廈門市同安區豬偽狂犬病流行病學調查

李謂娟楊　濤

（1.廈門市同安區動物衛生監督所　福建廈門　361100；2.廈門市動物疫病預防控制中心　福建廈門　361009）

廈門市同安區豬偽狂犬病流行病學調查

李謂娟1楊濤2

（1.廈門市同安區動物衛生監督所福建廈門361100；2.廈門市動物疫病預防控制中心福建廈門361009）

豬偽狂犬病是《國家中長期動物疫病防治規劃（2012-2020年）》中優先防治的16種動物疫病之一，到2020年全國所有種豬場豬偽狂犬病都要達到規劃設定的考核標準。廈門市同安區為了配合做好豬場凈化工作，掌握全區豬群豬偽狂犬病的感染狀況，對其進行流行病學調查，估計轄區內豬群豬偽狂犬病的血清學流行率。本研究使用豬偽狂犬病病毒gE-ELISA試劑盒，共檢測991份血清樣品，并實地調查20家豬場，了解豬場飼養管理和免疫情況。結果顯示，同安區豬偽狂犬病血清學場流行率為65.0%，個體真實流行率為47.5%（44.5%～50.4%）。

豬偽狂犬病血清學流行率

豬偽狂犬病（PR）是由偽狂犬病病毒（PRV）引起的豬的一種急性傳染病，不同階段豬表現不同癥狀，通常引起妊娠母豬流產，產木乃伊胎、死胎或弱仔，初生仔豬出現腹瀉和神經癥狀，感染率和病死率可高達100%，母豬出現返情，育肥豬多呈隱性感染，可出現發熱和輕微的呼吸道癥狀，耐過后生長發育遲緩，飼料報酬降低，并可長期帶毒、排毒，成為頑固傳染源［1］。從2011年首先在天津等地區開始發現生長育肥豬表現神經癥狀而死亡的新型豬偽狂犬病現象，到目前為止，我國主要養豬區域基本都有新型豬偽狂犬病發生。新型豬偽狂犬病感染主要表現在很多偽狂犬病陰性豬場PRV gE抗體檢測突然轉陽，新型豬PRV流行株比經典毒株對豬的致病性更強，多數豬場的生長肥育豬先發病，之后出現母豬流產，產死胎、弱仔，哺乳仔豬、保育豬、育肥豬等均可能出現腹瀉、呼吸道癥狀、神經癥狀等，死亡率很高，2014年開始福建許多豬場也出現該現象［2］。

《國家中長期動物疫病防治規劃（2012-2020）》將豬偽狂犬病列為優先防治的動物疫病病種之一，并將豬偽狂犬病作為種畜禽凈化的重點疫病，到2020年全國所有種豬場豬偽狂犬病都要達到凈化標準，中國動物疫病預防控制中心于2014年啟動了規模化養殖場豬偽狂犬病凈化示范場和凈化創建場的評估。廈門市同安區近兩年來一直執行生豬退養政策，只允許符合環保條件的規模豬場在限養區養殖，目前保留豬場20個，轄區內有1家原種豬場正在開展豬偽狂犬病凈化。為了有效做好豬偽狂犬病的凈化工作，必須掌握轄區內豬群豬偽狂犬病的感染狀況，從而為進一步的控制和凈化措施提供基礎數據，在廈門市動物疫病預防控制中心的指導下，同安區動物衛生監督所于2015年10月至11月在同安區開展了豬偽狂犬病流行病學調查，估計其場流行率和個體流行率。

1　材料與方法

1.1目標群同安區目前保留豬場20個，將所有豬場作為目標群，于2015年10月至11月采用橫斷面研究方法對20家豬場開展抽樣檢測，同時進行現場問卷調查，估計其豬偽狂犬病血清學流行率，并了解豬場飼養管理水平和豬偽狂犬病免疫等情況。

1.2抽樣策略和樣本量豬場內抽樣數量用估計流行率的方法進行計算［3］，按95%置信水平（CL）和15%可接受絕對誤差（d），設預期流行率為30%（p），根據計算公式：N=（1.96）2p（1-p）/d2，確定需要抽取的樣本量（N）為36，即每場隨機抽取36頭豬。現場抽樣時采取系統隨機抽樣方法，按一定的欄位間隔進行抽樣，抽取的豬群主要為育肥豬、生產母豬、保育豬和哺乳仔豬。

1.3血樣收集和檢測從豬場采集的全血樣品置于一次性采血器中，送至廈門市動物疫病預防控制中心獸醫實驗室進行血清分離，實施檢測前置于-20℃冷凍保存。血清樣品用ID.vet公司豬偽狂犬病病毒gE-ELISA試劑盒檢測PRV gE抗體。

1.4數據分析流行率估計：（1）群體水平流行率為檢測到的陽性場數量占所有檢測場數的比值，其中陽性場是指任何一個樣品檢測為gE抗體陽性，其所在豬場即定義為豬偽狂犬病陽性場。（2）個體水平表觀流行率為檢測到的陽性豬只數量占抽樣研究群數量的比值，必須通過直接標化法計算出全區的個體表觀流行率（AP'），標準化計算公式為：AP'=Σ （IhTh），其中Ih是不同豬場的陽性率，Th是不同豬群在總群中的分布比例，總體比例的95%置信區間（CI）根據公式：CI=AP'±Sp計算，Sp=［Σ（1-fh）/（nh-1）*Wh2*ph*（1-ph）］^0.5，式中，Sp是總體抽樣誤差，ph是第h層樣本中陽性率，Wh是第h層權重，nh是第h層樣本量，fh是第h層抽樣比例［4］；然后結合試劑敏感性（Se）和特異性（Sp）計算個體真實流行率（TP），計算公式：TP=（AP+Sp-1）/（Se+Sp-1）。陽性率的95% CI根據公式：CI=p±z計算，其中p是陽性率，z為標準正態分布中概率為0.05所對應的值，n為抽樣數量。

2　結果與分析

2.1豬場gE抗體檢測結果共采集了20個豬場的血清樣品991份，檢出gE抗體陽性樣品546份，其中豬偽狂犬病陽性場有13個，陽性場中gE抗體陽性率最低為9.5%，另有5個豬場gE抗體陽性率高達100%，具體檢測結果見表1。

2.2流行率估計調查結果顯示，同安區豬偽狂犬病血清學場流行率為65.0%，個體表觀流行率通過抽樣權重分析后為46.5%（見表1），根據ELISA診斷試劑盒的試驗敏感性（Se=98%）［5］和特異性（Sp= 99.9%），得到同安區豬偽狂犬病血清學個體真實流行率為47.5%（44.5%～50.4%）。

表1　豬場gE抗體檢測結果

2.3不同豬群gE抗體陽性率比較從不同豬群gE抗體陽性率分布情況來看，育肥豬的gE抗體陽性率最低，其次為生產母豬和哺乳仔豬，保育豬的gE抗體陽性率最高，經x2檢驗，P=0.000，說明不同豬群之間gE抗體陽性率存在顯著差異，具體數據見表2。

表2　不同群豬gE抗體陽性率分布情況

2.4調查表統計結果調查問卷共設計20個問答題，涉及豬場飼養管理、免疫情況、豬偽狂犬病發病情況等內容，并調查了豬場使用的豬偽狂犬疫苗生產廠家。對調查問卷進行整理統計，20個豬場均對病死豬實行了無害化處理，都使用豬偽狂犬病病毒gE基因缺失活疫苗，除個別一兩家外，生產管理和生物安全水平都比較好，豬偽狂犬病疫苗分別來自6個廠家，其中4個為國產疫苗，2個為進口疫苗，調查內容見表3。

表3　20家豬場問卷調查結果

3　討　論

3.1同安區豬偽狂犬病血清學流行率較高調查結果顯示，同安區豬偽狂犬病血清學流行率較高，20個豬場中13個為豬偽狂犬病陽性場。同安區生豬養殖高峰期在2013年，未執行生豬退養政策前，規模化養殖與小型散養共存，養殖場（戶）技術水平、管理水平、養殖環境參差不齊，疫病防控工作難度較大，自福建省豬場在2014年出現新型豬PRV感染現象后，同安區豬場也未能幸免，這可能是偽狂犬病流行率居高不下的主要原因。本次調查發現，7個豬偽狂犬病陰性場有6個建成與投入使用的時間都在2009-2011年，屬于比較新的場，而且場址均位于半山區，周圍3 km內無其他養殖場，且有天然山體屏障，由于便于疫病防控，降低了豬偽狂犬病傳入豬場的風險。

3.2加強免疫是目前防控豬偽狂犬病的主要手段目前不同階段豬群PRV gE抗體陽性率均較高，現階段開展豬場豬偽狂犬病凈化難度非常大。林文耀等對2011-2015年規模化豬場偽狂犬病野毒感染血清學流行病學調查的結果表明，豬偽狂犬病流行有持續上升的趨勢，仍是未來一段時間養豬業重要傳染病之一［6］。王繼春等用豬偽狂犬病活疫苗（Barta K61株）對仔豬免疫1次，1周后用豬偽狂犬病病毒變異株（AH02LA）攻毒，結果顯示可以抵御偽狂犬病病毒變異株攻擊［7］，因此，在現階段，加強偽狂犬病疫苗免疫，選擇質量穩定的疫苗，制定合理免疫程序，增加免疫次數，特別是加強仔豬和生豬肥育豬的免疫，是防控偽狂犬病的有效手段。

3.3加強監測，開展種豬群凈化問卷調查結果顯示，50%豬場有外購種豬經歷，90%豬場認為購入種豬時經過檢測，經深入調查發現，檢測的項目主要為國家強制免疫的疫病抗體，豬場對引進種豬雖然有隔離，但并未能執行嚴格的隔離檢測措施，這是豬場疫病防控的重大隱患。因此，豬場必須加強引種管理，要從偽狂犬病陰性豬場引進種豬，建設獨立的引種隔離舍，隔離后檢測合格方可混養。針對母豬群PRV gE抗體陽性的豬場，可根據陽性率高低制定相應的凈化措施，逐步監測淘汰陽性種豬，同時加強飼養管理，通過養殖設施改造、對不同階段豬群進行隔離飼養、嚴格執行生物安全措施和滅鼠等綜合措施防控偽狂犬病。

［1］斯特勞B E，阿萊爾S D，蒙加林W L，等.豬病學［M］.8版.趙德明，張中秋，沈建忠，等譯.北京：中國農業大學出版社，2000：239-253.

［2］白挨泉.新型豬偽狂犬病流行情況及凈化措施［J］.獸醫導刊，2016（2）：22-24.

［3］沈朝建，王幼明.獸醫流行病學調查與監測抽樣技術手冊［M］.北京：中國農業出版社，2013：43.

［4］孫向東，劉擁軍，王幼明.獸醫流行病學調查與監測：抽樣技術［M］.北京：中國農業出版社，2011：85-86.

［5］Morenkov O S，Fodor N，Fodor I.Indirect ELISAs based on recombinant and affinity-purified glycoprotein E of Aujeszky's disease virus to differentiate between vaccinated and infected animals［J］.Acta Vet Hungarica，1999，47（1）：137-150.

［6］林文耀，曾容愚，李聰，等.2011-2015年規模化豬場偽狂犬病野毒感染血清學流行病學調查［J］.養豬，2016（2）：113-116.

［7］王繼春，曾容愚，Daniel T，等.豬偽狂犬病活疫苗 （Bartha K61株）對變異株的保護效力［J］.畜牧與獸醫，2015，47（12）：1-4.

Epidemiological investigation of pseudorabies in Tongan，Xiamen

Li Weijuan1Yang Tao2
（1.Tongan Animal Health Inspection Institute，Xiamen 361100；2.Xiamen Center for Animal Disease Control and Prevention，Xiamen 361009）

According to the Chinese National Medium and Long-term Plan for Animal Epidemic Prevention and Control，all swine breeding farms must to achieve criteria of pseudorabies（PR）elimination by 2020.In order to understand the infection status of pseudorabies in Tongan，an epidemiological investigation was conducted to estimate the prevalence of pseudorabies.PRV gE-ELISA kit was used to test gE antibody，a total of 991 serum samples were tested and 20 pig farms were investigated to know management and immune state.The result showed that the herd prevalence of pseudorabies was 65.0%and the individual true prevalence was 47.5% （44.5%～50.4%）.

Pseudorabies Serologic Prevalence

A

1003-4331（2016）04-0015-04