標準，有1批羅甸藥材中汞的含量超出限定標準；除1批惠水藥材及1批羅甸藥材外，其余藥材中鎘的含量均超出限定標準。結論： 貴州省內不同產地的羊耳菊藥材中重金屬的含量存在較大差異，鎘含量超標較為嚴重。

羊耳菊； 中藥材； 重金屬； 質量控制； 原子吸收光譜法； 限定標準； 貴州

羊耳菊又名白牛膽，為菊科旋覆花屬植物的新鮮或干燥全草，屬南方民間草藥，性辛、微苦，具有解毒消腫，疏風散熱、祛痰定喘的功效[1-2]。以羊耳菊為主藥研制的中藥新藥有“菊黃上清含片”及“蓮菊感冒膠囊”等[3-4]，羊耳菊是這些制劑的主要成分之一，其產地及質量關系到這些中藥制劑的療效及安全性。中藥材在生長過程中易受到土壤環(huán)境的影響，土壤中的重金屬元素鉛、鎘及銅等可從中草藥的根部吸收，當殘留過量會產生毒性，影響用藥的安全性[5-6]。檢測中藥材中重金屬的含量對用藥安全具有重要的意義。為綜合評價黔產羊耳菊藥材的質量及安全性，本研究收集了10批貴州省不同產地的羊耳菊藥材，分別測定藥材中鉛、鎘、銅、砷及汞的含量，評價黔產羊耳菊藥材的質量及安全性，為進一步提高黔產羊耳菊為原料的相關制劑的質量和安全性提供參考。

1　材料與方法

1.1樣品、儀器及試劑

實驗所用羊耳菊藥材采自貴州省內的不同產地，由貴州省食品藥品檢驗所李楊主管中藥師鑒定為羊耳菊Inulacappa(Buch.-Ham.ex D.Don)干燥全草，產地及編號見表1。儀器及試劑為AAnalyst 800原子吸收光譜儀(美國PerkinElmer公司)，AFS-8220原子熒光光度計(北京吉天儀器有限公司)，Agilent 7890A氣相色譜儀， EH 20A plus 電子溫控加熱板(北京萊伯泰科儀器股份有限公司)，聚四氟乙烯高壓消解罐(南京瑞尼克科技開發(fā)有限公司)，BUHCI R-200旋轉蒸發(fā)儀(瑞士BUCHI公司)。鉛標準溶液(1 μg/L，GSB04-1742-2004)、鎘標準溶液(1 μg/L，GSB04-1721-2004)、汞標準溶液(1 μg/L，GSB04-1729-2004)、砷標準溶液(1 μg/L，GSB04-1714-2004)、銅標準溶液(1 μg/L，GSB04-1725-2004)，均購自國家有色金屬及電子材料分析中心；硝酸、鹽酸為優(yōu)級純，其余試劑為分析純。

表1　10批黔產羊耳菊藥材的編號及產地

1.2對照品溶液的制備

汞、砷標準溶液：分別吸取汞、砷標準溶液0.5 mL用水定容至100 mL，得到汞、砷儲備液；分別吸取汞、砷儲備液1.0 mL及5.0 mL分別用水定容至100 mL和50 mL，得到汞、砷使用液。分別吸取汞使用液0、0.1、0.2、0.4、0.8及1.0 mL，各加入濃鹽酸2.5 mL搖勻，用水定容至50 mL，得0.0、0.1、0.2、0.4、0.8及1.0 μg/L汞標準系列溶液；分別吸取砷使用液0、0.1、0.2、0.5、1.0及2.0 mL，各加入濃鹽酸2.5 mL和10%硫脲溶液5 mL中搖勻，用水定容至50 mL得0.0、1.0、2.0、5.0、10.0及20.0 μg/L砷標準系列溶液。鉛、鎘及銅標準溶液的制備：分別吸取鉛、鎘、銅標準溶液1.0、0.5及1.0 mL用水定容至100 mL，分別得到鉛、鎘及銅儲備液，分別吸取鉛、鎘儲備液各0.5 mL，分別加入濃鹽酸0.5 mL，用水定容至100 mL，得到50 μg/L鉛和25 μg/L鎘使用液；分別吸取銅儲備液0.0、0.5、1.0、2.0、3.0及4.0 mL，分別加入濃鹽酸0.5 mL，用水定容至50 mL，得0.0、0.1、0.2、0.4、0.6及0.8 μg/L銅標準系列溶液。

1.3供試品溶液的制備

羊耳菊藥材干燥粉碎后過40目篩，稱取0.5 g置于高壓消解罐內罐中，加硝酸7 mL，將內罐放入不銹鋼套擰緊密封放入電熱鼓風干燥箱180 ℃、3 h，取出冷卻至室溫后，將內罐取出置于控溫電熱板上150 ℃加熱至消解液約揮至1 mL，冷卻后用水少量多次轉移至25 mL容量瓶中，汞、鉛、鎘、銅供試品溶液中加濃鹽酸2.5 mL，用水定容至25 mL即得；砷供試品溶液中加濃鹽酸2.5 mL與10%硫脲5 mL，用水定容至25 mL即得。測定參數(shù)：汞、砷儀器工作參數(shù)的設定見表2，鉛、鎘、銅儀器工作參數(shù)的設定見表3。

1.4方法學考察

1.4.1線性關系考察取“1.2”項下制備的重金屬標準系列溶液，分別按表2及表3參數(shù)檢測，以吸收度或熒光值(A)為縱坐標，以標準溶液濃度(C)為橫坐標，繪制標準曲線并進行線性回歸，得回歸方程及相關系數(shù)(r)見表4，表明線性關系良好。

1.4.2精密度試驗取同一批羊耳菊藥材，按“1.3”項下方法制備供試品，按表2及表3參數(shù)檢測，連續(xù)測定熒光值及吸光度6次，汞、砷、鉛、鎘及銅含量RSD值范圍為0.85%～3.78%，表明儀器精密度良好。

表2　原子熒光光度法工作參數(shù)表

表3　原子吸收光譜法儀器工作參數(shù)

表4　各元素標準曲線回歸方程及相關系數(shù)

1.4.3重復性試驗取同一批羊耳菊藥材6份，按“1.3”項下方法制備供試品，按表2及表3參數(shù)檢測，分別測定各樣品的熒光值及吸光度值，汞、砷、鉛、鎘及銅的RSD值分別為3.17%、2.19%、2.85%、5.49%及4.13%，表明該方法的重復性良好。

1.4.4回收率試驗取羊耳菊藥材9份，分成高、中、低3組，每組分別精密加入一定量的汞、砷、鉛、鎘及銅標準溶液，每份樣品按“1.3”項下方法制備供試品，按表2及表3參數(shù)檢測，計算回收率。汞、砷、鉛、鎘及銅的回收率分別為99.5%～101.4%、97.4%～103.5%、98.4%～100.3%、98.7%～105.8%及99.1%～101.9%，汞、砷、鉛、鎘及銅的RSD值分別為1.38%～1.47%、0.45%～2.23%、1.43%～3.64%、2.12%～5.67%及1.21%～6.87%，表明該方法準確度良好。

2　結果

依據(jù)《藥用植物及制劑進出口行業(yè)綠色標準》(WM/T 2-2004)[7]中各元素的限量指標：汞≤ 0.2 ng/g、砷≤ 2 ng/g、鉛≤ 5 ng/g、鎘≤ 0.3 ng/g、銅≤ 20 ng/g，本次檢測的貴州省10批羊耳菊藥材中鉛、銅、砷的含量均未超出限定標準，只有1批羅甸藥材中汞的含量超出限定標準；除1批惠水藥材及 1批羅甸藥材外，其余藥材中鎘的含量均超出限定標準。見表5。

表5　貴州省不同產地羊耳菊藥材中重金屬含量測定結果

注：(1)為超出限定標準

3　討論

中藥材中重金屬超標不僅成為中藥材質量的安全隱患，還關系到中藥飲片及中成藥的用藥安全，也制約了中藥材及其制劑的出口。發(fā)達國家對重金屬超標而形成的“貿易壁壘”已成為我國中藥出口創(chuàng)匯的一大障礙，同時也導致眾多國家對中醫(yī)藥的療效和安全性產生質疑。中藥材作為中藥飲片和中成藥的原料，是中藥重金屬殘留的直接來源，對其進行監(jiān)測，并加以控制，是解決中藥重金屬殘留問題的關鍵環(huán)節(jié)之一[8]。目前為止只有云南、四川、貴州3個省區(qū)對羊耳菊制定過質量標準[10]，并且收錄在《中國藥典》中，但也僅有1977版進行了收錄，并且現(xiàn)有標準對羊耳菊藥材的質量控制方法都較為簡單，且都沒有重金屬的檢測及限量標準。 因此，本研究通過對貴州不同產地的10批羊耳菊藥材的5種重金屬進行測定，以期為羊耳菊藥材的質量評價、臨床用藥安全以及制定該藥材中重金屬限量標準提供參考依據(jù)。

通過對貴州省不同產地的10批地羊耳菊藥材中重金屬含量檢測結果可看出，不同產地的羊耳菊藥材中重金屬的含量存在著顯著的差異，重金屬汞、鎘有超標現(xiàn)象，其中鎘的超標尤為嚴重，被測定樣品中鎘的殘留量最大的超過限定標準約6倍。有研究報道葉國華等[10]硏究了貴州省11個中藥材基地的21種中藥材，分析檢測了其中所含汞、砷、鉛、鎘、銅等5種重金屬元素，結果中鎘含量高達63.2%，超標率也最為嚴重。自然界大環(huán)境如空氣、土壤、水質等是中藥材重金屬污染的途徑之一，在相同的pH條件下，鎘在土壤中比鉛、銅的溶解度大。土壤對鎘有很強的吸附力，特別是黏土和有機質多的土壤吸附鎘的能力較強，容易造成鎘的富積[11]。同時，羊耳菊藥材可能對鎘有較強的富集能力，這些原因可能是導致貴州不同產地羊耳菊藥材中鎘的殘留量差異較大或超標的原因。羊耳菊藥材在抗菌、抗炎等方面有很好的開發(fā)應用前景，但目前所用的羊耳菊藥材基本都為野生品種，而從本研究所測定的結果中可以看出，自然界大環(huán)境對該藥材中重金屬含量有較大的影響，且野生品種在生長過程中易受到環(huán)境影響而富集有害元素。因此，為了更好的保證該藥材質量建議進行人工種植，并對藥材相關產地的土壤、空氣、水分等環(huán)境影響因素進一步分析，為羊耳菊藥材人工種植提供較好的種植方案。同時建立相應的GAP種植基地，以期控制土壤及水質等因素所帶來的重金屬污染，從源頭上避免重金屬污染源的引入，從而保障羊耳菊藥材臨床用藥的安全性。

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(2016-05-28收稿，2016-08-25修回)

中文編輯： 吳昌學； 英文編輯： 劉華

Analysis of Residual Heavy Metals inInulacappaProduced in Guizhou Province

XIONG Difeifei1, XIONG Ke1, WU Ping1, GONG Zipeng1,2, CHEN Siying1,2, LAN Yanyu2,3, WANG Aimin2,3

(1.GuizhouProvincialKeyLaboratoryofPharmaceutics,GuizhouMedcialUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China; 2.CollegeofPharmacy,GuizhouMedcialUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China； 3.EngineeringResearchCenterfortheDevelopmentandApplicationofEthnicMedicineandTCM,MinistryofEducation,GuizhouMedcialUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China)

Objective: To determine the amount of heavy metals in 10 different batches ofInulacappaproduced in Guizhou Province and evaluate quality and clinical safety. Methods: The contents of heavy metals of Pb, Cd and Cu were determined by using graphite furnace atomic absorption spectrometry, and As and Hg by atomic fluorescence spectrometry. According toGreenTradeStandardsofImportingExportingMedicinalplantsPreparations, the experimental data of 10 batches ofInulacappawere evaluated. Result: The contents of Pb, Cu and As in herbs did not exceed the limited standard. Hg content exceeded the limited standard in one batch produced in Luodian area. The Cd content in all of batches exceeded the limited standard except for one batch from Huishui and one batch from Luodian. Conclusion: The results shows there is a significant difference of the heavy metals contents inInulacappaproduced among different producing areas in Guizhou Province. And the situation of Cd content exceeding the permitted standard is serious.

Inulacappa; chinese medicinal materials; heavy metals; quality control; atomic absorption spectrometry; limited standard; Guizhou province

國家自然科學基金項目(81360664)； 貴州省科學技術基金項目[黔科合LH字(2015)7362]； 貴州省中醫(yī)藥管理局項目(QZZY-2015-078)

E-mail:gywam100@163.com

R284； RZ273

A

1000-2707(2016)09-1021-04

10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.09.007

**貴州醫(yī)科大學2013級碩士研究生

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網(wǎng)絡出版時間：2016-09-13網(wǎng)絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160913.2240.034.html