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丹參與白花丹參的種子生物學特性研究△

2016-09-25 07:26:34李穎李軍德李豐勝李曉琳
中國現代中藥 2016年12期

李穎,李軍德,李豐勝,李曉琳

(1.道地藥材國家重點實驗室培育基地,中國中醫科學院 中藥資源中心 北京 100700;2.萊蕪紫光生態園有限公司,山東 萊蕪 271100)

丹參與白花丹參的種子生物學特性研究△

李穎1,李軍德1,李豐勝2,李曉琳

(1.道地藥材國家重點實驗室培育基地,中國中醫科學院 中藥資源中心 北京 100700;2.萊蕪紫光生態園有限公司,山東 萊蕪 271100)

目的:研究比較丹參與白花丹參不同采收部位種子特性。方法:分別收集丹參、白花丹參主果穗上段、中段、下段種子,測定其萌發率、含水量、單穗種子粒數、千粒重等指標。結果:白花丹參果穗位置越高,種子萌發率越高,單穗種子粒數越多;丹參果穗位置越低,萌發率越高,中段單穗種子粒數最多;白花丹參與丹參不同部位種子的含水量、千粒重差異不顯著。結論:丹參和白花丹參采收部位不同的種子特性不同,采收時白花丹參可優選中上段,丹參優選中下段,并通過分批集中的方法,提高種子質量均一程度。

丹參;白花丹參;種子;采收部位

根據《中華人民共和國藥典》2015版記載,藥材丹參其基源植物為唇形科鼠尾草屬多年生草本植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.,以干燥根與根莖入藥,用于胸痹心痛、心煩不眠、月經不調等[1]。白花丹參SalviamiltiorrhizaBge.var.miltiorrhizaf.albaC.Y.Wu et H.W.為丹參的種內變型,與丹參主要區別在于,白花丹參花冠為純白色,丹參為紫紅色或紫色[2-3]。白花丹參主產于山東萊蕪,河南、陜西、安徽等地也有少量種植,民間也以其根部與《中華人民共和國藥典》記載丹參同等入藥。目前,丹參和白花丹參在植株形態、遺傳性狀、化學成分、藥理活性、藥材質量、生產栽培等方面的差異已有研究,齊永秀[4-5]、李長峰[6]等人發現二者藥材質量基本一致,在微量元素、藥理特性、活性成分等有略微不同,如:白花丹參中鐵、鎂、錳等五種元素高于丹參,鈷和鎘含量低于丹參[4-5],丹參的水溶性與醇溶性浸出物含量較高,白花丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量較高[6]等。單成鋼等[7]已開展了丹參種子特性的初步研究,探究采收時間、采收部位對種子質量和數量的影響,提出在果殼半熟至2/3枯黃期采收主果穗種子可在一定程度上保證收獲的種子質量。但對白花丹參的種子特性及其與丹參種子的差異未有研究。

本文研究了丹參和白花丹參在千粒重、含水量、萌發率等種子特性以及不同采收部位的種子數量和質量差異,為丹參和白花丹參質量控制和規范化栽培提供參考。

1 材料

1.1 試驗材料

丹參S.miltiorrhizaBge.和白花丹參S.miltiorrhizaBge.var.miltiorrhizaf.albaC.Y.Wu et H.W.種子均于2015年8月采自于山東萊蕪紫光生態園丹參基地,并由中國中醫科學院中藥資源中心郝近大研究員鑒定。室內陰干脫粒立即用于試驗。

1.2 主要儀器

主要儀器有電熱鼓風干燥箱(上海一恒科學儀器有限公司)、Friocell 404型光照培養箱(德國MMM)、New Classic MF電子天平(瑞士Mettler Toledo)、Milli-Q Reference純水儀(美國Millipore)等。

2 試驗方法

2.1 果穗不同部位種子試驗

頂生花序一般呈上、中、下三段,每段3~4輪,每輪6花至多花,結實期成果穗。于丹參和白花丹參果穗成熟時,采收頂生主果穗及頂生主果穗不同部位果穗20穗。頂生主果穗上段、中段、下段、全段分別用SD、ZD、XD、ALL表示。測定每部位的種子粒數、種子萌發率、千粒重和含水量。

2.2 種子粒數

以人工計數法,分別對丹參和白花丹參不同采收部位單穗種子粒數計數。

2.3 萌發率

取丹參和白花丹參種子,置于墊有雙層濾紙的90 mm培養皿中,每皿50粒,加入5 mL蒸餾水,在20 ℃光照培養箱內培養14 d,變光處理為光照12 h和黑暗12 h,光照強度為66.3 μmol·m-2·s-1。以胚根突破種皮2 mm作為萌發完成的標準,4個重復。萌發率按以下公式計算:

2.4 千粒重

將種子混合均勻,隨機取試樣,以人工計數法,測定每千粒種子的質量,結果精確至10-4g。重復4次。

2.5 含水量

參考《國際種子檢驗規程》高恒溫烘干法測定種子水分含量。先將稱量盒于135 ℃下烘干至恒重,記錄重量,將種子材料置于稱量盒中,于135±2 ℃條件下烘干4 h。每隔30 min取出稱重,取出迅速放入干燥器,冷卻至室溫后稱重,至重量恒定,記錄最后一次結果進行含水量計算。重復4次。含水量按以下公式計算:

M1為樣品盒和蓋的重量,g;

M2為樣品盒和蓋及樣品的烘前重量,g;

M3為樣品盒和蓋及樣品的烘后重量,g。

2.6 統計方法

采用One-way ANOVA單因素方差分析,用LSD(least significant difference)進行兩兩比較,顯著水平P<0.05。所用軟件為SPSS18.0。

3 結果與分析

3.1 丹參和白花丹參不同部位種子萌發率差異

丹參和白花丹參不同部位種子萌發率見圖1,方差分析顯示萌發率差異達顯著水平(P=0.002,見表1)。丹參頂生主果穗上段、中段、下段、全段種子萌發率分別為46.7%、50.0%、70.0%、48.0%;白花丹參頂生主果穗上段、中段、下段、全段種子萌發率分別為77.0%、71.0%、53.3%、57.3%。丹參下段種子萌發率顯著高于上段、中段,即果穗位置越低,萌發率越高;白花丹參上段、中段種子萌發率顯著高于下段,即果穗位置越高,種子萌發率越高。

圖1 丹參和白花丹參不同部位種子萌發率

表1 丹參和白花丹參不同部位種子萌發率方差分析結果

3.2 丹參和白花丹參不同部位種子含水量差異

丹參和白花丹參不同部位種子含水量見圖2。丹參頂生主果穗上段、中段、下段、全段種子含水量分別為9.03%、9.34%、9.66%、9.54%;白花丹參頂生主果穗上段、中段、下段、全段種子含水量分別為9.39%、9.55%、8.89%、8.99%;各組間無顯著差異。丹參和白花丹參不同部位種子含水量差異不顯著(P=0.89,見表2)。

圖2 丹參和白花丹參不同部位種子含水量

表2 丹參和白花丹參不同部位種子含水量方差分析結果

3.3 丹參和白花丹參不同部位種子粒數差異

丹參和白花丹參不同部位單個果穗種子粒數見圖3。丹參頂生主果穗上段、中段、下段、全段種子單穗平均粒數分別為100粒、106粒、84粒、94粒,下段平均粒數顯著低于上段、中段;白花丹參上段、中段、下段種子單穗平均粒數分別為147粒、133粒、106粒、110粒,組間呈顯著差異,即果穗位置越高,單穗種子粒數越多。丹參和白花丹參不同部位單穗種子粒數差異顯著(P=0.00,見表3),白花丹參各段單穗平均種子粒數顯著高于丹參對應部位單穗平均種子粒數。

圖3 丹參和白花丹參不同部位種子粒數

表3 丹參和白花丹參不同部位種子粒數方差分析結果

3.4 丹參和白花丹參不同部位種子重量差異

丹參和白花丹參不同部位種子的千粒重鮮重與干重見圖4、圖5。白花丹參頂生主果穗上段、中段、下段、全段千粒重鮮重分別為1.28 g、1.57 g、1.51 g、1.52 g;丹參上段、中段、下段、全段千粒重鮮重分別為1.68 g、1.66 g、1.45 g、1.49 g。白花丹參上段、中段、下段、全段千粒重干重分別為1.16 g、1.42 g、1.38 g、1.38 g;丹參上段、中段、下段、全段千粒重干重分別為1.53 g、1.51 g、1.31 g、1.35 g。鮮重、干重變化趨勢相同。方差分析顯示種子重量差異不顯著(P=0.233,見表4;P=0.276,見表5)。

圖4 丹參和白花丹參不同部位種子千粒重鮮重

表4 丹參和白花丹參不同部位種子千粒重鮮重方差分析結果

圖5 丹參和白花丹參不同部位種子千粒重干重

表5 丹參和白花丹參不同部位種子千粒重干重方差分析結果

4 討論

丹參為頂生或腋生輪傘花序,多輪排成疏離的假總狀花序,由于其生長發育特性,導致種子成熟度不一致,栽培時常有出苗不整齊[8]的現象。本研究顯示,丹參、白花丹參不同采收部位種子萌發率特性均有一定的差異,丹參主果穗中,位置越低的果穗,其結實的種子萌發率越高,與前人對丹參種子特性的研究結果一致[7];白花丹參反之,果穗位置越高,其結實的種子萌發率越高,且單穗平均種子粒數越多。種子粒數在一定程度上可反映結實率,可能白花丹參的結實率與萌發率存在一定相關性。

劉偉等[9]認為,白花丹參種子采集時應選每年的6-7月上旬,去掉果穗頂端1/3部分,收集剩余果穗進行后續晾曬與清選。本研究顯示,白花丹參主果穗上段結實多、種子萌發率高,采集時應優選主果穗上段。目前有關白花丹參種子特性的報道較少,推測可能是試驗材料、生境等因素的差異造成研究結果的不同,白花丹參種子成熟特性有待進一步研究探討。

白花丹參主果穗中,采收時獲得種子粒數多的部位,其結實的種子的萌發率也較高。丹參主果穗下段結實的種子萌發率最高,但單穗種子粒數最少,與白花丹參不同。結實率與花期早晚相關[10],試驗所用白花丹參和丹參花期不完全相同,可能是造成差異的原因之一。

實際生產中,種子成熟度不一致,貯藏條件不理想等因素可能會造成白花丹參和丹參種子萌發率偏低的情況[11-12],播種前,可通過篩選、預處理等方式提高種子萌發率,適量增大播種量等方式,以保證生產使用。丹參和白花丹參種子成熟期有所差別,可根據實際情況分時段進行采收和育苗。

綜上,白花丹參采收時應優選中上段,丹參優選中下段,并通過分批集中的方法,提高種子質量均一程度。通過萌發率、含水量、千粒重等種子特性及單穗種子粒數的比較,白花丹參與丹參種子質量總體差別不大,能否與《中華人民共和國藥典》記載丹參同等入藥,還需進一步研究論證。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部[S].北京:中國醫藥科技出版社,2015:76.

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[3] 李金莉.丹參種質資源的收集、分類研究和評價[D].濟南:山東農業大學,2012.

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[6] 李長峰.丹參與白花丹參的比較研究[D].濟南:山東中醫藥大學,2008.

[7] 單成鋼,張教洪,王光超,等.丹參種子特性研究[J].中國中藥雜志,2013,15(8):680-684.

[8] 馮蕾,冀海偉,王德才,等.白花丹參與紫花丹參揮發油成分的比較[J].精細化工,2009,26(7):662-670.

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StudyonCharacteristicsofSalviamiltiorrhizaBge.andSalviamiltiorrhizaBge.var.miltiorrhizaf.albaC.Y.WuetH.W.LiSeeds

LI Ying1,LIJunde1,LIFengsheng2,LIXiaolin1*

(1.StateKeyLaboratoryBreedingBaseofDao-diHerbs,NationalResourceCenterforChineseMateriaMedica,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijng100700,China;2.LaiwuZiguangEcologicalParkCo.,Ltd.,Laiwu271100,China)

Objective:To compare the characteristics betweenSalviamiltiorrhizaBge.andS.miltiorrhizaBunge var.miltiorrhizaf.albaC.Y.Wu et H.W.Li seeds of different harvest parts.Method:The upper,middle and lower sectionS.miltiorrhizaBunge andS.miltiorrhizavar.miltiorrhizaf.albaseeds on the main ear were collected for the determination of seed germination rate,moisture content,quantity per ear and thousand seed weight.Results:ForS.miltiorrhizavar.miltiorrhizaf.alba,the higher ear section,the higher germination rate was,and the more quantity per ear was,forS.miltiorrhiza,the ear section lower,the higher germination rate was,and the air in middle section had the largest seed quantity per ear.Different harvest parts had no significant effect on moisture content and thousand seed weight.Conclusion:S.miltiorrhizaandS.miltiorrhizavar.miltiorrhizaf.albaseeds are provided with different characteristics,upper and middle section are preferred when harvesting forS.miltiorrhizavar.miltiorrhizaf.albaseeds,while middle and lower are better forS.miltiorrhizaseeds.Partial concentration method is supposed to improve the quality of seed uniformity degree.

SalviamiltiorrhizaBge.;S.miltiorrhizaBge.var.miltiorrhizaf.albaC.Y.Wu et H.W.;seeds;flower color;harvest parts

2016-09-02)

國家自然基金項目(81102757),中國中醫科學院基本科研業務費自主選題項目(ZZ0808004)

*

李曉琳,助理研究員,研究方向:中藥鑒定與種子生物學研究;E-mail:water_in_sky@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.12.017

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