嫁接對三種釀酒葡萄葉片生理與酶活性的影響*

王　海，郭愛霞（甘肅農業大學園藝學院，甘肅 蘭州730070）

嫁接對三種釀酒葡萄葉片生理與酶活性的影響*

王海，郭愛霞
（甘肅農業大學園藝學院，甘肅 蘭州730070）

為了探討嫁接對三種釀酒葡萄葉片生理特性與酶活性的影響，以5BB為砧木，黑比諾，赤霞珠，梅鹿輒為接穗進行嫁接，測定并比較嫁接苗葉片中丙二醛含量、葉綠素含量、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、過氧化物酶和多酚氧化酶的活性。結果表明：通過嫁接，黑比諾四種酶活性都顯著提高；梅鹿輒葉片中PPO活性降低，SOD，CAT，POD活性都顯著提高；赤霞珠POD活性下降，對其他3種酶無顯著影響。

釀酒葡萄；嫁接；酶活性；生理指標

我國葡萄嫁接栽培起步晚，發展不快，由于我國自然條件的多樣性，砧木應根據各地生態條件和栽培品種選配。目前我國科技部門引入砧木品種較多，對砧木特性和砧、穗組合研究較少，大大制約了對抗性砧木的利用和嫁接栽培的推廣［1～3］。隨著我國葡萄與葡萄酒產業的發展，近幾年剛剛發展起來的釀酒葡萄嫁接苗勢必取代傳統自根砧的扦插苗，因為嫁接苗比扦插苗更能滿足目前釀造優質葡萄酒的需求；如利用砧木的特性［4，5］來加強現有栽培品種的適應性和抗逆性；砧木嫁接苗更能保持接穗品種的優良性狀，改善果實品質［6～8］，從而可以從源頭上提高葡萄酒質量，故釀酒葡萄嫁接苗發展潛力巨大。5BB屬多抗性砧木，長勢旺盛，根系發達，入土深，生活力強，新梢生長極迅速。產條量大，易生根，利與繁殖，嫁接狀況良好［1］。甘肅地區地處干寒地區，土壤條件較差，對砧木要求較高，本試驗主要通過比較自根苗與嫁接苗葉片生理指標和酶活性差異，探討以5BB為砧木的嫁接對3種釀酒葡萄的影響，為釀酒葡萄適宜砧木的選擇以及5BB砧木在釀酒葡萄上的應用提供理論基礎。

1　材料與方法

1.1試驗材料

試驗于2015年4月至10月在甘肅農業大學園藝學院實訓園進行，以1年生5BB扦插苗為砧木，在生長期6月對黑比諾，赤霞珠和梅鹿輒品種進行綠枝嫁接，并以自根苗為對照，其余栽培管理條件一致。

1.2測定方法

1.2.1材料處理

于2015年9月20日，在試驗基地選擇生長健壯且長勢一致的植株18株，每個品種及其嫁接苗各3株。葉片取樣方法為：在每株植株上選擇成熟枝條中部的成熟葉片（每株采取3～4片），共18～24片葉，迅速裝入80mm×120mm的自封袋中放入裝有冰瓶的保溫箱帶回實驗室，放入冰箱在-18℃條件下保存。測定葉片中的丙二醛及葉綠素含量和過氧化氫酶，多酚氧化酶，過氧化物酶，超氧化物歧化酶四種酶的活性。以各自的自根苗為對照。

1.2.2測定方法［9］

葉片中葉綠素的含量測定采用紫外分光光度計法；用巴比妥酸（TBA）顯色法測定丙二醛（MBA）含量；過氧化氫酶活性測定采用紫外吸收法；過氧化物酶活性測定采用愈創木法；用四氮唑藍光還原法測定超氧化物歧化酶活性；多酚氧化酶活性測定用比色法；以上測定均重復3次。

1.3數據分析方法

用MicrosoftExcel2012軟件對所有數據處理并作圖。

2　結果與分析

2.1嫁接對3個釀酒葡萄品種葉片生理指標的影響

2.1.1對丙二醛含量的影響

丙二醛（MDA）是膜脂過氧化的主要產物之一，其含量的多少可代表膜損傷的嚴重程度。丙二醛產生數量的多少能夠代表細胞膜脂過氧化的程度，可以間接地反應植物組織抗氧化能力的大小。由圖1可以看出，嫁接對三個釀酒葡萄品種的葉片MDA含量產生了顯著的影響，除了黑比諾嫁接苗中丙二醛含量顯著高于其自根苗外，其他兩個嫁接組合的丙二醛含量均顯著低于其自根苗。這表明：5BB砧木嫁接對赤霞珠和梅鹿輒抗氧化能力的提高具有促進作用，且對赤霞珠的影響更為顯著，而對黑比諾的抗氧化能力提高有抑制作用。

2.1.2對葉綠素含量的影響

圖1　嫁接丙二醛含量的影響

在葉片中，葉綠體是光合作用的主要細胞器，在光合作用中，葉綠素對光能的吸收傳遞及光化學反應等起著重要的作用。

表1　嫁接對3個釀酒葡萄品種葉片中葉綠素含量的影響

由表1可以看出，黑比諾、赤霞珠、梅鹿輒嫁接于5BB后，與自根苗相比，葉綠素a，葉綠素b的含量均顯著增加，最高達28%。在生產中，砧木5BB的葉片表現出墨綠色，3個釀酒品種嫁接后，其葉色呈現濃綠色。這表明：嫁接對三種釀酒葡萄葉片葉綠素的提高有積極作用。

2.2嫁接對3個釀酒葡萄葉片保護酶活性的影響

2.2.1對SOD活性的影響

SOD是植物體內重要的抗性酶，SOD活性大小能較好地反映品種的抗逆性強弱。SOD活性越高，植物的抗旱性越強。由圖2可看出，黑比諾和梅鹿輒的嫁接苗中SOD活性顯著高于其自根苗，而赤霞珠嫁接苗中SOD活性與自根苗中SOD活性無顯著差異。這表明：5BB砧木對黑比諾和梅鹿輒SOD活性的提高具有促進作用，且對梅鹿輒的影響更為顯著，其SOD活性提高了約20%，而對赤霞珠中SOD活性無顯著影響。

圖2　嫁接對SOD活性的影響

2.2.2對CAT活性的影響

CAT主要存在于植物的微體中，屬于活性氧清除劑，CAT活性與植物的代謝強度及抗寒、抗病能力均有關系。由圖3可看出，5BB作砧木的嫁接對于黑比諾和梅鹿輒中CAT活性影響顯著，使其嫁接苗中CAT活性分別提高19%，16%。對于赤霞珠來講，嫁接對其無顯著影響。由此可知：5BB砧木嫁接對黑比諾和梅鹿輒CAT活性具有較強的促進作用，但對赤霞珠中CAT活性無顯著影響。

2.2.3對POD活性的影響

圖3　嫁接對CAT活性的影響

POD普遍存在于植物組織中，其活性高低與酚類物質代謝，植物抗性密切相關，活性高當然抗逆性就越強，低就越弱。

由圖4可看出，POD活性在三個釀酒葡萄品種嫁接苗和自根苗中的表現為：在5BB砧木嫁接的作用下，黑比諾和梅鹿輒嫁接苗中POD活性顯著上升，分別提升27%，22%；相反，5BB嫁接對赤霞珠嫁接苗中POD活性有顯著的抑制作用，下降約。

2.2.4對PPO活性的影響

圖4　嫁接對POD活性的影響

多酚氧化酶（PPO）是一種末端氧化酶，參與末端氧化。由圖5可看出：嫁接作用對于黑比諾和梅鹿輒有顯著影響。對于黑比諾自根苗而言，5BB作砧木嫁接有利于PPO活性的提高，提高約32%。相反對于梅鹿輒，嫁接作用使得嫁接苗葉片中的PPO活性顯著下降，下降約16%。對于赤霞珠，5BB砧木的嫁接對PPO活性無顯著影響。這表明：5BB作砧木對于黑比諾PPO活性的提高有促進作用，對梅鹿輒PPO活性的提高有抑制作用，而嫁接對于赤霞珠無顯著影響。

圖5　嫁接對PPO活性的影響

3　討論與結果

研究表明，砧木對接穗的影響因砧木，接穗，土壤類型及環境條件的不同而不同。砧木對接穗品種生長發育的影響是多方面的，主要表現在枝條生長量、單葉面積及葉綠素含量等方面，大致可分為增強和減弱接穗品種的生長勢兩種類型。如砧木101-14等可降低生長勢，用SO4、5BB、華佳8號砧木嫁接藤稔葡萄上其樹勢明顯強于扦插苗。周萬海等研究認為，赤霞珠、梅鹿輒嫁接在520A上，新梢生長量、葉綠索含量均顯著高于自根苗，而貴人香嫁接在520A上新梢生長量下降，葉綠素含量顯著高于自根苗［10］。

砧木5BB的嫁接對于赤霞珠和梅鹿輒的抗氧化能力的提高有積極作用，對黑比諾有不利的影響。三種釀酒品種黑比諾，赤霞珠，，嫁接與5BB上后，其葉綠素含量都顯著升高，最高可達36%。可以肯定，嫁接對其葉片營養生長有良好的促進作用，這為植株光合能力的提高奠定了物質基礎。通過嫁接，黑比諾品種葉片中SOA，CAT，POD，PPO活性均上升；梅鹿輒葉片中SOD，CAT，POD活性也均有所上升，而PPO活性有顯著下降，下降約16%；赤霞珠的嫁接苗中，SOD，CAT，PPO活性均無顯著變化，POD活性反而降低，降低約27%。同一個砧木對不同品種在生理特性及酶活力方面有不同的影響，對5BB砧木在生產中的廣泛應用應根據與不同品種嫁接后的實際生產表現來確定。

［1］陳萍，兀威.糖尿病合并肺部感染的診治［J］.中國實用內科學雜志，2004，24（6）：324-325.

［2］苗青，董平，閆子臣，等.老年糖尿病合并肺部感染的臨床研究［J］.實用心腦肺血管病雜志，2010，12（18）：1847-1848.

［3］苗麗.糖尿病并發肺部感染臨床分析［J］.中國實用醫藥，2010，5（16）：87-88.

［4］孫茜湯，志梅.呼吸機相關性肺炎的口腔護理進展［J］.護理實踐與研究，2011，8（20）：116-117.

［5］李書芬，魏淑華，余虹.老年患者肺部感染實施排痰的過程與護理［J］.貴陽中醫學院學報，2012，34（2）：102-104.

［6］郭云萍，馬繼紅，張曉華，等.機械通氣并發肺部感染的預防和護理現狀［J］.現代中西醫結合雜志，2011，20（22）：2858-2860.

TS261.4

甘肅農業大學盛彤笙科技創新基金（編號GSAU-STS-1329）。