中樞神經系統白血病腦脊液MMP-2和TIMP-2測定的臨床意義

楊　華　沈立云　杜幸軍　馬鴻雁

鄭州大學第二附屬醫院血液科　鄭州　450014

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中樞神經系統白血病腦脊液MMP-2和TIMP-2測定的臨床意義

楊華沈立云杜幸軍馬鴻雁

鄭州大學第二附屬醫院血液科鄭州450014

目的探討腦脊液中基質金屬蛋白酶2(MMP-2)、基質金屬蛋白抑制劑2(TIMP-2)對中樞神經系統白血病(CNSL)診斷的意義。方法采用酶聯免疫吸附方法檢測CNSL組、無CNSL組和對照組腦脊液中MMP-2、TIMP-2表達水平的變化。結果CNSL組腦脊液中MMP-2和TIMP-2均高于無CNSL組和對照組，差異有統計學意義(P<0.05))。結論腦脊液中MMP-2、TIMP-2在CNSL的表達明顯升高，提示其檢測在早期診斷CNSL方面有一定意義。

中樞神經系統白血病；基質金屬蛋白酶

中樞神經系統白血病(central nervous system leiukemia，CNSL)是急性白血病嚴重并發癥，對白血病患者的預后起重要作用，嚴重威脅白血病患者的生存。如何早期診斷早期治療檢測中樞神經系統白血病(CNSL)是目前白血病的治療難點。基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)是一大類能降解細胞外基質成分的重要蛋白分解酶，特別是MMP-2在惡性腫瘤的浸潤轉移過程起著重要作用。本研究通過檢測中樞神經系統白血病(CNSL)患者腦脊液中MMP-2和TIMP-2的表達水平，旨在探討MMP-2和TIMP-2與白血病細胞中樞浸潤的相關性，以及與MMP-2和TIMP-2在CNSL早期診斷中的意義。

1　材料和方法

1．1研究對象收取鄭州大學第二附屬醫院血液科2011—2015年診治的67例白血病患者，中位年齡 42(2～77)歲，男35例，女32例；其中 AML 37例，ALL 25例，慢性髓細胞白血病急變(CML)5例。選取按血液病診斷及治療標準[1]確診的CNSL患者(初診或復發)29例。收取無中樞神經系統病變的非腫瘤患者腦脊液31例為對照組，男 19例，女 12例，中位年齡 44(5～74)歲。

1．2采集標本在初診、復發或預防性鞘內化療的白血病患者分別留取腦脊液標本，在腰穿鞘注前留取對照組的腦脊液標本。所有標本于室溫下 3 500 rpm/min離心 20 min，分裝上清，-20 ℃凍存等待檢測。

1．3MMP-2和TIMP-2的檢測采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗檢測MMP-2和TIMP-2(北京邦定生物醫學公司試劑盒)。按說明書進行所有操作。

2　結果

(1)CNSL組腦脊液中MMP-2和TIMP-2水平均高于無CNSL組和對照組，3組間水平差異均有統計學意義(P<0.05)。但無CNSL組的MMP-2和TIMP-2水平與對照組水平差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。(2)應用直線相關分析MMP-2和TIMP-2在腦脊液中表達水平，分析結果提示二者表達水平無相關性，差異無統計學意義(P>0.05)。

表1　3組MMP-2和TIMP-2水平比較

注：與對照組相比，▲P<0.05；與無CNSL組相比，△P<0.05；與CNSL組相比，*P<0.05

3　討論

急性白血病作為造血系統的惡性腫瘤，從骨髓原發灶向髓外浸潤擴散，白血病原始細胞逸出骨髓，浸潤髓外器官、組織。這些過程需骨髓外基質和基底膜變形和修飾，穿透基質屏障、血管壁等[2]，中樞神經系統白血病作為急性白血病髓外浸潤的常見部位，早期診斷十分重要，但具體發病機制并不十分清楚。基質金屬蛋白酶家族作為重要的骨髓外基質蛋白降解酶在多種腫瘤的侵襲和轉移中發揮重要作用。MMP-2屬于基質金屬蛋白酶的明膠酶，基質金屬蛋白酶抑制物(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase，TIMP)作為內源性MMP抑制劑已知有4種，其中TIMP-2比較特異的抑制MMP-2。MMP-2 和TIMP-2已有研究證實參與多種腫瘤的侵襲和轉移[3-4]。此外，MMP-2 和TIMP-2在急性白血病的浸潤轉移過程也有證據顯示發揮了作用[2]。目前有關MMP-2 和TIMP-2在中樞神經系統白血病患者腦脊液中表達情況研究不多。本研究檢測了腦脊液中MMP-2 和TIMP-2的表達情況，初步研究MMP-2 和TIMP-2與白血病細胞中樞浸潤的相關性。結果顯示，MMP-2水平在白血病患者腦脊液中明顯高于對照組，且CNSL組患者腦脊液中的MMP-2水平高于無CNSL組。在本實驗中，MMP-2 和TIMP-2的比值在中樞神經系統白血病患者腦脊液中的表達均高于正常對照組，但二者無相關性，說明TIMP-2升高并非起著抑制MMP-2活性作用，可能通過激活MMP-2來促進白血病細胞浸潤。TIMP-2是MMP-2的抑制劑，但又在其酶原的激活過程發揮重要作用[5]。目前的研究認為TIMP-2和MMP-2 通過MT1-MMP形成三元絡合物，進一步激活MMP-2[6]。這些研究結果都說明MMP-2 和TIMP-2之間作用機制復雜，本研究嘗試闡明MMP-2 和TIMP-2之間的關系，也證實了二者之間作用機制復雜，具體的作用機制尚需進一步深入研究。總之，本研究嘗探討MMP-2 和TIMP-2在中樞神經系統白血病中的作用，證實其在中樞神經系統白血病的早期診斷方面有一定意義。

[1]張之南．血液病診斷及療效標準[M]．3版．北京：科學出版社，2007:106-134．

[2]Janowska-Wieczorek A，Marquez LA，Matsuzaki A，et al．Expression of matrix metalloproteinases(MMP-2 and -9)and tissue inhibitors of metalloproteinases(TIMP-1 and -2)in acute myelogenous leukaemia blasts: comparison with normal bonemarrow cells[J]．Br J Haematol，1999，105(2): 402-411．

[3]Guo X T，Wang J F，Zhang L Y，et al．Quantitative assessment of the effects of MMP-2 polymorphisms on lung carcinoma risk[J]．Asian Pac J Cancer Prev，2012，13(6):2 853-2 856．

[4]Chen D，Wang Y，Zhang K，et al．Antisense oligonucleotide against clusterin regulates human hepatocellular carcinoma invasion through transcriptional regulation of matrix metalloproteinase-2 and ecadherin [J]．Int J Mol Sci，2012，13(8):10 594-10 607．

[5]Reis ST，Antunes AA，Pontes JJr，et al．Underexpression of MMP-2 and its regulators，TIMP2，MT1-MMP andIL-8，is associated with prostate cancer [J]．Int Btaz J Urol，2012，38(2):167-174

[6]Lehti K，Lohi J，Juntunen MM，et al．Oligomerization through hemopexin and cytoplasmic domains regulates the activity and turnover of membrane-type 1 matrix metalloproteinase[J]．J Biol Chem，2002，277(10):8 440-8 448．

(收稿2016-03-12))

R733.73

A

1673-5110(2016)18-0047-02

2012年度河南省醫學科技攻關計劃項目(編號：201204055)