氣相色譜—質譜聯用測定馬甲子果脂溶性成分

馬怡 趙玉丹 江滔 楊孝容

摘要：用氣相色譜-質譜聯用技術鑒定馬甲子果脂溶性成分，馬甲子果用95%乙醇提取，濃縮液分別用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，將石油醚層減壓濃縮近干后用正己烷溶解，用氣相色譜——質譜聯用技術對其分析鑒定，以峰面積歸一化法計算各組分的相對含量。結果檢出51種化學組分，鑒定出其中28種，含量占總量的84.71%，其中甾類物質和酯類物質分別為65.13% 和11.38%。甾體是馬甲子果的主要成分。

關鍵詞：氣相色譜-質譜聯用；馬甲子[Paliurus ramosissimus （Lour.） Poir.]果；脂溶性成分，測定

中圖分類號：R284.2 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）05-1281-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.05.049

Determination for Liposoluble Compounds from the Fruit of

Paliurus Ramosissimus by GC-MS

MA Yia，ZHAO Yu-dana，JIANG Taob，YANG Xiao-rongb

（Leshan Normal University， a. Applied Chemistry， College of Chemistry； b. College of Chemistry， Leshan 614004， Sichuan， China）

Abstract： To analyze the liposoluble compounds from the fruit of Paliurus ramosissimus by gas chromatograph - mass sepectrometer （GC-MS）. The fruit solution concentrated with 95% ethanol was extracted by petroleum ether， ethyl acetate and n-butyl alcohol successively. The petroleum ether layer was evaporated and dissolved with hexane， then the liposoluble compounds were separated and identified by GC-MS. The relative content of each component was identified by method of peak area normalization. The results showed that 51 chemical components were separated and 28 components were identified， accounting about 84.71% from petroleum ether extracts， in which sterides and esters were 65.13% and 11.38% respectively. The sterides were the most liposoluble components in the fruit of Paliurus ramosissimus.

Key words：GC-MS；fruit of Paliurus ramosissimus；liposoluble components

馬甲子為鼠李科銅錢樹屬植物馬甲子[Paliurus ramosissimus （Lour.） Poir.]，又名鐵籬笆、竻子、雄虎刺、鐵菱角等，分布于西南及江蘇、浙江、福建、江西、湖南、廣西、臺灣等地[1]。農戶種植馬甲子作果園、菜園、苗圃和魚塘等圍園籬笆衛士。民間馬甲子是一種中藥，主要功效為祛風散瘀，解毒消腫，用于治療風濕痹痛，跌打損傷，咽喉腫痛，癰疽，除寒活血，發表解毒，瘋狗咬傷等；馬甲子果主治化瘀生新，治吐血，療痔瘡等，民間用于治療不明腫塊[1]。馬甲子化學成分的研究主要集中在根和莖，有三萜類、環肽生物堿等[1-7]，馬甲子果化學成分的研究較少，其成分有三萜類、香豆素類和二氫黃酮類等[8，9]。氣相色譜-質譜聯用（GC-MS）作為一種分析手段在揮發性組分和脂溶性成分測定方面應用廣泛[10-15]，但將其用于定性分析馬甲子果脂溶性成分的研究鮮見報道，本研究采用GC-MS定性測定馬甲子果脂溶性組分，為馬甲子果的開發利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Thermo氣相色譜-質譜聯用儀（ISQLT Single Quadrupole Mass Sepectrometer，TRACE 1310 Gas Chromatograph，STriplus RSH）；ZN-400A型高速萬能粉碎機（吉首市中誠制藥機械廠）；RE52AA旋轉蒸發器（上海亞榮生化儀器廠）；SHZ-III循環水真空泵（上海亞榮生化儀器廠）；KQ3200E型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；0.20 μm希波氏一次性針式過濾器。

馬甲子果：2014年10月采自四川省樂山市土主鎮果園圍墻馬甲子的果實，除去樹葉殘枝等雜物，自然陰干后，用粉碎機粉碎成粉，待用。

95%乙醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，正己烷，所用試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 樣品溶液的處理 馬甲子果5 kg，粉碎，用95%乙醇1∶3（m∶V）浸提取3次，浸泡24 h/次，提取液濃縮后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，取少量石油醚萃取液濃縮至近干，用正己烷溶解，用0.20 μm希波氏一次性針式過濾器過濾供GC-MS分析。

1.2.2 GC-MS分析條件 GC條件：進樣口溫度320 ℃；載氣為高純He，恒流模式，流速1 mL/min；不分流進樣，進樣量1 μL；色譜柱為TG-SQC （15 m × 0.25 mm × 0.25 μm，Thermo PN 26070-1300）；升溫程序：初始溫度60 ℃，保持1 min，以6 ℃/min升溫至180 ℃，保持12 min，以20 ℃/min升溫至230 ℃，保持1min，再以2.5 ℃/min升溫至300 ℃，保持10 min。 MS條件：電子轟擊電離（EI）源，電子能量70 eV；離子源溫度280 ℃，質譜傳輸線溫度280 ℃，溶劑延遲時間3 min，掃描質量范圍為40～650。數據庫使用NIST 2015標準質譜圖庫。

2 結果與分析

按“1.2.1”處理馬甲子果的脂溶性成分，按“1.2.2”分析條件進行GC-MS分析。從GC-MS圖譜中得到51個化學組分峰，經計算機檢索質譜數據庫NIST 2015和人工譜圖解析，確定化學成分28種，用峰面積歸一化法測出它們的相對含量為84.71%。總離子流圖見圖1，分析結果見表1。

3 結論

確認的28種化合物占總成分的84.71%，含量居前三位的是γ-谷甾酮、羽扇豆醇和γ-谷甾醇，含量分別為26.49%、11.97%和7.11%。其中甾類化合物10種占總成分的65.13%，酯類化合物9種占總成分的11.38%，剩余的9種包括有機酸1種、飽和醇1種、不飽和醇1種、烯烴2種、酮2種、烯醛2種，9種占總成分的8.20%。在馬甲子果脂溶性成分中甾類化合物是主要的，占總成分的近2/3；其次是酯類化合物。

參考文獻：

[1] 南京中醫藥大學.中藥大辭典（上冊）[M].第二版.上海：上海科學技術出版社，2006.

[2] 韋國鋒， 覃道光， 黃志文.馬甲子鎮咳祛痰作用及其化學成分的提取分離[J].右江民族醫學院學報， 1998（2）： 176-178.

[3] LEE S S，SU W C，LIU K C. Two new triterpene glucosides from Paliurus ramosissimus[J]. J Nat Prod，1991，54（2）：615-618.

[4] LEE S S，LIN C J，LIU K C.Two triterpenes from Paliurus ramosissimus[J]. J Nat Prod，1992，55（5）：602-605.

[5] LIU H Y，CHEN C H， YOU B J，et al. Cyclopeptide alkaloids from Paliurus ramosissimus[J]. J Nat Prod，2000，63（4）：1338-1342.

[6] LEE S S，SU W C，LIU K C，et al Cyclopeptide alkaloids from stems of Paliurus Ramosissimus[J].Phytochemistry，2001，58：1271-1278.

[7] LIN H Y，CHEN H，LIU K C.14-Membered Cyclopeptides from Paliurus ramosissimus and P. hemsleyanus[J]. HELVETICA CHIMICA ACTA，2003，86：127-130.

[8] 于 磊，張東明.鐵籬巴果化學成分的研究[J].中國中藥雜志，2006，31（24）：2049-2052.

[9] 于 磊，楊敬芝，張東明.鐵籬巴果中的三萜成分研究[J].藥學學報，2009，44（6）：625-627.

[10] 李曉飛，晏 容，劉 云，等.梭毒隱翅蟲脂溶性成分的氣相色譜一質譜聯用分析[J].湖北農業科學，2012，51（19）：4366-4369.

[11] 熊汝琴，王 銳，陳順芳，等.不同產地紅天麻揮發性成分分析[J].湖北農業科學，2014，53（17）：4167-4169.

[12] 馬合木提·買買提明，米麗班·霍加，賽力慢·哈得爾，等.GC-MS法分析檉柳實揮發油的化學成分[J].華西藥學雜志，2015， 30（2）：219-221.

[13] 丁怡然，黃 云，趙婷婷，等.氣相色譜-質譜法測定水體中5種典型有機紫外防曬劑[J].色譜，2014，32（6）：629-634.

[14] 歐陽玉祝，張辭海，魏 燕，等.氣相色譜-質譜聯用分析倍花中化學成分[J].分析科學學報，2013，29（3）：431-434.

[15] 王林江，李瑞玲，王 杰，等.白英中脂溶性化學成分氣相色譜-質譜聯用法測定的研究[J].時珍國醫國藥，2010，21（2）：311-313.