2005-2014年CHINET兒童患者分離革蘭陰性菌耐藥性監測

祝俊英，王 春，張 泓，王傳清，王愛敏，孫自鏞，陳中舉，徐英春，張小江，張朝霞，季 萍，魏蓮花，吳 玲，單 斌，杜 艷，徐元宏，沈繼錄，卓 超，蘇丹虹，倪語星0，孫景勇0，朱德妹，胡付品，胡志東，李 金，謝 軼，康 梅，韓艷秋，郭素芳，褚云卓，田素飛，賈 蓓，黃文祥，楊 青，胡云建，艾效曼，俞云松，林 潔

2005-2014年CHINET兒童患者分離革蘭陰性菌耐藥性監測

祝俊英1，王 春1，張 泓1，王傳清2，王愛敏2，孫自鏞3，陳中舉3，徐英春4，張小江4，張朝霞5，季 萍5，魏蓮花6，吳 玲6，單 斌7，杜 艷7，徐元宏8，沈繼錄8，卓 超9，蘇丹虹9，倪語星10，孫景勇10，朱德妹11，胡付品11，胡志東12，李 金12，謝 軼13，康 梅13，韓艷秋14，郭素芳14，褚云卓15，田素飛15，賈 蓓16，黃文祥16，楊 青17，胡云建18，艾效曼18，俞云松19，林 潔19

目的 了解2005-2014年中國主要地區兒童患者中革蘭陰性分離菌對常用抗菌藥物的耐藥性。方法 中國主要地區19所教學醫院（17所綜合醫院和2所兒童醫院）分離自兒童患者的革蘭陰性菌，采用紙片擴散法或自動化儀器法按統一方案進行細菌藥物敏感試驗。按CLSI 2014版標準判斷結果。結果 2005-2014年收集各醫院兒童患者革蘭陰性菌63 294株，其中腸桿菌科細菌43 109株，占68.1 %，不發酵糖革蘭陰性桿菌 13 994株，占22.1 %。兒童患者分離革蘭陰性菌的檢出率呈下降趨勢：2006年為14.4%，2014年為12.1%。腸桿菌科細菌對頭孢唑林、頭孢呋辛、頭孢噻肟、頭孢他啶及頭孢吡肟平均耐藥率較高，對碳青霉烯類、氨基糖苷類和酶抑制劑復合制劑平均耐藥率均＜10 %。大腸埃希菌和克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產酸克雷伯菌）平均產ESBL率分別為68.4 %和62.2 %。肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類抗生素、兩種酶抑制劑復合制劑及頭孢菌素類耐藥率明顯上升。變形桿菌屬、枸櫞酸桿菌屬及沙雷菌屬對碳青霉烯類耐藥率有下降趨勢。鮑曼不動桿菌對亞胺培南和美羅培南耐藥率也呈上升趨勢。銅綠假單胞菌對所測試的抗菌藥物耐藥率有下降趨勢。嗜麥芽窄食單胞菌及伯克霍爾德菌屬檢出率不斷增多但對所測試抗菌藥物的耐藥率變化不大。流感嗜血桿菌對氨芐西林耐藥率及產β內酰胺酶率均在30 %～45 %。2014年碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌檢出率為15.9 %。2005-2014年均有廣泛耐藥（XDR）菌檢出，XDR銅綠假單胞菌檢出率在0.2 %～2.0 %；XDR鮑曼不動桿菌和XDR肺炎克雷伯菌檢出率分別在0.9 %～24.6 %和0～4.2 %。結論 分離于兒童患者革蘭陰性菌的耐藥性總體呈上升趨勢，碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細菌和XDR的檢出率不斷增多是抗感染治療的一大挑戰，應引起臨床關注。

革蘭陰性桿菌； 碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細菌； 廣泛耐藥； 抗菌藥物； 耐藥性

革蘭陰性菌是醫院感染的主要病原微生物，其中耐藥菌尤其是多重耐藥（MDR）、廣泛耐藥（XDR）和全耐藥（PDR）菌的出現給臨床抗感染治療帶來極大的挑戰。現將2005-2014年CHINET兒童患者分離的革蘭陰性菌耐藥性監測結果報道如下。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1細菌 收集2005-2014年國內主要地區19所教學醫院臨床分離于兒童的革蘭陰性菌，剔除同一患者分離的重復菌株。

1.1.2試劑 藥敏試驗用MH瓊脂，購自英國OXOID公司。抗菌藥物紙片購自美國BD公司或英國OXOID公司。

1.2方法

1.2.1藥敏試驗 采用紙片擴散法或自動化儀器法。參照CLSI 2014年推薦的藥敏試驗方法進行［1］。質控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922，銅綠假單胞菌ATCC 27853。

1.2.2β內酰胺酶檢測 按CLSI推薦的紙片法篩選和酶抑制劑增強試驗檢測大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產ESBL菌株。

1.2.3定義 碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細菌（CRE）定義為對亞胺培南、美羅培南或厄他培南任一耐藥者。XDR定義為細菌對除了黏菌素和替加環素外對其他抗菌藥物全耐藥者。

1.2.4結果統計分析 試驗結果數據采用WHONET 5.6軟件統計分析。

2　結果

2.1細菌及其分布

2005-2014年收集臨床分離革蘭陰性菌共63 294株。10年間，兒童患者分離的革蘭陰性菌的檢出率呈下降趨勢：2006年為14.4 %，2014年為12.1 %，見表1。79.6 %（50 382/63 294）菌株分離自住院患者，20.4 %（12 912/63 294）菌株分離自門急診患者。痰液和咽拭子等呼吸道標本占45.3 %，尿液23.3 %，糞便5.7 %，血液5.0 %，直腸拭子3.0 %，女性陰道拭子2.9 %，分泌物和傷口拭子各占2.1 %，膿液1.7 %，其他標本8.9 %。腸桿菌科細菌占所有革蘭陰性菌的68.1 % （43 109/63 294），其中分離率占前幾位的依次為大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬和變形桿菌屬；不發酵糖革蘭陰性菌占革蘭陰性菌的22.1 % （13 994/63 294），其中分離率占前幾位的依次為不動桿菌屬、銅綠假單胞菌和嗜麥芽窄食單胞菌。主要細菌分布見表2。2005-2014年革蘭陰性菌分離率以上海2所醫院最多，分別占42.1 %和24.0 %。

表1　兒童分離革蘭陰性菌在所有臨床分離株中的檢出率Table 1 Proportion of the gram-negative isolates from children among all the clinical isolates

2.2革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率

2.2.1腸桿菌科細菌 腸桿菌科細菌對常用抗菌藥物仍較為敏感，對3種碳青霉烯類藥物耐藥率最低，為3.1 %～4.0 %，其次為阿米卡星、頭孢哌酮-舒巴坦及哌拉西林-他唑巴坦，平均耐藥率分別為4.0 %、6.9 %和7.1 %；對頭孢吡肟、頭孢他啶、慶大霉素和環丙沙星平均耐藥率分別為31.9 %、28.9 %、32.3 %和20.0 %。大腸埃希菌和克雷伯菌屬（肺炎克雷伯菌和產酸克雷伯菌）平均產ESBL率分別為68.4 %和62.2 %。

表2　2005-2014年CHINET細菌耐藥性監測網兒童患者分離的革蘭陰性菌分布Table 2 Distribution of gram-negative bacterial species from children in CHINET program from 2005 to 2014

在2005-2008年、2009-2011年及2012-2014年3個時段中，大腸埃希菌對哌拉西林、哌拉西林-他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢哌酮-舒巴坦、頭孢西丁及環丙沙星耐藥率均呈上升趨勢；對3種碳青霉烯類藥物耐藥率總體呈上升趨勢，其中3個時段中大腸埃希菌對亞胺培南和美羅培南耐藥率分別為1.0 %、1.4 %、1.2 %和0.4 %、0.9 %、1.5 %，見表3。肺炎克雷伯菌對3種碳青霉烯類藥物耐藥率明顯上升，3個時段中肺炎克雷伯菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為2.6 %、4.0 %、12.6 % 和1.6 %、3.4 %、13.4 %；對所測試的2種酶抑制劑復合制劑及頭孢菌素類的耐藥率均有不同程度的上升，見表4 。腸桿菌屬細菌對頭孢唑林及頭孢西丁耐藥率最高，在85 %以上，而對2種酶抑制劑復合制劑及3種碳青霉烯類藥物耐藥率較低，3個年段中對厄他培南耐藥率分別為14.8 %、9.4 % 和6.4 %，見表5。變形桿菌屬細菌對所測試藥物耐藥率變化不大，見表6。沙雷菌屬除對頭孢唑林、頭孢呋辛耐藥率較高外（＞75%），對其他所測試藥物耐藥率較低，見表7。枸櫞酸桿菌屬對哌拉西林、頭孢唑林、頭孢呋辛、頭孢噻肟及頭孢西丁耐藥率較高，對3種碳青霉烯類藥物耐藥率較低，3個時段對亞胺培南和美羅培南耐藥率分別為3.6 %、5.5 %、3.4 %和2.8 %、5.6 %、4.3 %，見表8。2.2.2 不發酵糖革蘭陰性桿菌 13 994株不發酵糖革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物平均耐藥率均＜35 %，對亞胺培南和美羅培南平均耐藥率分別為32.6 %和31.9 %；對2種酶抑制劑復合制劑和其他所測試抗菌藥物耐藥率在15 %～35 %。

表5　2005-2014年各時段腸桿菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率及敏感率Table 5 Susceptibility of the Enterobacter isolates from children to antimicrobial agents in CHINET program from 2005 to 2014 （%）

表6　2005-2014年各時段變形桿菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率及敏感率Table 6 Susceptibility of the Proteus isolates from children to antimicrobial agents in CHINET program from 2005 to 2014 （%）

表7　2005-2014年各時段沙雷菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率及敏感率Table 7 Susceptibility of the Serratia isolates from children to antimicrobial agents in CHINET program from 2005 to 2014 （%）

鮑曼不動桿菌對所測試藥物耐藥率上升趨勢較明顯。在2005-2008年、2009-2011年和2012-2014年3個時段中，鮑曼不動桿菌對亞胺培南和美羅培南耐藥率分別為14.2 %、44.4 %、54.0 %和18.7 %、48.6 %、58.4 %，見表9；銅綠假單胞菌對所測抗菌藥物耐藥率變化較小，3個時段中對頭孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦耐藥率較低，分別在7.6 %～12.5 %、8.6 %～13.1 %；對亞胺培南和美羅培南耐藥率較高，分別在14.8 %～18.1 %和13.3 %～17.0 %，見表10。嗜麥芽窄食單胞菌對甲氧芐啶-磺胺甲唑、左氧氟沙星耐藥率均以2009-2011年最高，分別為19.3 % 和2.4 %，見表11。3個時段中伯克霍爾德菌屬對頭孢他啶耐藥率分別為19.4 %、19.2 %和14.2 %，對哌拉西林-他唑巴坦、美羅培南、甲氧芐啶-磺胺甲唑及米諾環素耐藥率也均以2009-2011年最高，分別為10.8 %、17.9 %、20.3 %及17.2 %，見表12。

2.2.3流感嗜血桿菌 在2005-2008年、2009-2011年及2012-2014年3個時段中，流感嗜血桿菌對大部分測試抗菌藥物耐藥呈上升趨勢，其中對甲氧芐啶-磺胺甲唑耐藥率最高，分別為64.5 %、68.8 %及68.6 %，3個時段中流感嗜血桿菌對氨芐西林耐藥率及產β內酰胺酶率分別為36.9 %、32.1 %、42.6 %及36.7 %、32.5 %、35.1 %。見表13。

2.2.4CRE CRE逐年檢出率總體呈上升趨勢，碳青霉烯類耐藥的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、腸桿菌屬和變形桿菌屬檢出率分別0.4 %～3.0 %、2.2 %～16.1 %、2.0 %～19.3 %、1.9 %～13.1 %。近二三年碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌的檢出率明顯增加，見表14。CRE菌株主要集中于ICU、新生兒病房及其他兒科病房。近年來，門診患者CRE 檢出率顯著上升，2014年門診患者CRE 檢出率占4.4 %，見表15。

表8　2005-2014年各時段枸櫞酸桿菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率及敏感率Table 8 Susceptibility of the Citrobacter isolates from children to antimicrobial agents in CHINET program from 2005 to 2014 （%）

表9　2005-2014年各時段鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率及敏感率Table 9 Susceptibility of the Acinetobacter baumannii isolates from children to antimicrobial agents in CHINET program from 2005 to 2014（%）

表10　2005-2014年各時段銅綠假單胞菌對常用抗菌藥物的耐藥率及敏感率Table 10 Susceptibility of the Pseudomonas aeruginosa isolates from children to antimicrobial agents in CHINET program from 2005 to 2014 （%）

表11　2005-2014年各時段嗜麥芽窄食單胞菌對常用抗菌藥物的耐藥率及敏感率Table 11 Susceptibility of the Stenotrophomonas maltophilia isolates from children to antimicrobial agents in CHINET program from 2005 to 2014 （%）

表12　2005-2014年各時段伯克霍爾德菌屬對常用抗菌藥物的耐藥率及敏感率Table 12 Susceptibility of the Burkholderia isolates from children to antimicrobial agents in CHINET program from 2005 to 2014 （%）

表13　2005-2014年各時段流感嗜血桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率及敏感率Table 13 Susceptibility of the Haemophilus influenzae isolates from children to antimicrobial agents in CHINET program from 2005 to 2014 （%）

表14　2005-2014年碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細菌檢出率Table 14 Prevalence of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae in CHINET program from 2005 to 2014，number of resistant strains/total number of strains tested （ %）

2.2.5XDR XDR革蘭陰性菌主要存在于銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌和肺炎克雷伯菌中。XDR株的檢出率總體呈上升趨勢：XDR銅綠假單胞菌檢出率在0.2 %～2.0 %：XDR鮑曼不動桿菌2007年檢出率最低為0.9 %，2011年檢出率最高為24.6 %，2014年下降至9.4 %；XDR肺炎克雷伯菌2005-2007年均未檢出，2012年檢出率達到最高為4.2 %，隨后也逐年下降至2014年0.6 %，見表16。XDR鮑曼不動桿菌的檢出主要集中于ICU和兒科某些病房，ICU中XDR鮑曼不動桿菌檢出率最高的年份為2011年（66.7%），兒科病房為2013年（38.6%），見表17。

3　討論

2005-2014年CHINET細菌耐藥性監測結果顯示：2014年收集兒童患者分離的革蘭陰性菌共9576株，較2005年的837株增加11.4倍；腸桿菌科細菌檢出率變化較為平穩，大腸埃希菌檢出率在31.9 %～37.1 %，肺炎克雷伯菌在13.6 %～20.4 %；銅綠假單胞菌檢出率由2005年12.0 %下降至2014年7.9 %，鮑曼不動桿菌檢出率由2005年6.5 %上升至2014年10.3 %。2005-2014年，革蘭陰性菌對所測抗菌藥物耐藥率總體呈上升趨勢，尤其對碳青霉烯類耐藥率上升最為顯著。2005-2012年，肺炎克雷伯菌對亞胺培南和美羅培南耐藥率＜10 %，2013-2014年耐藥率急劇上升至15 %左右。2014年鮑曼不動桿菌對亞胺培南和美羅培南耐藥率上升至50 %左右。此外，CRE和XDR的出現也使細菌對多種抗菌藥物產生耐藥，而近二年XDR肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌的檢出率均有所下降，這與2013年CHINET耐藥性監測結果相仿［2］。

表15　2005-2014年主要科室碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細菌檢出情況Table 15 Prevalence of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae by department in CHINET program from 2005 to 2014 ［n （ %）］

表16　2005-2014年廣泛耐藥陰性革蘭菌檢出率Table 16 Prevalence of extensively drug resistant gram-negative bacteria in CHINET program from 2005 to 2014

表17　2005-2014年主要科室廣泛耐藥鮑曼不動桿菌檢出情況Table 17 Prevalence of extensively drug resistant Acinetobacter baumannii in CHINET program from 2005 to 2014 ［n （ %） ］

ESBL主要由腸桿菌科細菌產生，該酶可水解青霉素、頭孢菌素類和氨曲南等β內酰胺類抗生素，是腸桿菌科細菌對β內酰胺類耐藥的主要機制之一。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是常見的產ESBL菌。本組資料顯示，大腸埃希菌和克雷伯菌屬中產ESBL率有明顯下降（分別由2005年92.7 %和87.7 %降至2014年68.4 %和58.9 %）。一方面，我們推測這些產ESBL菌株可能產碳青霉烯酶，該酶可抑制ESBL表型確證試驗中的頭孢他啶-克拉維酸和頭孢噻肟-克拉維酸的活性而使ESBL表型確證試驗呈現假陰性，從而導致ESBL檢出率下降，但這一推測還需進一步證實；另一方面，產ESBL率下降可能與臨床開始規范使用抗生素、醫院控制產酶菌的傳播有關。

碳青霉烯類藥物作為治療革蘭陰性菌的最后一道防線，其在臨床上的使用增多導致CRE的檢出逐漸增多［3-4］。2005-2014年分離于兒童患者的CRE共1 967株，包括克雷伯菌屬1 029株（52.3 %）、大腸埃希菌415株（21.1 %）、腸桿菌屬317（16.1 %）、變形桿菌屬82株（4.2%）、沙雷菌屬36株（1.8 %）和枸櫞酸桿菌屬30株（1.5 %）。10年間CRE菌株主要來源于痰液標本，占42.7 %。CRE自2009年檢出率增多，主要集中于ICU，2014年CRE在ICU和新生兒病房檢出率分別為38.9 %和22.2 %。ICU患者多有嚴重基礎疾病、機體免疫力低下、長期使用廣譜抗生素以及機械通氣、氣管切開或氣管插管等有創操作，這些都是導致患者感染CRE的危險因素［5］。該類細菌耐藥機制主要有2種：產碳青霉烯酶；膜孔蛋白丟失合并產ESBL或頭孢菌素酶（AmpC）［6-7］。碳青霉烯酶基因主要包括Ambler中的A、B和D組基因，國內分離于兒童患者的CRE耐藥機制主要是產A組中的KPC-2酶和B組中的IMP和VIM酶［8］。值得注意的是，國內已有腸桿菌科中檢出B組金屬酶NDM-1的報道［9-10］，此外，JIN 等［11］報道了產NDM-1肺炎克雷伯菌ST17和ST20在新生兒病房引起的暴發流行。NDM-1在我國兒童患者中的流行情況還需進一步監測。CRE菌株往往對多種抗菌藥物耐藥［2］，有研究對CRE的治療進行探索發現，多黏菌素、替加環素、阿米卡星和磷霉素對CRE抗菌效果仍良好，尤其是含有碳青霉烯類藥物的聯合治療方案［12］。

鮑曼不動桿菌對所測試抗菌藥物耐藥率明顯增加，其中對亞胺培南和美羅培南耐藥率由2005年的20.4 %和22.2 %上升至2014年的47.8 %和55.0 %，臨床上應控制這類藥物在治療鮑曼不動桿菌感染中的使用。但鮑曼不動桿菌對頭孢哌酮-舒巴坦和米諾環素耐藥率＜50 %，且近年來對這2種藥物耐藥率有所下降，因此可以作為臨床上治療鮑曼不動桿菌的有效藥物。近年來，XDR鮑曼不動桿菌不斷增多，由2005年的5.6 %上升至2011年24.6 %又降至2014年9.4 %，該類菌株除對多黏菌素和替加環素以外的其他藥物均耐藥，但也已有對多黏菌素耐藥的報道［13］，此類菌株主要出現于綜合性醫院兒科及兒童專科醫院的的某些病房和ICU，是臨床抗感染治療的一大威脅，應加以監測。

總之，10年CHINET數據分析顯示，分離于兒童患者的革蘭陰性菌對常用抗菌藥物的耐藥率總體呈上升趨勢，但近2年來部分藥物的耐藥率有所下降。在新的有效抗生素尚未研發出來之前，加強各地區耐藥菌監測、規范臨床用藥以減少耐藥菌的出現和播散很有必要。

［1］Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance Standards for antimicrobiol susceptibility testing ［S］. Twentyfourth informational supplement，2014，M100-S24.

［2］胡付品，朱德妹，汪復，等. 2013年中國CHINET細菌耐藥性監測［J］.中國感染與化療雜志，2014，14（ 5）：365-374.

［3］SHANMUGAM P，MEENAKSHISUNDARAM J，JAYARAMAN P. blaKPC gene detection in clinical isolates of carbapenem resistant enterobacteriaceae in a Tertiary Care Hospital ［J］. J Clin Diagn Res，2013，7（12）：2736-2738.

［4］HU F，CHEN S，XU X，et al. Emergence of carbapenemresistant clinical Enterobacteriaceae isolates from a teaching hospital in Shanghai，China ［J］. J Med Microbiol，2012，61（Pt 1）：132-136.

［5］LOGAN LK. Carbapenem-resistantenterobacteriaceae：an emerging problem in children ［J］. Clin Infect Dis，2012，55（6）：852-859.

［6］DU J，LI P，LIU H，et al. Phenotypic and molecular characterization of multidrug resistant Klebsiella pneumoniae isolated from a university teaching hospital，China ［J］. PLoS One，2014，9（4）：e95181.

［7］GIANI T，PINI B，ARENA F，et al. Epidemic diffusion of KPC carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae in Italy：results of the first countrywide survey，15 May to 30 June 2011 ［J］. Euro Surveill，2013，18（22），pii：20489.

［8］OVERTURF GD. Carbapenemases：a brief review for pediatric infectious disease specialists ［J］. Pediatr Infect Dis J，2010，29 （1）：68-70.

［9］QIN S，FU Y，ZHANG Q，et al. High incidence and endemic spread of NDM-1-positive Enterobacteriaceae in Henan Province，China ［J］. Antimicrob Agents Chemother，2014，58 （8）：4275-4282.

［10］WU HS，CHEN TL，CHEN IC，et al. First identification of a patient colonized with Klebsiella pneumoniae carrying blaNDM-1 in Taiwan ［J］. J Chin Med Assoc，2010，73（11）：596-598.

［11］JIN Y，SHAO C，LI J，et al. Outbreak of multidrug resistant NDM-1-Producing Klebsiella pneumoniae from a Neonatal Unit in Shandong Province，China ［J］. PLoS One，2015，10（3）：e0119571.

［12］DAIKOS GL，TSAOUSI S，TZOUVELEKIS LS，et al. Carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae bloodstream infections：lowering mortality by antibiotic combination schemes and the role of carbapenems ［J］. Antimicrob Agents Chemother，2014，58（4）：2322-2328.

［13］KONTOPIDOU F，PLACHOURAS D，PAPADOMICHELAKIS E，et al. Colonization and infection by colistin-resistant Gramnegative bacteria in a cohort of critically ill patients ［J］. Clin Microbiol Infect，2011，17（11）：e9-e11.

Antibiotic resistance profile of gramnegative bacteria isolated from children in hospitals across China: results of CHINET Antimicrobial Resistance Surveillance Program from 2005 to 2014

ZHU Junying，WANG Chun，ZHANG Hong，WANG Chuanqing，WANG Aimin，SUN Ziyong，CHEN Zhongju，XU Yingchun，ZHANG Xiaojiang，ZHANG Zhaoxia，JI Ping，WEI Lianhua，WU Ling，SHAN Bin，DU Yan，XU Yuanhong，SHEN Jilu，ZHUO Chao，SU Danhong，NI Yuxing，SUN Jingyong，ZHU Demei，HU Fupin，HU Zhidong，LI Jin，XIE Yi，KANG Mei，HAN Yanqiu，GUO Sufang，CHU Yunzhuo，TIAN Sufei，JIA Bei，HUANG Wenxiang，YANG Qing，HU Yunjian，AI Xiaoman，YU Yunsong，LIN Jie. （Department of Laboratory Medicine，Shanghai Children's Hospital，Shanghai Jiaotong University，Shanghai 200040，China）

Objective To investigate the changing antibiotic resistance profile of gram-negative strains isolated from children in hospitals of China. Methods A total of 17 general hospitals and 2 children’s hospitals were involved in this program. Antimicrobial susceptibility testing was carried out according to a unified protocol using Kirby-Bauer method or automated systems. Results were analyzed according to CLSI 2014 breakpoints. Results A total of 63 294 clinical gram-negative organisms from children were collected from 2005 to 2014，of which Enterobacteriaceae and non-fermentative bacteria accounted for 68.1% （43 109/63 294） and 22.1 % （13 994/63 294），respectively. The proportion of gram-negative bacilli from children among all the clinical isolates decreased with time from 14.4% in 2006 to 12.1% in 2014. Overall，the Enterobacteriaceae strains were relatively more resistant to cefazolin，cefuroxime，cefotaxime，ceftazidime and cefepime，but showed lower resistance to carbapenems，aminoglycosides and beta-lactam/ beta-lactamase inhibitor combinations （＜10.0% resistant） during the period from 2005 to 2014. The average prevalence of extendedspectrum β-lactamase （ESBLs）-producing strains was 68.4% in E. coli and 62.2% in Klebsiella isolates （K. pneumoniae and K. oxytoca）. K. pneumoniae isolates showed increasing resistance rates to carbapenems，β-lactam/β-lactamase inhibitor combinations and cephalosporins，while the Proteus，Citrobacter and Serratia strains showed decreasing resistance rates to carbapenems. A. baumannii isolates also demonstrated decreasing resistance to imipenem and meropenem during the 10-year period. Slightly reduced resistance was observed in the P. aeruginosa strains to most antimicrobial agents tested. The prevalence of Stenotrophomonas maltophilia and Burkholderia spp. was increasing but their antibiotic resistance profile changed little. About 30% to 45% of Haemophilus influenzae isolates were resistant to ampicillin. And beta-lactamase was produced in 30%-40% of H. influenzae isolates. The prevalence of carbapenem-resistant K. pneumoniae was 15.9% in 2014. Extensively drug resistant （XDR） bacteria were identified from 2005 to 2014，the prevalence of which was 0.2%-2.0% in P. aeruginosa，0.9%-24.6% in A. baumannii，and 0-4.2% in K. pneumoniae. Conclusions The gram-negative organisms isolated from children in hospitals across China showed increasing resistance to antibiotics during the period from 2004 to 2015. The increasing prevalence of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae and XDR poses a serious challenge to anti-infective therapy for children.

gram-negative bacilli； carbapenem-resistant Enterobacteriaceae； extensively drug-resistant； antimicrobial agent； antibiotic resistance

R378

A

1009-7708（2016）04-0437-12

10.16718/j.1009-7708.2016.04.011

1. 上海市兒童醫院，上海交通大學附屬兒童醫院檢驗科，上海 200040；2. 復旦大學附屬兒科醫院；3. 華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院；4. 北京協和醫院；5. 新疆醫科大學第一附屬醫院；6. 甘肅省人民醫院；7. 昆明醫科大學第一附屬醫院；8. 安徽醫科大學第一附屬醫院；9. 廣州醫科大學附屬第一醫院；10. 上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院；11. 復旦大學附屬華山醫院；12. 天津醫科大學總醫院；13. 四川大學華西醫院；14. 內蒙古醫科大學附屬醫院；15. 中國醫科大學附屬第一醫院；16. 浙江大學附屬第一醫院；17. 重慶醫科大學附屬第一醫院；18. 北京醫院；19. 浙江大學醫學院附屬邵逸夫醫院。

祝俊英（1988—），女，碩士研究生，主要從事細菌耐藥機制及流行病學研究。

張泓，E-mail：zhanghong3010@126.com。

2015-04-15

2015-11-09