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葎草“止水痢”功效初探

2016-09-20 07:58:54宮新城周平平陳公武史萬玉河北農業大學中獸醫學院河北保定0700河北農業大學理學院河北保定0700石家莊市農林科學研究院河北石家莊05004
中國動物保健 2016年8期
關鍵詞:黃酮小鼠差異

宮新城,周平平,陳公武,史萬玉(.河北農業大學中獸醫學院河北保定0700;.河北農業大學理學院河北保定0700;.石家莊市農林科學研究院河北石家莊05004)

葎草“止水痢”功效初探

宮新城1,周平平2,陳公武3,史萬玉1
(1.河北農業大學中獸醫學院河北保定071001;2.河北農業大學理學院河北保定071001;3.石家莊市農林科學研究院河北石家莊050041)

葎為了研究草的止水痢功效,試驗采用分步提取揮發油、多糖、黃酮的方法,并對各成分的抑菌、抗炎葎和止瀉作用進行檢測。結果表明葎草揮發油、草多糖對大腸桿菌和沙門氏菌有葎抑制效果;草黃酮可以抑制蛋清引起的腫脹,葎草黃酮(B)組腫脹度為(1.36±0.14)m L,與生理鹽水組相比,差異顯著(P<0.05葎),而草黃酮(A)組的腫脹度為(1.12±0.27)m L,與生理鹽水組相比,差異極顯著(P<0.01);葎草黃酮(A)可以顯著抑制由大黃引起的小鼠腹瀉,與生理鹽水組相比差異顯著(P<0.05葎);草揮發油、葎草多葎糖和草黃酮(A)部對大腸桿菌引起的葎腹瀉都有抑制作用,草黃酮(A)部的腹瀉次數為(30.37±3.13),與生理鹽水組相比差異極顯著(P<0.05葎)。說明草可以從抑菌、止瀉和消炎幾個方面治療動物腹瀉。

葎草;抑菌;消炎;止瀉

葎草味甘、苦,性寒,具有清熱解毒,止水痢的葎功效,民間常用來治療家畜腹瀉。但當前草在獸醫臨床應用中并不多。因此本文以小鼠為試驗動葎葎物,對草止水痢功效進行了研究,為草在獸醫臨床上的應用提供理論依據。

1 材料和方法

1.1材料

葎草,采于河北定州河北農業大學中獸醫學院標本園;大腸桿菌、沙門氏菌,購于中國獸藥監察所;紫外—可見分光光度計(SP-756型),上海光譜儀器有限公司。

1.2葎草有效成分提取葎

準確稱取草粉末250 g,首先用水蒸氣蒸餾法提取揮發油[1];藥渣用水提醇沉法提取多糖[2,3];濾液部分濃縮得到黃酮A部;再將藥渣部分醇提得到黃酮B部。

1.3抑菌試驗

取大腸桿菌、沙門氏菌各5株,接種于營養瓊葎葎脂培養基上,采用挖洞注藥法檢測草揮發油、草多糖、黃酮A部、黃酮B部的抑菌效果。

1.4抗炎試驗將60日齡大鼠25只隨機分為5組,每組5只,分葎葎別灌服生理鹽水、草揮發油、草多糖、黃酮A部、黃酮B部0.5 mL/只,每日給藥一次,連續給藥7 d。末次給藥后30min,將雞蛋清注射于大鼠腳趾部皮下,0.3mL/只。然后將大鼠安裝足跖器容積測量器,在注射雞蛋清后0 h、0.5 h、1 h各測定一次排水量。

鼠爪腫脹度=致炎后鼠爪體積-致炎前鼠爪體積

1.5止瀉作用試驗

1.5.1大黃致瀉模型

大黃200 g,煎煮濃縮至200mL。將20~22 g昆明系小鼠50只,隨機分為5組,分別灌服生理鹽葎葎水、草揮發油、草多糖、黃酮A部、黃酮B部0.5 mL/只,給藥1次/d,連續給藥3 d。于末次給藥后禁食6 h,每只小鼠灌服大黃水提液0.7mL,觀察小鼠排出稀糞數和排出的時間。

1.5.2大腸桿菌致瀉模型

前期處理同1.5.1,末次給藥時,每只小鼠注射氫化可的松0.1mL,并腹腔接種大腸桿菌2×108/只,觀察小鼠排出稀糞數和排出的時間。

2 試驗結果

2.1葎草提取結果

試驗中得到具有特殊濃香氣味的棕褐色揮發油(0.95±0.08)g葎,所采草中揮發油的含量約為0.38%。提取粗多糖(2.98±0.15)g葎,草中多糖的含量為1.19%。藥渣部分得到黃酮(B)部(0.75±0.04)g;提取多糖的濾液部分得到黃酮(A)部(4.20± 0.21)g葎,草中總黃酮的含量為1.98%。

2.2葎草有效成分抑菌試驗結果

試驗結果顯示,葎草揮發油、葎草多糖對大腸桿菌和沙門氏菌都有抑制效果,和葎草黃酮(A)、黃酮(B)相比差異顯著(P<0.05),其中葎草揮發油對大腸桿菌的抑菌效果最好,為(22.2±2.97)mm(見表1)。

表1 葎草不同提取部位體外抑菌結果(n=5, φ=mm)

2.3葎草不同提取部位抗炎作用結果

試驗顯示0.5 h后大鼠足跖腫脹很明顯,但是各組之間差異并不顯著(P>0.05);1 h葎后草黃酮(B)組腫脹度為(1.36±0.14)mL,與生理鹽水組相比,腫脹明顯減輕,差異顯著(P<0.05葎),而草黃酮(A)組的腫脹度為1.12±0.27mL,與生理鹽水組相比降低,差異極顯著(P<0.01)(見表2)。

表2 葎草不同提取部位對雞蛋清所致大鼠足跖腫脹的影響(x±s)

2.4葎草不同部位止瀉作用試驗

2.4.1葎草不同提取部位對大黃致瀉小鼠的作用由試驗可以看到灌服大黃煎劑后6 h 13min生理鹽水組首先出現腹瀉,其他各組也先后出現了腹瀉現象,以葎草黃酮(A)組,出現腹瀉時間最晚,為9 h 20 min。各組出現的腹瀉次數也有差異,以葎草黃酮(A)次數最少,為(2.11±1.24)次,和生理鹽水組相比差異顯著(P<0.05)(見表3)。

表3 葎草不同提取部位對大黃致瀉小鼠的作用結果

2.4.2葎草不同提取部位對大腸桿菌致瀉小鼠的作用

在注射大腸桿菌后3 h,小鼠開始精神倦怠,被毛猬立,渾身發抖,并且開始腹瀉,72 h后沒死的小鼠不再出現腹瀉現象。排出稀糞情況差異也比較大,葎草揮發油組,排稀糞次數為(45.67±3.37)次,葎草多糖組排稀糞次數為(35.35±2.36)次,對大腸桿菌引起的腹瀉有一定的抑制作用,與生理鹽水組相比差異顯著(P<0.05),而葎草黃酮(A)能夠明顯的抑制大腸桿菌引起的腹瀉,為(30.37±3.13)次,與生理鹽水組相比差異極顯著(P<0.01)(見表4)。

表4 葎草不同提取部位對大腸桿菌致瀉小鼠的作用

3 討論

《唐本草》認為葎草有“止水痢”的功效,這也是葎民間用草治療家兔等動物腹瀉的依據所在。試驗葎葎中發現草揮發油、草多糖對大腸桿菌和沙門氏葎菌都有抑制效果,尤其草揮發油是對大腸桿菌的抑制效果更強,抑菌直徑為(22.2±2.97)mm,和其他資料相似[4]葎葎,這也是草止水痢一個佐證。草黃酮對注射蛋清引起的局部腫脹有抑制作用,在治療腹葎瀉時,草黃酮可以通過抗炎起到輔助作用。

試驗中我們復制非感染性腹瀉和感染性腹瀉兩種動物模型,灌服大黃煎劑后6 h 13min,生理鹽水組出現腹瀉,其它各組也先后出現了腹瀉現象,但是葎草黃酮(A)組,出現腹瀉時間最晚,為9 h 20min。葎各組出現的腹瀉次數也有差異,以草黃酮(A)次數最少,和生理鹽水組相比差異顯著(P<0.05)[5]。說明黃酮(A)部對大黃導致的腹瀉有很好的抑制作用。感染性腹瀉模型中,注射大腸桿菌后3 h,小鼠開始精神倦怠,被毛猬立,渾身發抖,并且開始腹瀉,72 h后沒死的小鼠不再出現腹瀉現象,排出稀糞情況差異也比較大,葎草揮發油和葎草多糖對大腸桿菌引起的腹瀉有一定的抑制作用,與生理鹽水組相比差異顯著;而葎草黃酮(A)能夠明顯的抑制大腸桿菌引起的腹瀉,與生理鹽水組相比差異極顯著。因此認為葎草治療動物腹瀉可以從抑菌、止瀉和消炎幾個方面發揮作用。(編輯:方穎)

[1]殷獻華,李天,潘衛東,等.葎草揮發油化學成分分析及其抑菌作用研究[J].山地農業生物學報2010,29(5): 415-418.

[2]褚衍亮,王娜,張明川.葎草多糖的超聲提取及抑菌活性研究[J].時珍國醫國藥,2010,21(2):342-344.

[3]張小靈,丁卓平,褚琳.葎草中多糖微波提取工藝研究[J].遼寧農業科學,2011(3):21-28.

[4]周家駒,謝桂榮,嚴新建.中藥原植物化學成分手冊[M].1版.北京:化學工業出版社2004:546.

[5]柳詩全.葎草栓劑止瀉作用的實驗研究[J].醫藥論壇雜志,2004,25(22): 15-16.

10.3969/j.issn.1008-4754.2016.8.038

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