良好實驗室規范體系下全自動血液分析儀的3Q驗證

張　謙　劉　娜　肖云峰▲.內蒙古醫科大學新藥安全評價研究中心，內蒙古呼和浩特　000；.內蒙古自治區巴彥淖爾市醫院檢驗科，內蒙古巴彥淖爾　05000

良好實驗室規范體系下全自動血液分析儀的3Q驗證

張謙1劉娜2肖云峰1▲
1.內蒙古醫科大學新藥安全評價研究中心，內蒙古呼和浩特010110；2.內蒙古自治區巴彥淖爾市醫院檢驗科，內蒙古巴彥淖爾015000

目的 以Sysmex XT-1800iv全自動血液分析儀為例，探討良好實驗室規范（GLP）體系下全自動血液分析儀的3Q驗證過程。方法 選擇白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血細胞比容（HCT）、血小板（PLT）5項檢驗指標，對儀器的精密度、攜帶污染率、線性進行性能驗證。結果 所測指標的批內精密度CV值＜4.00%，攜帶污染率＜1.0%，線性相關系數r值＞0.99。結論 經GLP體系下的3Q驗證，該全自動血液分析儀各方面性能良好，可以用于臨床檢驗實驗室的檢驗工作。

良好實驗室規范；全自動血液分析儀；3Q驗證

［Abstract］Objective To explore the procedures of 3Q validation for automatic blood analyzer under the good laboratory practice（GLP）system based on the Sysmex XT-1800iv automatic blood analyzer.Methods 5 test indicators of blood cell（WBC），red blood cell（RBC），hemoglobin（HGB），hematocrit（HCT）and platelet（PLT）were chosen to evaluate the precision，cross contamination，linearity of the automatic blood analyzer.Results The within-run precision of the items was lower than 4.00%，the cross contamination rate was lower than 1.0%，the linear coefficient r was more than 0.99. Conclusion The 3Q validation under the GLP system proves that the automatic blood analyzer is good in performance and is appropriate for clinical laboratories.

［Key words］Good laboratory practice；Automatic blood analyzer；3Q verification

良好實驗規范 （good laboratory practice，GLP）實驗室是主要針對食品、化妝品、新藥等進行的安全性評價實驗而制訂的規范［1］，在最大程度上消除可能影響實驗結果的主觀和客觀因素，降低誤差，確保實驗結果的真實可靠［2］。為保證研究數據的真實有效，GLP實驗室不僅在硬件方面具有相應儀器設備，在人員和軟件方面也具有較高的要求［5-6］。國家食品藥品監督管理總局、美國食品和藥物管理局均有相應文件明確規范GLP實驗室中備案儀器設備應定期進行3Q驗證［3］。所謂3Q驗證，即指儀器的安裝驗證（installation qualification，IQ）、操作驗證（operation qualification，OQ）和性能驗證（performance qualification，PQ）［4］。而其中涉及到的性能驗證是整個3Q驗證中的關鍵步驟，需要在實驗前精心設計驗證指標和驗證方案［7］。本文以Sysmex XT-1800iv全自動血液分析儀為例，探討在GLP管理體系下全自動血液分析儀的校準及PQ驗證。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑

儀器為Sysmex XT-1800iv全自動血液分析儀（儀器編號70440）；試劑、質控品、校準品為Sysmex公司生產，CELL PACK（批號G5168），STROMATOLYSER-FB（批號R5021），STROMATOLYSER-4DL（批號R5034），SULFOLYSER（批號A5008），STROMATOLYSER-4DS（A5022），質控品Level2（批號6050811），SysmexSCS-1000（批號60600525），高、中、低三個水平的EDTA-K2抗凝血。

1.2方法

1.2.1批內精密度 取高、中、低三個水平的新鮮EDTAK2抗凝血，連續重復測定10次，計算CV、SD。

1.2.2攜帶污染率取高濃度新鮮EDTA-K2抗凝血混勻測定3次，其測定值為H1、H2、H3；取低濃度新鮮EDTA-K2抗凝血測定3次，測定值為L1、L2、L3。通過公式攜帶污染率=（L1-L3）/（H3-L3）×100%計算攜帶污染率。

1.2.3線性取1份高值新鮮EDTA-K2抗凝血（H），分別按5∶5、4∶5、3∶5、2∶5、1∶5的比例進行稀釋，每個濃度重復3次測定，計算平均值。將實際測定值與理論值相比較，通過方程y=ax+b驗證線性范圍。

2　結果

2.1批內精密度

批內精密度是衡量儀器性能的重要指標，通過對高、中、低3個水平的新鮮EDTA-K2抗凝血連續重復測定，計算CV、SD值均在判定標準內，見表1～3。

表1　低值批內精密度測定（n=10）

表2　中值批內精密度測定（n=10）

表3　高值批內精密度測定（n=10）

2.2攜帶污染率

攜帶污染率是直接衡量上一個樣品對下一個樣品測定結果影響大小的指標。各項目的攜帶污染率均＜1.0%，符合行業通用標準，見表4。

表4　攜帶污染率測定結果（n=6）

2.3線性實驗

RBC、WBC、HGB、HGB、PLT 5項參數的線性相關系數r＞0.99，a值在（1.00±0.05）范圍內，表明該儀器在一定稀釋范圍內具有良好的線性相關性。見表5。

表5　線性測定結果（n=5）

3　討論

GLP實驗室是藥物非臨床研究安全性評價的一個必然趨勢，也是世界經濟發展一體化的要求［8-9］。相對于非GLP的藥理毒理等實驗所得出的結果更具有嚴密性和可靠性［10-11］。納入GLP的實驗，從項目負責人制訂實驗方案，到機構負責人的審批，經質量保障部的檢查，到方案完整實施，及質量保障部在實驗中的監督以及最后實驗報告總結等，都是十分的周密和詳細的［12-13］，并且所涉及的每一個程序都要有相應的標準操作規程做為依據與指導［14］，整個實驗排除了許多因素的干擾，所以能夠給新藥研發提供完整、原始的數據［15］，給臨床研究提供更為有價值的資料［1］。

3Q驗證中PQ驗證頻率為每年一次［16］。儀器有下列情況之一則需要重新驗證：儀器的放置地點改變、儀器的檢測方法改變、儀器進行重大維修［17］。GLP體系下儀器的性能驗證需在部門負責人的監督下由有經驗的工作人員完成［18］：第一，制訂驗證方案；第二，對儀器參數進行設置，對檢測項目進行校準，對儀器精密度、線性、攜帶污染率、準確性等進行性能驗證；第三，驗證報告由檢測人員簽名確認后連同原始數據以書面形式歸檔，3Q驗證過程需要質量保障部門人員的監督［19-20］。

經過良好實驗室規范體系下的3Q驗證，臨床檢驗部Sysmex XT-1800iv全自動血液分析儀各項性能指標良好，所測定的實驗數據真實準確，可用于藥物非臨床研究安全性評價的臨床檢驗中血液學指標的檢測。。

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3Q verification of automatic blood analyzer under good laboratory practice system

ZHANG Qian1LIU Na2XIAO Yunfeng1▲
1.Center for New Drug Safety Evaluation and Research，Inner Mongolia Medical University，Inner Mongolia Autonomous Region，Huhhot010110，China；2.Clinical Laboratory，Bayan Nur Hospital，Inner Mongolia Autonomous Region，Bayan Nur015000，China

R95

A

1673-7210（2016）05（b）-0170-03

內蒙古自治區衛生和計劃生育委員會醫療衛生科研計劃項目（201302052）。

2016-02-10本文編輯：程銘）