擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究與制訂△

付長(zhǎng)珍，潘俊倩，郭寶林

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥用植物研究所，北京 100193)

·中藥農(nóng)業(yè)·

擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究與制訂△

付長(zhǎng)珍，潘俊倩，郭寶林*

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥用植物研究所，北京 100193)

目的：研究和制訂擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：通過對(duì)不同來源的14份擬巫山淫羊藿種子扦樣、癟殼率、千粒重、發(fā)芽率、含水量和生活力的研究，建立相應(yīng)的檢驗(yàn)方法，并對(duì)7份不同來源擬巫山淫羊藿種子進(jìn)行檢驗(yàn)，各項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析作為分級(jí)依據(jù)的參考。結(jié)果與結(jié)論：擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量等級(jí)可以分2個(gè)，影響擬巫山淫羊藿種子品質(zhì)的主要因素有：發(fā)芽率、千粒重、生活力和癟殼率。

擬巫山淫羊藿；種子；質(zhì)量；分級(jí)

擬巫山淫羊藿EpimediumpseudowushanenseB.L.Guo為小檗科淫羊藿屬的一種多年生常綠草本植物，分布于貴州黔東南州、黔南州和貴陽(yáng)市，尤其集中分布于貴州省黔東南州雷山縣，少量分布于廣西北部。該植物2月萌發(fā)新芽，3月始花，5月上旬至中旬果實(shí)和種子成熟[1]。目前淫羊藿藥材資源主要來自于野生，隨著用量大幅度增加，其野生資源蘊(yùn)藏量逐年銳減[2]。發(fā)展栽培化是解決資源問題的根本出路，在淫羊藿屬植物引種馴化和種植的起步階段，使用的是分根繁殖，繁殖系數(shù)低，本研究組研究了解除該種淫羊藿種子形態(tài)生理休眠的方法[3]，并進(jìn)行了生產(chǎn)應(yīng)用，目前擬巫山淫羊藿在貴州雷山種植已有一定規(guī)模，但其種子卻缺乏相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。制訂種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)有助于該物種的擴(kuò)大種植生產(chǎn)和種子的流通。本論文采集了擬巫山淫羊藿野生分布區(qū)和種植區(qū)域的十幾份種子，通過對(duì)擬巫山淫羊藿種子千粒重、含水量、生活力等主要品質(zhì)檢驗(yàn)指標(biāo)的研究，初步制訂了擬巫山淫羊藿種子的質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。

1 試驗(yàn)材料

擬巫山淫羊藿分布于貴州省黔南州和黔東南州的部分地區(qū)，核心分布區(qū)在貴州省雷山縣，種植區(qū)也在貴州省雷山縣，共收集材料14份。據(jù)前期研究發(fā)現(xiàn)，擬巫山淫羊藿種子不耐干藏，采收回來的種子立即水洗搓去種阜，濕沙藏層積處理，直至播種。因而本研究以濕種子為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，初始取樣為沙子和種子的混合物。具體來源和編號(hào)見表1。

2 試驗(yàn)方法

2.1 扦樣

采用徒手法扦取初次樣品：(1)隨機(jī)從樣本容器中不同點(diǎn)取種子和沙子的混合物；(2)手指合攏，握緊種子，以免有種子漏出；(3)確保盛樣容器干凈；(4)在扦取每次初次樣品時(shí)，應(yīng)把手上東西刷落。然后采用“徒手減半法”分取試驗(yàn)樣品：(1)將種子和沙均勻地倒在一個(gè)光滑清潔的平面上；(2)使用平邊刮板將樣品先縱向混合，再橫向混合，重復(fù)混合4～5次，充分混勻成一堆；(3)把整堆種子分成兩半，每半再對(duì)分一次，這樣得到四個(gè)部分。然后把其中的每一部分再減半分成八個(gè)部分，排成兩行，每行四個(gè)部分，合并和保留交錯(cuò)部分，如將第一行的第l、3部分和第2行的2、4部分合并，把留下的四個(gè)部分拿開；(4)將上一步保留的部分，再按照2，3，4個(gè)步驟重復(fù)分樣，直至分得所需的樣品重量為止。最后將樣品與沙混合保持濕潤(rùn)(沙捏之成團(tuán)，拍之即散)，置于室溫或者室外蔭涼處。高于25℃的持續(xù)時(shí)間不得多于15天，否則種子容易死亡腐爛。

2.2 癟殼率

取ws-1，ws-7和ws-13三個(gè)編號(hào)種子各117 g送驗(yàn)樣品作為試驗(yàn)樣品，為沙和種子混合物，過20目篩篩去沙子，分別隨機(jī)數(shù)取10×100粒種子，水選，計(jì)算其癟殼率。再?gòu)某了N子中隨機(jī)數(shù)取4×100粒種子，用解剖刀逐粒解剖，分別記錄實(shí)粒種子數(shù)和癟殼種子數(shù)，計(jì)算癟殼率。

2.3 生活力測(cè)定

采用四唑染色法(TTC)測(cè)定種子生活力。TTC溶液配制：用pH 6.5 ～ 7.0的磷酸緩沖溶液將2，3，5-氧化三苯基四氮唑(TTC)配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的溶液，避光保存。使用時(shí)用緩沖溶液稀釋至不同濃度。染色：TTC濃度設(shè)0.5%和1.0%，染色溫度35 ℃，染色時(shí)間0.5、1、2、3 h。對(duì)ws-10種子進(jìn)行生活力測(cè)定，將濕藏的種子沿中軸縱切(兩部分均含有胚)(為了使胚的主要結(jié)構(gòu)和活的營(yíng)養(yǎng)組織暴露出來，便于四唑溶液快速而充分的滲入和觀察鑒定，考察完全縱切和縱切但不完全切開兩種方法)，放入培養(yǎng)皿中，滴入不同濃度的TTC溶液直至浸沒種子，置設(shè)定溫度的恒溫箱中避光染色。每個(gè)處理3次重復(fù)，每重復(fù)50粒種子。另取60粒種子放入沸水中煮30 min，染色，作為參照。

2.4 重量測(cè)定

篩取沙子的種子，水洗去掉癟殼，然后用吸水紙吸干表面水分，晾1～2 h至種子表面干爽無水濕。采用百粒法和千粒法測(cè)定ws-1，ws-7和ws-13三個(gè)編號(hào)種子的質(zhì)量。(1)百粒法：試樣取8或16個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100粒，重復(fù)間變異系數(shù)×100<4.0[變異系數(shù)=(標(biāo)準(zhǔn)差/平均值)×100]，測(cè)定值才有效，如變異系數(shù)超過上述限度，則應(yīng)再測(cè)定8個(gè)重復(fù)，并計(jì)算16個(gè)重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)差。凡與平均數(shù)之差超過兩倍標(biāo)準(zhǔn)差的重復(fù)略去不計(jì)。從8個(gè)或8個(gè)以上的每個(gè)重復(fù)的平均重量，再換算成千粒重。(2)千粒法：試樣取2個(gè)重復(fù)，每重復(fù)1000粒，兩重復(fù)間差數(shù)與平均數(shù)之比<5%，測(cè)定值才有效。

2.5 發(fā)芽實(shí)驗(yàn)

2.5.1 種子要求 經(jīng)層積處理至胚長(zhǎng)滿的種子，每組3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)100粒種子。其中胚長(zhǎng)滿的界定：隨機(jī)數(shù)取30粒種子，解剖，觀察胚率，45%種子胚率超過60%，即為胚長(zhǎng)滿。胚長(zhǎng)滿(胚率60%左右)的擬巫山淫羊藿種子在適宜的條件下就可以發(fā)芽了。

2.5.2 適宜發(fā)芽溫度和發(fā)芽床的選擇 (1)不同溫度和發(fā)芽床的初選：ws-7號(hào)胚長(zhǎng)滿的種子進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)，選擇10℃、15℃、20℃、25℃四個(gè)溫度，選擇了沙床和紙床兩種發(fā)芽基質(zhì)，統(tǒng)計(jì)發(fā)芽情況；(2)低溫發(fā)芽溫度篩選：取ws-10號(hào)胚長(zhǎng)滿種子，選擇4 ℃、7 ℃、11 ℃、15 ℃四個(gè)溫度，紙床發(fā)芽，統(tǒng)計(jì)了15天的發(fā)芽情況；(3)低溫不同發(fā)芽床的篩選：取ws-10號(hào)種子，選擇4 ℃，紙床和沙床兩種發(fā)芽基質(zhì)，15天的發(fā)芽結(jié)果。

2.5.3 發(fā)芽初次和末次計(jì)數(shù)時(shí)間 采用上述選定的適宜發(fā)芽床—紙床，做發(fā)芽實(shí)驗(yàn)(ws-10和ws-14)，開始每隔1天觀察是否發(fā)芽，記錄初次發(fā)芽時(shí)間，后每隔第7天統(tǒng)計(jì)發(fā)芽情況，至不再發(fā)芽。

2.6 含水量測(cè)定

擬巫山淫羊藿種子含水量采用低恒溫烘干法和高溫烘干法。具體操作如下：先將樣品盒預(yù)先烘干、冷卻、稱重，并記下盒號(hào)，每個(gè)樣品2個(gè)重復(fù)，每重復(fù)樣品量約4.5 g，將試樣(上述重量法測(cè)定相同處理的種子)放入預(yù)先烘干和稱重過的樣品盒內(nèi)，再稱重(精確至0.001 g)。使烘箱通電預(yù)熱至110 ℃(視測(cè)定的樣品數(shù)量而定，數(shù)量多溫度可再調(diào)高一些)，將樣品攤平放入烘箱內(nèi)，迅速關(guān)閉烘箱門，再將烘箱溫度調(diào)至103 ℃，使箱溫在5～10 min內(nèi)回升至103±2 ℃時(shí)開始計(jì)算時(shí)間，烘8±1 h。用坩堝鉗或戴上手套蓋好盒蓋(在箱內(nèi)加蓋)，取出后入干燥器內(nèi)冷卻至室溫，約30～45 min后再稱重。高溫烘干法與低恒溫烘干法相同，首先將烘箱預(yù)熱至140 ℃，把樣品放入烘箱后再將烘箱溫度調(diào)至130 ℃，打開箱門5-10 min后，烘箱溫度須保持130～133 ℃，樣品烘干時(shí)間為4.5 h。

2.7 種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究

選取7份(ws-7、ws-8、ws-10、ws-11、ws-12、ws-13和ws-14)經(jīng)層積處理完成胚后熟的種子進(jìn)行了檢測(cè)。徒手減半分樣法分取樣品；百粒法測(cè)定種子的千粒重；高溫烘干3.5 h測(cè)定種子的水分含量，四唑染色法(35 ℃，0.5%TTC染色2 h)測(cè)定種子的生活力；在4 ℃下以紙床為為發(fā)芽床進(jìn)行發(fā)芽實(shí)驗(yàn)，測(cè)定發(fā)芽率。采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行K聚類分析，初步制定擬巫山淫羊藿種子的質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。

3 結(jié)果與分析

3.1 扦樣

擬巫山淫羊藿濕種子千粒重在3.5～5.5 g。為保證種子粒數(shù)，選擇千粒重上限為依據(jù)。而凈度分析送檢樣品應(yīng)不少于2500粒種子；送驗(yàn)樣品總重量應(yīng)超過凈度分析量10倍以上。據(jù)此算出凈度分析試驗(yàn)樣品最小重量不少于15g(計(jì)算值13.75g)；送驗(yàn)樣品總重量應(yīng)超過150 g(計(jì)算值137.5 g)；種子批的最大重量1000 kg。

擬巫山淫羊藿種子于每年五月底采收后，即用水浸泡，搓去種阜(因種阜腐爛可能會(huì)引發(fā)沙藏過程中種子霉變)后按(質(zhì)量比)種子：濕沙子=1∶5的比例沙藏，沙子的持水量為50～60%。

由于種子的保存方式是保濕沙藏，扦樣所取的是種子和濕沙的混合物，為確保用于種子檢驗(yàn)分析的種子量，所取沙和種子混合物的重量=150×(1+5)g，種子在沙藏過程中可能產(chǎn)生15-30%霉變，所以送驗(yàn)樣品的沙和種子混合物的重量=150 g×(1+5)×1.3=1170 g。

3.2 癟殼率

未經(jīng)過水清選的供試種子ws-1，ws-7和ws-13的癟殼率分別為65.6%，60.7%和39.5%，經(jīng)水清選后，癟殼率分別為5.2%，4.7%和2.7%，采用水清選法選取實(shí)粒種子。

3.3 生活力測(cè)定

3.3.1 染色前的準(zhǔn)備 因擬巫山淫羊藿種子成熟時(shí)，種胚未發(fā)育完全，胚率7.9%，若采用完全縱切種子成兩半，在染色過程中，種胚容易脫落不便于觀察，因而采用縱切但不完全切開的處理方法。

3.3.2 染色條件的確定 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，擬巫山淫羊藿種子(ws-10進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn))胚染色較容易，1.0%TTC染色1 h胚基本都染色，染色2 h、3 h后，胚和胚乳染色都很深，二者在染色程度上差異不大，易與衰弱組織的染色混淆；0.5%TTC染色1 h有超過50%的種子染色，染色2h后胚基本都染色，且染色均勻，染色3h后，種子染色數(shù)目與染色2 h無明顯差異，但顏色偏深。見圖2。

圖2 不同染色時(shí)間擬巫山淫羊藿種子(ws-10)生活力情況

3.3.3 生活力的鑒定標(biāo)準(zhǔn) 在染色過程中發(fā)現(xiàn)，除了腐爛種子，其他有胚種子皆染成鮮亮紅色，因而鑒定標(biāo)準(zhǔn)確立為染色后胚乳顏色暗沉、胚部漆黑、組織軟腐(圖3A)和僅具粘液質(zhì)(圖3C右)皆為無活力；其它為有活力，見圖3B，胚發(fā)育的不同階段染色情況見圖3B、C(左)、D。

圖3 擬巫山淫羊藿種子種胚不同階段的染色情況

3.4 重量測(cè)定

采用百粒重和千粒重測(cè)定結(jié)果見表2和表3，表2顯示兩份樣品所測(cè)得的變異系數(shù)皆<4.0，說明采用百粒重法可估測(cè)千粒重，且測(cè)得的結(jié)果與直接用千粒重測(cè)得的結(jié)果無顯著差異，因而選擇百粒法用于重量測(cè)定，由于本論文所述擬巫山淫羊藿種子為沙藏層積處理后胚長(zhǎng)滿，可用于播種的種子，不能干燥，因此種子千粒重和含水量數(shù)據(jù)的離散性比較大。

表2 百粒法測(cè)定擬巫山淫羊藿種子千粒重

表3 千粒法測(cè)定擬巫山淫羊藿種子千粒重

3.5 發(fā)芽實(shí)驗(yàn)

3.5.1 適宜發(fā)芽溫度和發(fā)芽床的選擇(胚長(zhǎng)滿的種子)

(1)不同溫度和發(fā)芽床的初選 發(fā)芽床實(shí)驗(yàn)，起始在20°條件下用了4個(gè)發(fā)芽床，除了紙床和沙床外，采用了濾紙覆蓋和蛭石，但是發(fā)現(xiàn)濾紙覆蓋和紙床情況非常接近，蛭石和沙床情況非常接近，所以其他溫度沒有用濾紙覆蓋和蛭石，而選擇了常用的兩個(gè)發(fā)芽床。

第一批的發(fā)芽實(shí)驗(yàn)持續(xù)75 d，發(fā)芽結(jié)果見圖4，表明10 ℃效果好于其他溫度處理，紙床好于其他發(fā)芽床，但整體發(fā)芽率皆不高。

(2)低溫發(fā)芽溫度篩選 統(tǒng)計(jì)15 d內(nèi) ws-10號(hào)種子的發(fā)芽情況，結(jié)果見圖5，表明4 ℃是比較理想的發(fā)芽溫度。

(3)低溫不同發(fā)芽床的篩選 統(tǒng)計(jì)15 d內(nèi) ws-10號(hào)種子的發(fā)芽情況，結(jié)果見圖6，表明紙床好于沙床。

圖4 擬巫山淫羊藿種子不同溫度和發(fā)芽床的發(fā)芽結(jié)果(75 d)

圖5 擬巫山淫羊藿種子(ws-10)不同發(fā)芽溫度下紙床發(fā)芽的發(fā)芽率情況(15 d)

圖6 擬巫山淫羊藿種子(ws-10)4 ℃不同發(fā)芽床發(fā)芽率情況(15 d)

參考上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，最佳發(fā)芽溫度為4 ℃，結(jié)合其他研究，發(fā)芽溫度定為2～4 ℃。發(fā)芽床為紙床。

3.5.3 發(fā)芽初次和末次時(shí)間 在4 ℃下，紙床作為發(fā)芽床，取ws-10和ws-14號(hào)種子進(jìn)行發(fā)芽實(shí)驗(yàn)，第3 d、7 d，以后每7 d統(tǒng)計(jì)一次發(fā)芽情況。結(jié)果見圖7。

圖7擬巫山淫羊藿種子(ws-10、ws-14)不同時(shí)間發(fā)芽率情況

據(jù)此，可以每7 d統(tǒng)計(jì)發(fā)芽情況，到35 d，進(jìn)入發(fā)芽平臺(tái)期，因此發(fā)芽初次計(jì)數(shù)時(shí)間為第7 d，末次計(jì)數(shù)時(shí)間為35 d。

3.6 含水量測(cè)定

不同烘干法測(cè)定ws-10號(hào)擬巫山淫羊藿種子含水量結(jié)果一致，沒有差異(見表4)，我們采用低溫烘干法測(cè)定不同烘干時(shí)間的ws-10和 ws-7號(hào)種子的含水量如圖8所示，結(jié)果表明低溫烘干3.5 h可以恒重，因此最后確定用低溫烘干法烘3.5 h。

表4 兩種烘干法對(duì)測(cè)定擬巫山淫羊藿“ws-10”種子水分含量(n=2，P<0.05)

圖8 擬巫山淫羊藿種子低溫烘干種子含水量變化

3.7 種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究

按以上方法對(duì)收集的7份樣品的癟殼率、千粒重(胚長(zhǎng)滿后)、生活力和發(fā)芽率進(jìn)行了檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如下表5。擬巫山淫羊藿種子癟殼率20.0～60.7%，多數(shù)材料的癟殼率低于40.0%。其中，ws-10號(hào)種子的癟殼率最低，為20.0%；ws-7癟殼率最高，為60.7%。千粒重(胚長(zhǎng)滿后)3.84～5.79g，ws-7千粒重最高，ws-8千粒重最低。生活力62.67～99.12%，除去ws-8生活力最低為62.67%，其余都高于90%。發(fā)芽率57.9～91.0%，ws-8發(fā)芽率最低，ws-10發(fā)芽率最高。

采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)發(fā)芽率、千粒重、生活力和癟殼率檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行K聚類分析，以聚類中心值作為擬巫山淫羊藿種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的參考值，初步制定擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果見表6。將7份擬巫山淫羊藿種子聚類分析后，劃分為2個(gè)等級(jí)，其中一級(jí)有6個(gè)，二級(jí)有1個(gè)。

表5 擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果

表6 擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

4 討論

4.1 擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量檢驗(yàn)方法

開展種子質(zhì)量檢驗(yàn)研究，制定種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)規(guī)程，是國(guó)家推進(jìn)中藥材規(guī)范化栽培的一項(xiàng)重要任務(wù)。目前，除了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局已經(jīng)發(fā)布的人參種子國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)外，只有如甘草、桔梗、明黨參等少數(shù)的藥用植物開展了種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的初步研究[4-6]。絕大多數(shù)中藥材種子沒有相應(yīng)的檢驗(yàn)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，使得中藥材種子質(zhì)量控制受到制約。擬巫山淫羊藿的種子休眠特性和淫羊藿屬其他物種具有相似性，本研究結(jié)果可以用于淫羊藿屬其他物種的種子進(jìn)行參考。目前，藥用植物種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及品質(zhì)檢驗(yàn)研究方法主要參考農(nóng)作物種子，同時(shí)結(jié)合藥用植物種子自身的特性進(jìn)行一定的修改。本實(shí)驗(yàn)從扦樣、癟殼率、千粒重、發(fā)芽率、含水量和生活力幾個(gè)方面對(duì)擬巫山淫羊藿種子品質(zhì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行了研究，確定適宜的種子品質(zhì)檢驗(yàn)方法，由于擬巫山淫羊藿種子的特殊性決定了其與一般種子的檢驗(yàn)規(guī)程有所不同，主要體現(xiàn)在：(1)擬巫山淫羊藿種子不耐干藏，采收回來的種子立即水洗搓去種阜，濕沙保存，其種子千粒重為濕種子的千粒重，本研究考察了胚未萌動(dòng)與胚長(zhǎng)滿時(shí)種子千粒重的差異，所測(cè)樣品普遍表現(xiàn)為，胚長(zhǎng)滿時(shí)千粒重要大，可能是不飽滿種子層積過程中發(fā)生了變化；(2)樣品與濕沙混合，按常規(guī)的凈度分析實(shí)驗(yàn)來做，意義不大，由于在層積過程中會(huì)產(chǎn)生很多癟殼種子，單從外形上無法與實(shí)粒種子分開，用水清選可很好地除去這類種子，因而用癟殼率代替凈度分析；(3)由于擬巫山淫羊藿種子具形態(tài)生理休眠(MPD)，需先經(jīng)過層積處理，種子才能萌發(fā)。本規(guī)程采用10 ℃層積處理至胚長(zhǎng)滿，再轉(zhuǎn)入4 ℃，無論供試種子胚的發(fā)育處于哪一階段，都可按此方法來操作；(4)通過生活力的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)對(duì)擬巫山淫羊藿種子來說，若無特殊原因，除了腐爛種子、胚部?jī)H具粘液質(zhì)和未成熟種子外，只要種子有胚，便具有生活力，且隨著胚不斷發(fā)育完全，染色也越來越容易。

4.2 擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

K類中心聚類分析是利用數(shù)學(xué)原理的分級(jí)方法，它與其他分級(jí)方法，如平均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差法、頻度劃分法、正態(tài)分布線分級(jí)法、材料綜合整理法有所不同，是屬于數(shù)據(jù)類的平均劃分，更適宜于判斷物體的內(nèi)在品質(zhì)，在中藥材種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)當(dāng)中也是一種常見的分析方法，如在金蓮花、桔梗、遠(yuǎn)志、夏枯草等中藥材中均有應(yīng)用[7-9]。因此使用此方法制定的擬巫山淫羊藿種子分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)更為科學(xué)、可行。本實(shí)驗(yàn)以發(fā)芽率、千粒重、生活力和癟殼率4項(xiàng)指標(biāo)初步制定了擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。分級(jí)方法采用最低定級(jí)原則，即任何一項(xiàng)指標(biāo)不符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)都不能作為相應(yīng)等級(jí)的合格種子。在分級(jí)的4項(xiàng)指標(biāo)中，發(fā)芽率最為重要，因其可較直接反映種子的田間出苗率。千粒重可反映種子飽滿程度和種子成熟度等。而癟殼率和種子含水量往往受到環(huán)境溫度、濕度等的影響，可通過再加工如清選和干燥等或者控制這些影響因素來提高質(zhì)量。本分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)中以發(fā)芽率、千粒重2個(gè)指標(biāo)為主判斷種子質(zhì)量。不同來源擬巫山淫羊藿種子質(zhì)量差異較大，發(fā)芽率最高可達(dá)91.0%，最低有57.9%，大部分集中在70～90%之間，所以將一級(jí)種子發(fā)芽率定為85.5%以上，二級(jí)定為57.9%以上，低于57.9%的種子視為不合格種子；擬巫山淫羊藿種子千粒重在3.84～5.79 g，根據(jù)K聚類分析結(jié)果，將一級(jí)種子定為5.2 g以上，二級(jí)定為3.8 g以上，低于3.8為不合格種子；而種子生活力在62.67～99.12%之間，所以定為生活力低于62.7%視為不合格種子；癟殼率在20.0～60.7%之間，為保證種子質(zhì)量，高于48%的種子為不合格種子。

[1] 郭寶林，何順志，鐘國(guó)躍，等.中國(guó)淫羊藿屬(小檗科)二新種[J].植物分類學(xué)報(bào)，2007，45(6)：813-821.

[2] 龍興超，馬逾英.全國(guó)中藥材購(gòu)銷指南[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：137.

[3] 付長(zhǎng)珍，王新村，郭寶林，等.擬巫山淫羊藿種子休眠特性的初步研究[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28(18)：76-80.

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StudyonSeedQualityStandardofEpimediumpseudowushanenseB.L.Guo

FU Changzhen，PANJunqian，GUOBaolin*

(InstituteofMedicinalPlantDevelopment，ChineseAcademyofMedicalSciences&PekingUnionMedicalCollege，Beijing100193，China)

Objective：To study and formulate the seed quality grading standard ofEpimediumpseudowushanenseB.L.Guo.Methods：Seed quality testing methods were developed with 14 different sources，which included the test of sampling，deflated shell rate，weight per 1000 seeds，germination rate，seed moisture and seed viability.The related data from 7cases of seed specimens ofE.pseudowushanenseGuo were analyzed by cluster analysis.Results andConclusion：The seed quality grading ofE.pseudowushanenseGuo were divided into 2 grades.Germination rate，thousand-grain weight，viability and the deflated shell ratewere the primary indicators of seed quality grading.

EpimediumpseudowushanenseB.L.Guo；seed；quality；classification

2016-03-15)

國(guó)家科技重大專項(xiàng)——重大新藥創(chuàng)制，中藥材種子種苗和種植(養(yǎng)殖)標(biāo)準(zhǔn)平臺(tái)項(xiàng)目(2012ZX0934006)

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郭寶林，研究員，研究方向：藥用植物資源和栽培；Tel：(010)57833172，guobaolin010@163.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.12.016