-80 ℃超低溫冰箱冷凍保存豬精液的初步研究

陳明明，王開林，楊林昆，李林輝，王寶英，王福兄，郝志明

(天津農(nóng)學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)系，天津 300384)

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-80 ℃超低溫冰箱冷凍保存豬精液的初步研究

陳明明，王開林，楊林昆，李林輝，王寶英，王福兄，郝志明

(天津農(nóng)學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)系，天津 300384)

本試驗(yàn)從細(xì)管規(guī)格、基礎(chǔ)稀釋液成分(檸檬酸和甘氨酸)、甘油濃度和解凍方法對(duì)豬精液在-80 ℃超低溫冰箱中冷凍保存凍后精子存活率的影響進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：(1)0.25 mL和0.5 mL細(xì)管之間沒有明顯差異(P>0.05)，其凍后存活率均達(dá)到0.57左右。(2)冷凍液中甘油濃度為3%時(shí)，凍后豬精子存活率最高，達(dá)0.50±0.035；基礎(chǔ)液中檸檬酸的含量為1.3%時(shí)，精子的凍后存活率極顯著高于1.7%時(shí)(P<0.01)；基礎(chǔ)液中甘氨酸的含量為7.5 mg/mL時(shí)，則不能影響精子的凍后存活率(P>0.05)。(3)解凍方法為61 ℃ 5 s時(shí)，精子凍后存活率最高，達(dá)0.61±0.055。

豬精液；-80 ℃超低溫冰箱；細(xì)管規(guī)格；檸檬酸；甘氨酸；甘油濃度；解凍方法

1776年，Spallanazani將青蛙、馬和人類的精液置于雪中以嘗試?yán)鋬霰４鎇1]。此后，精液0 ℃以下保存的研究受到了廣泛的關(guān)注。直到1949年，Polge等[2]發(fā)現(xiàn)甘油對(duì)精子具有抗凍保護(hù)作用后，精液的冷凍保存技術(shù)才取得了重大的突破，并于1956年，首次成功冷凍保存了豬精液[3]。但此后多年，由于豬精子對(duì)低溫更加敏感，以及豬輸精量大和常溫保存較為成功，使豬精液的冷凍保存研究和應(yīng)用停滯不前。近些年來，隨著低溫生物學(xué)以及牛、犬等動(dòng)物精子冷凍保存技術(shù)的發(fā)展，豬精子冷凍保存的研究明顯增多，效果顯著提高，凍后存活率超過0.5的研究報(bào)道比比皆是[4～7]。精液冷凍保存的方法有采用液氮作為冷源的，也有用干冰作為冷源的。本試驗(yàn)以-80 ℃超低溫冰箱為冷源，對(duì)豬精液的冷凍保存進(jìn)行了初步研究，以期探索其可行性及其效果。