黃瓜低霜霉威殘留性相關基因SDH克隆及表達

秦智偉，郭　磊，周秀艷，辛　明（東北農業大學園藝學院，哈爾濱　150030）

黃瓜低霜霉威殘留性相關基因SDH克隆及表達

秦智偉，郭磊，周秀艷，辛明
（東北農業大學園藝學院，哈爾濱150030）

通過Solexa技術和比較基因組學方法鑒定霜霉威脅迫下黃瓜果實差異表達基因，篩選黃瓜低霜霉威殘留性相關基因SDH。研究利用PCR克隆獲得SDH基因全長，命名為CsSDH。構建亞細胞定位表達載體，利用農桿菌浸潤法注射煙草葉片后激光共聚焦顯微鏡下觀察；分別用熒光定量RT-PCR方法和酶聯免疫法研究高、低農殘品系D9320和D0351中CsSDH基因在農藥霜霉威處理后，不同時間點、不同組織部位時空表達特征和琥珀酸脫氫酶活性。結果表明，CsSDH基因在煙草葉片細胞中被定位在細胞膜上。黃瓜低農殘品種D0351中，CsSDH基因在果實受霜霉威脅迫后反應迅速，主要在處理前期響應表達強烈，琥珀酸脫氫酶活性顯著增加，且該基因表達量顯著高于其在高農殘品種D9320中表達量。CsSDH果、葉中表達量較莖中高，且各組織部位表達量高低順序穩定，為葉>果>莖。黃瓜高農殘品種D9320中，CsSDH基因表達量在0.5、1、3、12 h呈現上調表達，6、9 h基因表達量差異不顯著，48 h出現上調表達高峰。說明克隆得到的CsSDH基因屬農藥處理前期響應基因，且該基因可能在降低黃瓜農藥殘留過程中發揮重要作用。試驗通過研究黃瓜琥珀酸脫氫酶基因（SDH）在霜霉威脅迫下表達情況，為挖掘黃瓜低農藥殘留性功能基因以及探明其作用分子機制奠定基礎。

黃瓜；琥珀酸脫氫酶；基因克隆；亞細胞定位；基因……