加味溫膽湯對抑郁模型大鼠海馬不同時間段RaS蛋白表達的影響

王明杰，夏 猛，施學麗，申曉晴，付 蕾，蔣 筱（廣西中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院，廣西南寧500；廣西中醫(yī)藥大學，廣西南寧5000；廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院，廣西南寧500）

加味溫膽湯對抑郁模型大鼠海馬不同時間段RaS蛋白表達的影響

王明杰1，夏 猛2，施學麗2，申曉晴2，付 蕾3，蔣 筱2（1廣西中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院，廣西南寧530023；2廣西中醫(yī)藥大學，廣西南寧530001；3廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院，廣西南寧530011）

【摘 要】目的：探討調(diào)理脾胃方加味溫膽湯對慢性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)大鼠的學習記憶能力以及海馬區(qū)信號因子RaS蛋白表達的影響.方法：選取128只清潔級SD大鼠，將其按照隨機數(shù)字表法分為空白對照組（n=32）、模型對照組（n=32）、中藥治療組（n=32）、西藥治療組（n=32）.應(yīng)用孤養(yǎng)加慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激方法造模，采用糖水消耗實驗、曠場行為實驗測試大鼠抑郁行為變化，Western B1ot測定海馬RaS蛋白表達水平.結(jié)果：加味溫膽湯具有增強抑郁模型糖水消耗量，改善抑郁模型快感缺失的功能，且其效應(yīng)隨著治療周次的增加，呈不斷遞進的關(guān)系，21 d開始顯效，28 d效果最佳；加味溫膽湯具有改善抑郁模型大鼠空間認知能力、增加大鼠興奮性的功效，其效應(yīng)顯效時間為21 d，最佳時間為28 d；加味溫膽湯具有上調(diào)RaS蛋白表達的作用，且其效應(yīng)隨著治療周次的增加，呈不斷遞進的關(guān)系，21 d開始顯效，28 d效果最佳.結(jié)論：加味溫膽湯對抑郁模型大鼠具有較好的治療功效，其作用機制可能與上調(diào)海馬區(qū)RaS蛋白相關(guān).

【關(guān)鍵詞】加味溫膽湯；抑郁模型；海馬；RaS蛋白

0　引言

抑郁癥是由各種復(fù)雜誘因引起的以情感抑郁為主要臨床表現(xiàn)的一種情感障礙性疾病［1］.當前，隨著人們生活節(jié)奏的加快，接觸到各種應(yīng)激刺激頻次的增多，抑郁癥的發(fā)病率也呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢.有研究調(diào)查［2］發(fā)現(xiàn)，截止到2005年，抑郁癥的全球發(fā)病率已經(jīng)達到全球總?cè)丝诘?0%.最近有數(shù)據(jù)資料［3］顯示，我國的精神障礙類疾病數(shù)已經(jīng)居于各類疾病譜的第一位，上海市的抑郁癥患者人數(shù)已達到總?cè)丝跀?shù)量的5%以上.而美國、加拿大以及歐洲國家抑郁癥患者每年可造成約1500億美元的損失.目前醫(yī)學界仍以藥物為防治抑郁癥的主要方法.臨床上常用的一些抗抑郁藥物，包括抑制類抗抑郁藥，單胺氧化酶抑制劑抗抑郁藥、神經(jīng)遞質(zhì)類抑制劑抗抑郁藥物，以及三環(huán)、四環(huán)類抗抑郁藥物等.這些抗抑郁藥物都存在一些副作用，長期服用易產(chǎn)生藥物依賴性，作用反彈，還可能出現(xiàn)頭暈、惡心等臨床癥狀［4-5］.在抑郁癥的防治研究中，中國傳統(tǒng)醫(yī)學的中醫(yī)藥具有整體治療優(yōu)勢，并且中草藥的復(fù)方具有多層次、多環(huán)節(jié)、多靶位點藥理學作用，因此，國內(nèi)外在抗抑郁藥物的研發(fā)方面也越來越注重中醫(yī)藥的應(yīng)用.本研究在治療中采用“調(diào)理脾胃法”治療抑郁癥，采用動態(tài)研究方法探討加味溫膽湯的抗抑郁效應(yīng)，并從RaS蛋白表達闡釋其作用機制，現(xiàn)報道如下.

1　材料和方法

1.1動物 選取8周齡（60 d左右）的清潔級雄性SD大鼠共128只［大鼠的合格證號：SCXK（湘）2009-0004］，體質(zhì)量（185±22）g，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供.飼養(yǎng)環(huán)境：室溫（22±3）℃，相對濕度（55±3）%，12 h晝夜節(jié)律，均自由進食及飲水，適應(yīng)環(huán)境1周后開始實驗.空白組5只/籠群養(yǎng)，其余各組1只/籠進行孤獨飼養(yǎng).在動物飼養(yǎng)過程中，動物的各種處置方案符合中華人民共和國科學技術(shù)部2006年頒布的《關(guān)于善待實驗動物的指導(dǎo)性意見》標準［6］.

1.2分組及模型復(fù)制 按照隨機數(shù)字表法將所選大鼠分為空白對照組（n=32）、模型對照組（n=32）、中藥治療組（n=32）、西藥治療組（n=32）（后文均簡稱為空白組、模型組、中藥組、西藥組）.除空白組外，其余每組的大鼠均采用孤養(yǎng)方法進行飼養(yǎng)，并且自確定大鼠的分組信息之后，每只大鼠均接受共計持續(xù)21 d的各種未提前預(yù)知的、不同類型的刺激，包括24 h禁止飲食，24 h禁止飲水，24 h連續(xù)的白光照明，4℃冰水條件下游泳，時間5 min，45℃烘箱進行熱烘刺激，持續(xù)5 min，夾住大鼠尾1 min，高速進行水平振蕩，大約3 min，100 V電壓電擊大鼠足底，持續(xù)1 min，尾懸掛，持續(xù)1 min，共9種刺激方式，21 d內(nèi)隨機安排，每天均選擇上午的9∶00進行，選擇9種刺激方式中的一種，每種刺激方式的次數(shù)≤3次.

1.3給藥方法 各組在進行孤養(yǎng)結(jié)合慢性應(yīng)激刺激后，即開始給藥.中藥組大鼠經(jīng)胃給大鼠灌服加味溫膽湯，12 g/（kg·d）；西藥組以同樣的方法給大鼠灌服氟西汀1.8 mg/（kg·d），模型組、空白組給大鼠灌服生理鹽水2 mL/（kg·d），每日早晨8∶30定時進行，共持續(xù)給藥28 d.

1.4觀察指標及方法

1.4.1糖水消耗量檢測 在進行正式實驗檢測前，預(yù)先對每只大鼠進行適應(yīng)訓練，使大鼠適應(yīng)糖飲水的刺激，待大鼠適應(yīng)后，對其禁水，并在24 h后行SD大鼠的糖水消耗試驗.每只大鼠給予可供大鼠自由口服的1瓶1%蔗糖水，限時供飲，時間為1 h，1 h后取走水瓶，并用電子天平檢測蔗糖水的消耗量（檢測前后瓶中水量之差，計算每只大鼠的糖水消耗量，檢測的時間點為第7、14、21、28天.

1.4.2Open?fie1d行為檢測 采用曠場實驗箱檢測，以大鼠穿越曠場實驗箱底面方塊的數(shù)量作為水平活動的得分（具體評分標準為：大鼠的四爪均全部進入方格方可計分）；而且以大鼠在箱內(nèi)直立次數(shù)作為垂直活動的得分（大鼠的兩前爪騰空或者是兩前爪攀附墻壁方可計分）.檢測時間同樣定在實驗的第7、14、21、28天，檢測時間為3 min/次.

1.4.3Western B1ot檢測 取大鼠海馬組織，提取蛋白后，采用標準蛋白檢測法檢測蛋白濃度；移取10 μL的蛋白液到新的1.5 mL EP管中，然后加入5 μL的RIPA buffer；室溫下放置5 min（保證充分裂解）；加15 μL的Laemm1i 1oading buffer并加熱到95℃，放置5～20 min；冰上冷卻5 min后，將蛋白及蛋白Marker加到4%～20%的膠上；標準SDS?PAGE電泳，并進行Western B1et轉(zhuǎn)膜，將蛋白轉(zhuǎn)到 PVDF膜上；加10～20 mL由 5%干奶粉和 0.05%的 Tris Buffered Sa1ine以及0.05%的Tween組成的混合液（TTBS）進行封閉，室溫1 h；加入1∶1000稀釋的外RaS抗體，4℃，過夜；用TTBS洗三次，10min/次；室溫下孵育二抗（稀釋濃度一般為1∶2000～1∶20000），TTBS洗三次，10 min/次；最后用 Chemi?1uminescence substrate顯色，曝光成像.

1.5統(tǒng)計學處理 采用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料用±s表示，組間比較用t檢驗，多個實驗組間的統(tǒng)計學差異采用單因素方差分析（one?way ANOVA）進行分析，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義.

2　結(jié)果

2.1糖水消耗量檢測 在實驗的第7、14天時，各組大鼠糖水消耗量比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）.實驗進行到第21天時，開始逐漸出現(xiàn)差異.模型組與空白組相比，糖水消耗量減少，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；中、西藥組與模型組比較，糖水消耗量增加，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）.第28天時，各組間差異進一步顯現(xiàn).與空白組比較，模型組大鼠的糖水消耗量相對增加，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與模型組比較，中、西藥組糖水消耗量增加，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；中、西藥組間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05，表1、圖1）.

表1　各組大鼠在抑郁形成過程中糖水消耗量比較（±s，g）

表1　各組大鼠在抑郁形成過程中糖水消耗量比較（±s，g）

aP＜0.05 vs模型組；bP＜0.01 vs空白組.

組別　n　7 d　n　14 d　n　21 d　n　28 d空白組　8　4.77±1.28　8　5.06±1.39　8　5.43±1.14　8　5.86±1.08模型組　8　4.83±0.95　8　4.39±1.60　8　2.93±1.15b　8　2.39±1.27b中藥組　8　4.92±1.78　8　5.30±1.47　8　5.75±1.57a　7　6.35±2.22a西藥組　8　5.19±1.47　8　5.48±1.52　8　5.76±1.74a　8　6.14±2.07a

圖1　各組大鼠在抑郁形成的不同時間段糖水消耗量比較

2.2Open-field行為學檢測 在第7、14天時，大鼠Open-fie1d行為學實驗中的水平運動得分以及他們在垂直運動方面的得分變化微小，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）.在第21天時，各組大鼠的運動得分情況出現(xiàn)差異.模型組大鼠的水平運動得分及垂直運動得分明顯低于空白組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；中、西藥組的大鼠在水平運動及垂直運動方面的得分均明顯高于模型組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）.第28天時，不同組大鼠之間的差異進一步增大.模型組大鼠水平運動及其垂直運動方面的得分均明顯低于空白組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；中藥和西藥組大鼠的水平運動得分與垂直運動得分明顯高于模型組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；中、西藥組大鼠之間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05，表2、3，圖2、3）.

表2　各組大鼠在抑郁形成的不同時間段Open?fie1d實驗水平運動得分比較　（±s，分）

表2　各組大鼠在抑郁形成的不同時間段Open?fie1d實驗水平運動得分比較?。ā纒，分）

aP＜0.05 vs模型組；bP＜0.01 vs空白組.

組別　n　7 d　n　14 d　n　21 d　n　28 d空白組　8　32.70±8.72　8　31.90±10.99　8　32.16±9.27　8　30.26±9.35模型組　8　31.23±6.78　8　25.41±9.32　8　16.24±8.70b　8　10.26±7.14b中藥組　8　32.60±6.27　8　28.57±7.63　8　24.71±9.56a　7　22.42±5.25a西藥組　8　33.40±7.70　8　28.34±9.23　8　25.61±7.96a　8　21.72±7.38a

表3　各組大鼠在實驗各階段Open?fie1d實驗垂直運動得分比較（±s，分）

表3　各組大鼠在實驗各階段Open?fie1d實驗垂直運動得分比較（±s，分）

aP＜0.05 vs模型組；bP＜0.01 vs空白組.

組別　n　7 d　n　14 d　n　21 d　n　28 d空白組　8　16.70±5.27　8　15.98±4.64　8　16.82±4.13　8　17.05±3.92模型組　8　16.60±6.68　8　13.30±5.74　8　8.98±3.75b　8　4.62±1.94b中藥組　8　17.80±4.56　8　14.91±6.57　8　12.21±4.78a　7　9.22±2.57a西藥組　8　16.30±3.84　8　13.74±5.05　8　13.62±3.66a　8　9.42±3.73a

圖2　各組大鼠在實驗各階段Open?fie1d實驗水平運動得分

2.3RaS蛋白檢測 在第7、14天時，大鼠海馬區(qū)RaS蛋白表達變化不明顯，各組之間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）.在實驗的第21天時，不同組的大鼠之間開始逐漸出現(xiàn)差異性.與空白組比較，模型組大鼠海馬區(qū)的RaS蛋白表達明顯減少，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與模型組比較，中、西藥組大鼠海馬區(qū)的RaS蛋白表達顯著增加，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；第28天時，與空白組比較，模型組大鼠海馬區(qū)的RaS蛋白表達顯著減少，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與模型組比較，中、西藥組RaS蛋白顯著增加，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；中、西藥組相同時間段的RaS蛋白表達比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05，圖4、5，表4）.

表4　各組大鼠在實驗各階段的RaS蛋白相對表達量比較（±s，%）

表4　各組大鼠在實驗各階段的RaS蛋白相對表達量比較（±s，%）

bP＜0.01 vs空白組；dP＜0.01 vs模型組.

組別　n　7 d　n　14 d　n　21 d　n　28 d空白組　8　34.32±11.65　8　43.33±16.65　8　52.45±22.45　8　60.45±23.23模型組　8　24.78±8.42　8　25.45±11.22　8　28.45±12.44b　8　30.45±13.67b中藥組　8　29.45±12.56　8　33.34±11.34　8　38.23±11.23d　7　45.66±21.45d西藥組　8　28.52±15.56　8　33.53±14.56　8　40.43±15.34d　8　44.34±19.45d

圖4　各組大鼠在實驗各階段的RaS蛋白表達（Western B1ot技術(shù)檢測；A空白組；B模型組；C中藥組；D西藥組）

圖5　各組大鼠在實驗各階段的RaS蛋白表達

3　討論

抑郁癥屬于中醫(yī)“郁”證范疇，歷代醫(yī)家對其病因病機早有闡釋，但總結(jié)起來總離不開濕、痰、熱、瘀阻滯氣機，導(dǎo)致臟腑功能失調(diào).對于調(diào)理脾胃法的認識，在歷代醫(yī)家的古籍文獻中，雖然沒有明確提出以調(diào)理脾胃法治療抑郁癥者，但相關(guān)古籍文獻，都蘊含著豐富的調(diào)理脾胃法治療思想.如《金匱要略·婦人雜病篇》：“婦人臟躁，喜悲傷欲哭，象如神靈所作，數(shù)欠伸，甘麥大棗湯主之”、“婦人咽中如有炙臠，半夏厚樸湯主之”.現(xiàn)代醫(yī)家對抑郁癥的治療，亦有個別研究涉及脾胃.但縱觀目前涉及脾胃臟腑治療抑郁癥的研究特點，在治療方法上多采用健脾、補脾之法，在病位上多認為抑郁癥為心脾、肝脾相兼為病，而單獨從脾胃入手者鮮見，且在藥物配伍上，以補法為主，少有針對脾胃轉(zhuǎn)樞作用采用升降并用的配伍方法進行遣方用藥［7-10］.本研究以調(diào)理脾胃法為指導(dǎo)，采用升降并用的藥物配伍思路，選用加味溫膽湯治療抑郁癥，前期臨床研究表明，加味溫膽湯具有較好的抗抑郁作用，且臨床副反應(yīng)較西藥氟西汀少［11-12］.由此可見，調(diào)理脾胃法治療抑郁癥具有臨床實踐依據(jù).

慢性不可預(yù)知應(yīng)激刺激（chronic unpredictab1e stress，CUS）模型方法是通過一系列應(yīng)激刺激（如電擊、剝奪食水、冷水浸泡、晝夜顛倒等）使動物在行為上出現(xiàn)活動能力下降的表現(xiàn)，從而模仿人類抑郁癥的行為狀態(tài).該模型不但可有效模擬人類抑郁行為特征表現(xiàn)，同時還存在血漿皮質(zhì)激素升高等與內(nèi)源性抑郁癥相似的狀態(tài)，該模型結(jié)合孤養(yǎng)可進一步模擬抑郁癥狀憂郁、寂寞、悲傷的情感狀態(tài).目前，該模型已得到國內(nèi)外的普遍認可，在抑郁癥發(fā)病機制的研究中被廣泛采用［13］.糖水攝入量可以反映大鼠對食物的欣快感，這一實驗反映了獎賞系統(tǒng)在抑郁癥中的作用.已有研究［14］證實，應(yīng)激后動物模型對獎賞的反應(yīng)性下降，出現(xiàn)了快感缺失.目前其已成為評價大鼠抑郁癥模型建立是否成功的標志之一［15］.曠場實驗是非常經(jīng)典的行為學實驗，可以有效體現(xiàn)實驗動物在新環(huán)境中的探究行為及動物的情緒變化，可用來測試動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的“興奮”或“抑郁”狀態(tài)，多用于抑郁癥藥效評價實驗［16-17］.本研究采用調(diào)理脾胃方加味溫膽湯干預(yù)孤養(yǎng)結(jié)合慢性不可預(yù)知應(yīng)激刺激模型，通過對大鼠糖水消耗量和曠場行為的檢測發(fā)現(xiàn)，加味溫膽湯具有抑郁模型糖水消耗量，改善抑郁模型快感缺失的功能，且其效應(yīng)隨著治療周次的增加，呈不斷遞進的關(guān)系，21 d開始顯效，28 d效果最佳；同時，加味溫膽湯具有改善抑郁模型大鼠空間認知能力、增加大鼠興奮性的功效，其效應(yīng)顯效時間為21 d，最佳時間為28 d.

RaS在細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中起著分子開關(guān)的作用，具有調(diào)控細胞黏附、促進細胞凋亡、抑制細胞運動、調(diào)節(jié)細胞形態(tài)等多種生物學功能.RaS家族蛋白一般情況下在質(zhì)膜的內(nèi)側(cè)聚集，并作為一種分子開關(guān)將胞外信號引入細胞核內(nèi)，具有調(diào)節(jié)和影響細胞增殖、分化的能力.RaS在介導(dǎo)細胞黏附，以及調(diào)節(jié)膜的突起形成和細胞遷移等方面具有重要作用，同時也可以調(diào)節(jié)細胞的增殖和凋亡等.在抑郁癥的研究中，已明確抑郁癥患者存在神經(jīng)元凋亡現(xiàn)象［18-19］，因此，了解Ras在抑郁癥及抗抑郁治療中的作用對抑郁癥的研究具有重要意義.目前關(guān)于RaS的研究較少，未見有RaS蛋白表達與抑郁癥關(guān)系的相關(guān)研究報道.本研究發(fā)現(xiàn)，加味溫膽湯具有上調(diào)RaS蛋白表達的作用，且其效應(yīng)隨著治療周次的增加，呈不斷遞進的關(guān)系，21 d開始顯效，28 d效果最佳.

綜上所述，結(jié)合加味溫膽湯對抑郁模型大鼠行為學的調(diào)節(jié)作用，加味溫膽湯對大鼠行為的改善作用與上調(diào)海馬區(qū)RaS蛋白表達趨勢同步，由此推斷，加味溫膽湯對抑郁模型大鼠具有較好的治療功效，其作用機制可能與上調(diào)海馬區(qū)RaS蛋白相關(guān).

【參考文獻】

［1］Kahn DA，Mo1ine ML，Ross RW，et a1.Major depression during conception and pregnancy：a guide for patients and fami1ies［J］. Postgrad Med，2001（Spec No）：110-111.

［2］Topuzog1uˇA，Binbay T，U1a? H，et a1.The epidemio1ogy of major depressive disorder and subthresho1d depression in Izmir，Turkey：Preva1ence，socioeconomic differences，impairment and he1p?seeking［J］. J Affect Disord，2015，181：78-86.

［3］Mak A，Tang CS，Chan MF，et a1.Damage accrua1，cumu1ative g1ucocorticoid dose and depression predict anxiety in patients with systemic 1upus erythematosus［J］.C1in Rheumato1，2011，30（6）：795-803.

［4］Jern P，Johansson A，Piha J，et a1.Antidepressant treatment of premature ejacu1ation：discontinuation rates and preva1ence of side effects for dapoxetine and paroxetine in a natura1istic setting［J］. Int JImpot Res，2015，27（2）：75-80.

［5］Zanos P，Piantadosi SC，Wu HQ，et a1.The prodrug 4?Ch1o?rokynurenine causes ketamine?1ike antidepressant effects，but not side effects，by NMDA/G1ycineB?site inhibition［J］.J Pharmaco1 Exp Ther，2015，355（1）：76-85.

［6］關(guān)于發(fā)布《關(guān)于善待實驗動物的指導(dǎo)性意見》的通知［J］.畜牧獸醫(yī)科技信息，2007（4）：35-36.

［7］李喜枝.產(chǎn)后抑郁癥中醫(yī)辨治初探［J］.云南中醫(yī)學院學報，1991，14（2）：1-2.

［8］孫清廉.抑郁癥的辯證施治［J］.家庭中醫(yī)藥，2011（12）：58-59.

［9］邢協(xié)強，謝新年.抑郁癥的中醫(yī)辯證論治［J］.醫(yī)學臨床研究，2003，20（7）：541-542.

［10］邸 杰.中醫(yī)治療抑郁癥的辯證思路［J］.中國醫(yī)藥指南，2009，7（7）：114-115.

［11］武 麗，張麗萍，陳貴海，等.解郁1號對抑郁大鼠血漿促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子和皮質(zhì)醇含量的影響［J］.時珍國醫(yī)國藥，2009，20（2）：513-514.

［12］夏 猛，覃振林，唐紅珍.調(diào)理脾胃法治療抑郁癥的衛(wèi)生經(jīng)濟學評價［J］.廣西醫(yī)學，2011，33（9）：1190-1192.

［13］Redei EE，Ahmadiyeh N，Baum AE，et a1.Nove1 anima1 mode1s of affective disorders［J］.Semin C1in Neuropsychiatry，2001，6（1）：43-67.

［14］郭曉云，崔東紅，顧 靖，等.ω?3多不飽和脂肪酸對慢性輕度應(yīng)激抑郁癥大鼠糖水攝入量及腦單胺類遞質(zhì)的影響［J］.中華精神科雜志，2007，40（4）：238-242.

［15］Wi11ner P.Va1idity，re1iabi1ity and uti1ity of the chronic mi1d stress mode1 of depression：a 10?year review and eva1uation［J］.Psycho?pharmaco1ogy（Ber1），1997，134（4）：319-329.

［16］Kushwah N，Jain V，Deep S，et a1.Neuroprotective Ro1e of Intermit?tent Hypobaric Hypoxia in Unpredictab1e Chronic Mi1d Stress Induced Depression in Rats［J］.PLoS One，2016，11（2）：e149309.

［17］Lu J，Shao RH，Hu L，et a1.Potentia1 antiinf1ammatory effects of acupuncture in a chronic stress mode1 of depression in rats［J］. Neurosci Lett，2016，618：31-38.

［18］戴 巍，李衛(wèi)東，盧 峻，等.電針對慢性應(yīng)激抑郁大鼠海馬神經(jīng)元凋亡及 JNK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響［J］.針刺研究，2010，35（5）：330-334.

［19］張麗萍，武 麗，張 曼.解郁1號對抑郁模型大鼠海馬神經(jīng)元細胞凋亡的影響［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2009，36（10）：1805-1806.

【中圖分類號】R285.5

【文獻標識碼】A

文章編號：2095?6894（2016）06?01?05

收稿日期：2016-05-20；接受日期：2016-06-04

基金項目：國家自然科學基金項目（81302930）；廣西自然科學基金項目（2012GXNSFBA053091）

作者簡介：王明杰.主治醫(yī)師.研究方向：疼痛疾病研究.E?mai1：45898628@qq.com

通訊作者：夏 猛.博士后，講師.研究方向：情志病證的中醫(yī)藥防治. E?mai1：hanksummer@163.com